间接免疫荧光法示意图 CD3 CD8
间接免疫荧光法示意图
免疫酶标记技术(ELA) 将抗原抗体反应的特异性和酶的高效催化作用相结合， 通过酶作用于底物后显色。 优点： 灵敏度高 特异性强 可检测可溶性Ag或Ab 组织or细胞表面特异性Ag
免疫酶标记技术（ELA） 优点： 灵敏度高 特异性强 将抗原-抗体反应的特异性和酶的高效催化作用相结合， 通过酶作用于底物后显色。 可检测可溶性Ag或Ab 组织or细胞表面特异性Ag
基本原理 底物 酶标抗体（抗原) 抗原 与抗原（抗体）的 酶标抗体 特异性反应 酶对底物的显色反 应 ● 对抗原或抗体进行 定位、定性或定量 的测定分析
基本原理 • 酶标抗体（抗原） 与抗原（抗体）的 特异性反应 • 酶对底物的显色反 应• 对抗原或抗体进行 定位、定性或定量 的测定分析 底物 E 酶标抗体 E E 抗原
标记酶的要求 活性高 专一性强 不影响抗原抗体的免疫反应性和酶活性 底物易于配制、保存 催化底物产生的信号产物易于观察和检测 对人无害、低廉、易得 HRP AP
标记酶的要求 活性高 专一性强 不影响抗原抗体的免疫反应性和酶活性 底物易于配制、保存 催化底物产生的信号产物易于观察和检测 对人无害、低廉、易得 HRP AP
常用的酶 1、辣根过氧化物酶 (horseradish peroxidase HRP) 糖蛋白（主酶）》 纯度数(RZ)值与 亚铁血红素（辅基） 酶活性无关，酶活 主酶与酶活性无关 性单位(U)比RZ 辅基是酶的活性中心 值更为重要 辣根过氧化物酶(HRP) RZ值：403nm(铺基) 与275nm(主酶)0D 酶的纯度并不代表 值之比 酶的活力
辣根过氧化物酶（HRP） 糖蛋白（主酶） 亚铁血红素（辅基） 主酶与酶活性无关 辅基是酶的活性中心 RZ值：403nm （辅基） 与275nm（主酶）OD 值之比 纯度数（RZ）值与 酶活性无关，酶活 性单位（U）比RZ 值更为重要 酶的纯度并不代表 酶的活力 1、辣根过氧化物酶 （horseradish peroxidase , HRP） 常用的酶