•作用机制 切断DNA双链中一股链,使DNA 拓扑异 解链旋转不致打结;适当时候封 构酶I 闭切口,DNA变为松弛状态。 反应不需ATP。 切断DNA分子两股链,断端通过 拓扑异 切口旋转使超螺旋松弛。 构酶Ⅱ 利用ATP供能,连接断端,DNA 分子进入负超螺旋状态
拓扑异 构酶Ⅰ 切断DNA双链中一股链,使DNA 解链旋转不致打结;适当时候封 闭切口,DNA变为松弛状态。 反应不需ATP。 拓扑异 构酶Ⅱ 切断DNA分子两股链,断端通过 切口旋转使超螺旋松弛。 利用ATP供能,连接断端, DNA 分子进入负超螺旋状态。 •作用机制
2解旋酶(helicase) 也称为解链酶,解旋酶解开DNA双链,但需要 ATP水解供能,每解开一对碱基,需要水解2分子 ATP。 在原核生物中,解旋酶不止有一种。这说明不仅 在复制过程中需要DNA解旋酶,在许多其它的过 程,如转录、DNA修复、DNA重组中也同样需要
2 解旋酶(helicase) 也称为解链酶,解旋酶解开DNA双链,但需要 ATP水解供能,每解开一对碱基,需要水解2分子 ATP。 在原核生物中,解旋酶不止有一种。这说明不仅 在复制过程中需要DNA解旋酶,在许多其它的过 程,如转录、DNA修复、DNA重组中也同样需要
3单链DNA结合蛋白(single strand binding protein,SSB protein) 大肠杆菌的SSB蛋白由4个相同亚基构成,其 功能在于稳定解开的DNA单链,阻止DNA复性和 保护单链部分不被核酸酶降解。 原核生物的SSB蛋白与DNA的结合表现出明显 的协同效应,SSB蛋白可以重复利用
3 单链DNA结合蛋白(single strand binding protein, SSB protein) 大肠杆菌的SSB蛋白由4个相同亚基构成,其 功能在于稳定解开的DNA单链,阻止DNA复性和 保护单链部分不被核酸酶降解。 原核生物的SSB蛋白与DNA的结合表现出明显 的协同效应,SSB蛋白可以重复利用
4引发酶(primase) 又称引物合成酶,是一条分子量约为60ku的单 肽链,每个细胞约有50-100个分子,该酶单独存在时 相当不活泼,只有与其他蛋白质相互作用结合成一 个复合体时才有活性,这种复合体称为引发体 (primosome)。合成的引物是长约5-10个核苷酸的 RNA。一旦RNA引物合成,就可以由DNA聚合酶Ⅲ 在它的3'-OH上继续催化DNA新链的合成
4 引发酶(primase) 又称引物合成酶,是一条分子量约为60ku的单 肽链,每个细胞约有50-100个分子,该酶单独存在时 相当不活泼,只有与其他蛋白质相互作用结合成一 个复合体时才有活性,这种复合体称为引发体 (primosome)。合成的引物是长约5-10个核苷酸的 RNA。一旦RNA引物合成,就可以由DNA聚合酶Ⅲ 在它的3′-OH上继续催化DNA新链的合成
5DNA聚合酶I、Ⅱ、Ⅲ(DNA polymerase I、Ⅱ、Ⅲ) DNA聚合酶是以DNA为模板,催化底物(dNTP) 合成DNA的酶类,普遍存在于生物体内。它们的作 用方式基本相同,都需要dNTP、Mg+、模板DNA 和引物,在DNA模板指导下,催化底物加到引物的 3′-OH上,形成3',5’磷酸二酯键,由5′→3 方向延长DNA链。引物是DNA合成所必需的
DNA聚合酶是以DNA为模板,催化底物(dNTP) 合成DNA的酶类,普遍存在于生物体内。它们的作 用方式基本相同,都需要dNTP、Mg2+、模板DNA 和引物,在DNA模板指导下,催化底物加到引物的 3′-OH上,形成3′,5′磷酸二酯键,由5′→3′ 方向延长DNA链。引物是DNA合成所必需的。 5 DNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ(DNA polymerase Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)