纸上层析 Paper Chromatography
1 纸上层析 Paper Chromatography
目录 纸色谱法的基本理论 二几种特殊类型的纸色谱法 三应用举例
2 目录 • 一 纸色谱法的基本理论 • 二 几种特殊类型的纸色谱法 • 三 应用举例
基本原理 固定相滤纸上的吸附水 (或用甲酰胺、二甲基甲酰胺、丙二醇处理) 流动相—溶剂 (乙醇、丙醇、丙酮及与水不相溶的溶剂) 原理:根据溶质A在流动相与固定相(纸纤维中吸着 的水分)中的分配系数不同,流动相因毛细现象 沿纸上升,KD大的前进慢,KD小的上升快,因而 溶质得到分离。 A 固定相 (但也有人认为属离子交换 A 色谱和吸附色谱或三者皆有) 流动相
3 原理：根据溶质A在流动相与固定相（纸纤维中吸着 的水分）中的分配系数不同，流动相因毛细现象 沿纸上升，KD大的前进慢，KD小的上升快，因而 溶质得到分离。 D [A] [A] K = 固定相 流动相 固定相——滤纸上的吸附水 (或用甲酰胺、二甲基甲酰胺、丙二醇处理) 流动相——溶剂 （乙醇、丙醇、丙酮及与水不相溶的溶剂） （但也有人认为属离子交换 色谱和吸附色谱或三者皆有） 一 . 基本原理
纸色谱示意图 比移值R1= 层析纸 溶剂故8y R 起始线 (原点)R+>0.02,A、B可分离 展开剂 层析缸 与标样比较可定性鉴定
4 纸色谱示意图 Rf > 0.02，A、B可分离. 1 2 f 1 f 2 f x R y x R y x R y = = = 比移值 溶剂前沿 起始线 （原点） 展开剂 y x2 x1 层析缸 层 析 纸 与标样比较可定性鉴定
二.影响R的因素 1.展开剂种类 氨基酸的R值 天 冬甘白谷丝组 氨氨氨氨氨氨 酸酸酸酸酸酸 展开剂 正丁醇+吡啶+水0200290.600.200.33024 正丁醇+醋酸+水0.230.230.700.280.220.11 12:3:5
5 氨基酸的Rf值 展开剂 正丁醇+吡啶+水 0.20 0.29 0.60 0.20 0.33 0.24 1 : 1 : 1 正丁醇+醋酸+水 0.23 0.23 0.70 0.28 0.22 0.11 12 : 3 : 5 天 冬 氨 酸 甘 氨 酸 白 氨 酸 谷 氨 酸 丝 氨 酸 组 氨 酸 1. 展开剂种类 二. 影响Rf的因素