4.转移注射卵 假孕母鼠:输卵管转移和子宫转移 5.鉴定和鼠系建立 胚鼠组织、胎鼠组织、幼鼠尾巴:外源 基因的整合检测,确定转基因鼠 幼鼠血液:表达水平检测
4. 转移注射卵 假孕母鼠:输卵管转移和子宫转移 5. 鉴定和鼠系建立 胚鼠组织、胎鼠组织、幼鼠尾巴:外源 基因的整合检测,确定转基因鼠 幼鼠血液:表达水平检测
鉴定方法 ApCR soUthern blot 中染色体原位杂交 noRthern blot AURT-PCR en Western blot FeLISA
鉴定方法 PCR Southern blot 染色体原位杂交 Northern blot RT-PCR Western blot ELISA ……
第二节基因打靶( gene targeting) (定向基因转移,基因组靶向编辑) 通过DNA定点同源重组,改变基因组中的某 特定基因,从而在生物体内研究此基因的功能 基因敲除( gene knockout):将某个基因定向去除 基因敲入( gene knockin):定向将一段基因序列替 代另一段基因序列
第二节 基因打靶(gene targeting) (定向基因转移,基因组靶向编辑) 基因敲除 (gene knockout): 将某个基因定向去除 基因敲入 (gene knockin): 定向将一段基因序列替 代另一段基因序列 通过DNA定点同源重组,改变基因组中的某 一特定基因,从而在生物体内研究此基因的功能
/DNA同源重组技术 (homologous recombination) 在细胞的减数分裂或有丝分裂过程中,相同 或相似DNA序列发生的重新组合。 利用细胞本身酶系统进行的重组
在细胞的减数分裂或有丝分裂过程中,相同 或相似DNA序列发生的重新组合。 利用细胞本身酶系统进行的重组 DNA同源重组技术 (homologous recombination)
基因打靶的基本程序 1.打靶载体的构建 2.打靶载体导入ES细胞 3.基因敲除ES细胞注射入胚泡 4.胚泡植入假孕小鼠的子宫中 5.嵌合体的杂交育种
基因打靶的基本程序 1. 打靶载体的构建 2. 打靶载体导入ES细胞 3. 基因敲除ES细胞注射入胚泡 4. 胚泡植入假孕小鼠的子宫中 5. 嵌合体的杂交育种