HRP催化的反应式为: HR DH2+H2OE→ D+2H20 H,O,为受氢体,HRP对受氢体的专一性 很高 供氢体DH,习惯上被称为底物,底物有多 种
DH2+H2O2→ → → D+2H2O 供氢体DH2习惯上被称为底物,底物有多 种 H2O2为受氢体,HRP对受氢体的专一性 很高 HRP催化的反应式为: HR P
常用底物 四甲基联苯胺TMB 黄色 邻苯二胺OPD HRP的常见底物 3,3'-二氨基联苯胺 (DAB) 棕黄色 黄褐色
邻苯二胺 OPD HRP的常见底物 四甲基联苯胺 TMB 3,3’-二氨基联苯胺 (DAB) 常用底物 黄色 棕黄色 黄褐色
(二) 碱性磷酸酶 (alkaline phosphatase, 是一种磷酸酯水解酶,从大肠杆菌提取 AP的 对-硝基苯磷酸 经AP作用后的产物为黄色对 底物 酯 pNPP) 硝基酚,最大吸收峰波长为 405nm。 敏感性高于HRP,但不易获得高纯度的制品、稳 定性差,价格贵
(二)碱性磷酸酶 (alkaline phosphatase, 是一种磷酸酯水解酶,从大肠杆菌提取 AP) AP的 底物 对-硝基苯磷酸 酯( pNPP ) 经AP作用后的产物为黄色对 硝基酚,最大吸收峰波长为 405 nm。 敏感性高于HRP,但不易获得高纯度的制品、稳 定性差,价格贵
酶免疫标记技术类型和应用 免疫酶组化技术 组织切片或其它标本中抗原的定位 免疫酶技术 均相酶免疫测定 酶免疫测定 液体标本中抗原或 固相酶免疫测定 抗体的定性和定量 非均相酶 (ELISA) 免疫测定 液相酶免疫测定
酶免疫标记技术类型和应用 免 疫 酶 技 术 免疫酶组化技术 酶免疫测定 均相酶免疫测定 非均相酶 免疫测定 固相酶免疫测定 (ELISA) 液相酶免疫测定 组织切片或其它标本中抗原的定位 液体标本中抗原或 抗体的定性和定量
酶联免疫吸附试验(ELISA) 一、 基本原理 供行台回旧 4底物显色 的抗原抗体复合物 定性或定量的分析 与未结合的分离
酶联免疫吸附试验(ELISA) 一、基本原理 底物显色 定性或定量的分析 包被 将已知抗原或抗体 吸附在固相载体表 面 反应 加入待测抗体或 抗原和酶标抗原 或抗体 洗涤 使结合在固相上 的抗原抗体复合物 与未结合的分离 1 2 3 4