嗜热菌蛋白酶 0 0 9 H2N-CH-C-N- CH-C-N-CH-C-N- CH- R1 -I R TH 氨肽酶 胰凝 非 胃蛋白酶 芳香族 乳蛋 白酶 极性从
O O O H 2N－CH－C－N－CH－C－N－CH－C－N－CH－ R1 H R2 H R3 H R 4 氨 胃 芳 胰凝 非 肽 蛋 香 乳蛋 极 酶 白 族 白酶 性 酶 AA AA 嗜热菌蛋白酶
0 0 0 0 -N-CH-C N-CH-CN-CH-C N-CH-COOH H R5 H R7 H R。 碱 Met 产 胰蛋白酶 化氰 羧肽酶
O O O O －C－N－CH－C－N－CH－C－N－CH－C－N－CH－COOH H R5 H R6 H R7 H R n 碱 Met 性 AA Lys Arg 胰 蛋 白 酶 溴 化 氰 羧 肽 酶
三、蛋白质一级结构的测定 1、样品预处理：样品须纯化，测分 子量，加入含巯基乙醇的高浓度尿素溶液， 使Pr分子中的二硫键和非共价键断开。 2、测定AA组成：样品用6moI/LHCI 在110C水解24h,再用AA自动分析仪进行 测定。 3、肽链末端AA的测定：用Sanger反 应或Edman)反应测定N-末端AA;用羧肽酶 测定C末端AA
三、蛋白质一级结构的测定 1、样品预处理：样品须纯化，测分 子量，加入含巯基乙醇的高浓度尿素溶液， 使Pr分子中的二硫键和非共价键断开。 2、测定AA组成：样品用6mol/LHCl 在110 oC水解24h，再用AA自动分析仪进行 测定。 3、肽链末端AA的测定：用Sanger反 应或Edman反应测定N-末端AA；用羧肽酶 测定C-末端AA
4、用蛋白酶水解成小肽链段，并分离纯化。 5、测定每个肽段的AA顺序：用Edman降解 法或序列仪进行测定。 6、确定整个肽段的AA序列。 A:Gly-Lys-Asn-Tyr Ala-Phe His-Val Arg-Tyr B:Ala-Phe-Gly-Lys Tyr-His-Val Asn-Tyr-Arg 确定排列：Ala-Phe-Gly-Lys-Asn-Tyr-Arg Tyr-His-Val 回首页
A: Gly-Lys-Asn-Tyr Ala-Phe His-Val Arg-Tyr B: Ala-Phe-Gly-Lys Tyr-His-Val Asn-Tyr-Arg 确定排列:Ala-Phe-Gly-Lys-Asn-Tyr-ArgTyr-His-Val 4、用蛋白酶水解成小肽链段,并分离纯化。 5、测定每个肽段的AA顺序：用Edman降解 法或序列仪进行测定。 6、确定整个肽段的AA序列。 回首页
第二节AA的分解与转化 AA的共同代谢途径： R-C-COOH NH3 R-CH-COOH 0 NH2 基作用 R-CH2-NH2 CO2
第二节 AA的分解与转化 AA的共同代谢途径： R－C－COOH + NH3 R－CH－COOH O NH2 R－CH2－NH2 + CO2 脱羧基作用 脱氨基作用