/3)反转录病毒感染法 外源基因反转录病毒载体 四/八细胞胚胎囊胚/原肠胚 反转录病毒感染 纯合转基因小鼠 嵌合小鼠
3) 反转录病毒感染法 外源基因 反转录病毒载体 四/八细胞胚胎/囊胚/原肠胚 反转录病毒感染 嵌合小鼠 纯合转基因小鼠
4)精子载体法 DNA 共育法 脂质体转染法 电穿孔法 精子—→卵细胞→受精卵转基因 动物
4) 精子载体法 DNA 精子 卵细胞 受精卵 共育法 脂质体转染法 电穿孔法 转基因 动物
5)体细胞核移植法 o卵母细胞 ↓去核 转基因体细胞 细胞核供者 转基因动物
5）体细胞核移植法 卵母细胞 去核 细胞核供者 转基因体细胞 转基因动物
DNA 磷酸钙-DNA共沉淀法 DNA 逆转录病毒感染法 电穿孔法 精子卵细胞胚胎干细胞 微注射 受精卵 四细胞囊胚一原肠胚一动物 转基因 胚胎 微注射 DNA 反转录病毒感染 DNA
DNA 精子 受精卵 DNA 卵细胞 微注射 DNA 胚胎干细胞 DNA 反转录病毒感染 磷酸钙-DNA共沉淀法 逆转录病毒感染法 电穿孔法 四细胞 胚胎 囊胚 原肠胚 转基因 动物 微注射
3.下游基因的整合、表达检测与细胞筛选 1)随机整合:线性化DNA分子, DNA的纯度、浓度和构型、缓冲液成分, 核内注射整合位点多变,影响表达水平和组 织特异性表达 2)共整合:将不同基因或不同构件同时注射 3)同源重组/定位整合:基因打靶
3. 下游—基因的整合、表达检测与细胞筛选 1) 随机整合：线性化DNA分子, DNA的纯度、浓度和构型、缓冲液成分， 核内注射整合位点多变，影响表达 水平和组 织特异性表达 2) 共整合：将不同基因或不同构件同时注射 3) 同源重组/定位整合: 基因打靶