二、酶活性单位 ■定义:指在一定条件下使酶促反应达到某一速度 时所需要的酶量。酶活性单位是一个人为规定的标 准。 >惯用单位:酶活性测定方法的建立者所规定的单位。 >国际单位:1U指在规定条件(最适pH,最适底物浓度)下, 每分钟转化1μmol底物的酶量。单位为U/L。 >Katal单位:1 Katal指在规定条件下,每秒钟转化1mol底物的 酶量,1Kata=60×106U。 淘
二、酶活性单位 ◼定义:指在一定条件下使酶促反应达到某一速度 时所需要的酶量。酶活性单位是一个人为规定的标 准。 ➢惯用单位:酶活性测定方法的建立者所规定的单位。 ➢国际单位 :1IU指在规定条件(最适pH,最适底物浓度)下, 每分钟转化1mol底物的酶量。单位为IU/L 。 ➢Katal单位:1Katal指在规定条件下,每秒钟转化1mol底物的 酶量,1Katal=60×106 IU
三、酶活性单位的计算 ■步骤: 明确测定方法的酶单位定义,按照酶单位 定义确定物质量、体积和时间的单位 忍 运用公式进行计算
三、酶活性单位的计算 ◼步骤: 运用公式进行计算。 明确测定方法的酶单位定义,按照酶单位 定义确定物质量、体积和时间的单位
■计算公式: 产物的增加量 每单位规定的保温时间 1000(ml) 酶单位/升 X X 每单位规定的产物增加量 实际保温时间 实际标本用量(ml) 分光光度法测定的公式: A测定一A对照)V总·106每单位规定的保温时间 酶单位/升 三 X- εLV标 实际保温时间
◼计算公式: 产物的增加量 每单位规定的保温时间 1000(ml) 酶单位/升 = —————————×——————————×———————— 每单位规定的产物增加量 实际保温时间 实际标本用量(ml) 分光光度法测定的公式: (A测定 – A对照)·V总·106 每单位规定的保温时间 酶单位/升 = —————————×———————— ·L·V标 实际保温时间
四、酶促反应进程 酶促反应进程曲线 产物|延滞期(A) C 浓度 线性期B 利 偏离线性期(C) B 龍魅 反应时间t 图7-1 酶促反应进程曲线 蘭
四、酶促反应进程 ◼ 酶促反应进程曲线
■酶量的测定: 通过酶活性测定间接测得酶的含量,因此,要准确 测定酶量,应使酶浓度(〔E))与酶促反应速度成 正比,即〔E)o∝-d〔S)/dt或〔E)∝d〔P〕/dt。 能够真正代表酶活性大小的是线性期的酶促反应速 度,即酶促反应初速度。 酶活性测定时首先要确定线性期,在此期测定反应 速度才能准确代表酶活性。 酶促反应初速度 酶活性 酶的含量
◼酶量的测定: 通过酶活性测定间接测得酶的含量,因此,要准确 测定酶量,应使酶浓度(〔E〕)与酶促反应速度成 正比,即〔E〕∝-d〔S〕/dt或〔E〕∝d〔P〕/dt。 能够真正代表酶活性大小的是线性期的酶促反应速 度,即酶促反应初速度。 酶活性测定时首先要确定线性期,在此期测定反应 速度才能准确代表酶活性。 酶促反应初速度 酶活性 酶的含量