课程名称 细胞生物学 授课专业及层次 2008临床医学本科1-2班 授课内容 基因组DNA的提取 学时数 3 教学目的 掌握基因组DNA提取的原理及方法 重点 DNA提取的方法 难点 自学内容 无 使用教具 离心机等实验器材 相关学科知识 细胞生物学 教学法 演示法、谈话法等 讲授内容纲要、要求及时间分配 一、人类外周血基因组DNA提取 (一)原理： 10分钟 1,对外周血淋巴细胞内DNA进行提取，首先要消化掉细胞膜和核膜，然 后将与DNA结合的蛋白质分离并沉淀。 2、传统的TLS法提取DNA是通过TLS(是一种强的表面活性剂)处理淋 巴细胞，迅速溶解细胞膜和核膜并使DNA和蛋白质分离，但此法操作 繁琐且费时，现一般用试剂盒进行DNA进行提取。 3.试剂盒的原理应与TLS法相似， (二)方法与步骤： 5分钟 1、离心管中加入溶液I500ul,新鲜血液100如l,立即振荡. 2、室温放置10分钟，12000r离心5分钟。吸去离心管中的液体（注意 不要将沉淀带出，) 3、离心管中加入溶液Ⅱ1ml,轻柔颤倒，室温12000r离心2分钟，去处 上清。 4、离心管中加入溶液皿500l,轻微振荡105，充分混合。 5、室温12000r离心5分钟，将上清移至新的离心管中， 6、在心离心管中加入等体积异丙醇500叫l,上下颜倒数次，直至出现白 色丝状DNA
16 课程名称 细胞生物学 授课专业及层次 2008 临床医学本科 1-2 班 授课内容 基因组 DNA 的提取 学时数 3 教学目的 掌握基因组 DNA 提取的原理及方法 重 点 DNA 提取的方法 难 点 自学内容 无 使用教具 离心机等实验器材 相关学科知识 细胞生物学 教 学 法 演示法、谈话法等 讲授内容纲要、要求及时间分配 一、人类外周血基因组 DNA 提取： （一） 原理： 1、对外周血淋巴细胞内 DNA 进行提取，首先要消化掉细胞膜和核膜，然 后将与 DNA 结合的蛋白质分离并沉淀。 2、传统的 TLS 法提取 DNA 是通过 TLS（是一种强的表面活性剂）处理淋 巴细胞，迅速溶解细胞膜和核膜并使 DNA 和蛋白质分离，但此法操作 繁琐且费时，现一般用试剂盒进行 DNA 进行提取。 3、试剂盒的原理应与 TLS 法相似， （二） 方法与步骤： 1、 离心管中加入溶液Ⅰ500μl，新鲜血液 100μl ，立即振荡。 2、 室温放置 10 分钟，12000r 离心 5 分钟。吸去离心管中的液体（注意 不要将沉淀带出，） 3、 离心管中加入溶液Ⅱ1ml，轻柔颠倒，室温 12000r 离心 2 分钟，去处 上清。 4、 离心管中加入溶液Ⅲ500μl，轻微振荡 10s，充分混合。 5、 室温 12000r 离心 5 分钟，将上清移至新的离心管中。 6、 在心离心管中加入等体积异丙醇 500μl，上下颠倒数次，直至出现白 色丝状 DNA。 7、 结果观察 10 分钟 5 分钟
讲授内容纲要、要求及时间分配（附页）】 (四)报告要求： 实验目的、原理、方法和步骤、实验结果、结果分析。 结果分析： 1、是否达到预期效果？为什么？ 2、每一步试剂的作用？ 二、学生实验 125分 钟
17 讲授内容纲要、要求及时间分配（附页） （四）报告要求： 实验目的、原理、方法和步骤、实验结果、结果分析。 结果分析： 1、 是否达到预期效果？为什么？ 2、 每一步试剂的作用？ 二、学生实验 125 分 钟
教案6 姓名齐冰2006~2007学年第二学期时间2007/4/12节次1-3节
18 教 案 6 姓名_齐冰_ 2006 ～2007 学年第 二 学期 时间 2007/4/12 节次 1-3 节
课程名称 细胞生物学 授课专业及层次 2008临床医学本科1-2班 授课内容 细胞核与遗传信息流向（二） 学时数 3 掌握原核细胞基因的结构特点及乳糖操纵子的调控，掌握真核细胞基因结构特 点，了解遗传的中心法则，了解基因转录的基本过程，掌握转录的概念，掌握 教学目的 hnRNA的加工的三个步骤，掌握密码子的特点及摆动假说，了解真核细胞基 因表达调控的途径 重点 乳糖操纵子的调控，真核细胞基因结构，HnRNA的加工步骤，摆动假说 难点 乳糖操纵子的调控，真核细胞基因结构，摆动假说 自学纳容 真核细胞tRNA及5sRNA的转录后加工 使用教具 多媒体课件 相关学科知识 生物化学 教学法 讲授内容纲要、要求及时间分配 复习引旧课，导入新课 5分钟 第五节基因与基因转录 遗传的中心法则： 5分钟 基因与基因转录： 基因的概念 5分钟 1.原核细胞的基因结构： 5分钟 特点：非翻译区少，串联排列，无内含子，单一拷贝，多顺反子 例：大肠杆菌乳糖操纵子：结构及调控 20分钟 2.真核细胞的基因结构： 重复顺序多，单顺贩子，断裂基因 ①重复序列：单一序列；中度重复序列：高度重复序列 15分钟 ②多基因家族 10分钟 ®结构基因特点：断裂基因概念9 20分钟 内含子，外显子，启动好，增强子，终止子
19 课程名称 细胞生物学 授课专业及层次 2008 临床医学本科 1-2 班 授课内容 细胞核与遗传信息流向（二） 学时数 3 教学目的 掌握原核细胞基因的结构特点及乳糖操纵子的调控，掌握真核细胞基因结构特 点，了解遗传的中心法则，了解基因转录的基本过程，掌握转录的概念，掌握 hnRNA 的加工的三个步骤，掌握密码子的特点及摆动假说，了解真核细胞基 因表达调控的途径 重 点 乳糖操纵子的调控，真核细胞基因结构，HnRNA 的加工步骤，摆动假说 难 点 乳糖操纵子的调控，真核细胞基因结构，摆动假说 自学内容 真核细胞 tRNA 及 5sRNA 的转录后加工 使用教具 多媒体课件 相关学科知识 生物化学 教 学 法 讲授内容纲要、要求及时间分配 复习旧课，导入新课。 第五节基因与基因转录 一、 遗传的中心法则： 二、 基因与基因转录： 基因的概念： 1．原核细胞的基因结构: 特点：非翻译区少，串联排列，无内含子，单一拷贝，多顺反子 例：大肠杆菌乳糖操纵子：结构及调控 2．真核细胞的基因结构： 重复顺序多，单顺反子，断裂基因 ① 重复序列：单一序列；中度重复序列；高度重复序列 ② 多基因家族 ③ 结构基因特点：断裂基因概念 内含子，外显子，启动子，增强子，终止子 5 分钟 5 分钟 5 分钟 5 分钟 20 分钟 15 分钟 10 分钟 20 分钟
讲授内容纲要、要求及时间分配（附页）】 第六节遗传信息的翻译 -、遗传密码与mRNA 10分钟 密码子，遗传密码 密码子的特点：通用性，简并性，阅读框架的无间隔性 二、反密码子与tRNA 10分钟 三、反密码子与密码子的相互作用 摆动假说 四、核糖体与遗传信息的翻译 第七节真核细胞基因表达的调控 10分钟 一、基因表达的调节途径 二 转录水平的调节机制 顺式作用元件 反式作用因子 第八节细胞核与疾病 小结 5分钟
20 讲授内容纲要、要求及时间分配（附页） 第六节 遗传信息的翻译 一、遗传密码与 mRNA 密码子，遗传密码 密码子的特点：通用性，简并性，阅读框架的无间隔性 二、反密码子与 tRNA 三、反密码子与密码子的相互作用 摆动假说 四、核糖体与遗传信息的翻译 第七节 真核细胞基因表达的调控 一、基因表达的调节途径 二、转录水平的调节机制： 顺式作用元件 反式作用因子 第八节细胞核与疾病 小结 10 分钟 10 分钟 10 分钟 5 分钟