二 植物转基因技术的基本路线 基因分离 农杆菌介导 体外重组 基因枪轰击 转化 载体的构建 ↓ 转化体 筛选 结合常规育种 遗传稳定性 评价 转基因品 种 安全性评 市场开发 16
16 二、植物转基因技术的基本路线 基因分离 体外重组 转化 转化体 安全性评 价 结合常规育种 转基因品 种 遗传稳定性 评价 市场开发 载体的构建 农杆菌介导 基因枪轰击 筛选
三、转基因的受体系统 1.植物组织受体系统： 受伤的细胞容易爱到病毒或质粒的感 这 些病毒域质粒上的某些 DNA通过 种不同的方式转移到受伤的植物细胞 形成®仿组织。愈伤组织豆以培养國 的转化植株。该受体系统转化率 可 得较多的转化樟株，亟材广、 转 化的外源基因稳定性差， 嵌 17
17 三、转基因的受体系统 1．植物组织受体系统： 受伤的细胞容易受到病毒或质粒的感 染。这些病毒或质粒上的某些DNA通过 各种不同的方式转移到受伤的植物细胞， 并形成愈伤组织。愈伤组织可以培养成 完整的转化植株。该受体系统转化率高， 可获得较多的转化植株，取材广泛、适 用性广。但再生植株无性系变异较大， 转化的外源基因稳定性差，嵌合体多
2.原生质体受体系统： 是植物细胞除去细胞壁后的部分，是一个质 膜包围的“裸露细胞”。原生质体在合适 的条件下具有分化、繁殖并再生成完整植 株的能力，具有全能性。原生质体在体外 比较容易完成一系列细胞操作或遗传操作 互相之间可以发生细胞融合，而且还可以 直接高效的捕获外源基因，嵌合体少。但 缺点是遗传稳定性差，培养周期长，难度 大，再生频率低。 18
18 2．原生质体受体系统： 是植物细胞除去细胞壁后的部分，是一个质 膜包围的“裸露细胞”。原生质体在合适 的条件下具有分化、繁殖并再生成完整植 株的能力，具有全能性。原生质体在体外 比较容易完成一系列细胞操作或遗传操作， 互相之间可以发生细胞融合，而且还可以 直接高效的捕获外源基因，嵌合体少。但 缺点是遗传稳定性差，培养周期长，难度 大，再生频率低
3,生殖细胞受体系统： 它是以植物生殖细胞如花粉细胞 卵细胞为 受体细 基因转化的系统。 前闺要以两条送 用 胞进行基因转 。 利用阻织养技进行花粉 店号道省·号队只更山☑的 腾 发育成单倍引 从而建立单倍体的基因转 统 二是直接利用花粉和加细胞受精挝程 因注 房微 如：具 许 全能性的生殖细胞百接为受体鼎 真有重强的接尔源DNA的清能，二旦将外源基因 入 这些细胞， 无延常的受精慰程会收到 ”一劳永逸 的效果； 利用逼鼠昌莉用该营体秦统进行 的受珠 摆 万 不店 到 季节的限制：贷能在短暂的弁花期进行，且羌 殖 的植物不能来用
19 3．生殖细胞受体系统： 它是以植物生殖细胞如花粉细胞、卵细胞为受体细胞进 行基因转化的系统。目前主要以两条途径利用生殖细 胞进行基因转化：一是利用组织培养技术进行花粉细 胞和卵细胞的单倍体培养，诱导愈伤组织细胞，进一 步分化发育成单倍体植株，从而建立单倍体的基因转 化系统；二是直接利用花粉和卵细胞受精过程进行基 因转化，如花粉管导入法、花粉粒浸泡法、子房微针 注射法等。由于该受体系统与其它受体系统相比有许 多优点，如：具有全能性的生殖细胞直接为受体细胞， 具有更强的接受外源DNA的潜能，一旦将外源基因导 入这些细胞，犹如正常的受精过程会收到“一劳永逸” 的效果；利用植物自身的受粉过程，具有操作方法方 便、简单。不足之处是利用该受体系统进行转化受到 季节的限制；只能在短暂的开花期进行，且无性繁殖 的植物不能采用
4.叶绿体转化系统 外源基因可以在叶绿体中得 到稳定表达，而且还具有许多 9 优点： (1)便于外源基因定位整合 (2)基因为多拷贝，表达量高 (3)导入的外源基因性状稳定 性高 (4)能直接表达原核基因 20
20 4.叶绿体转化系统 外源基因可以在叶绿体中得 到稳定表达，而且还具有许多 优点： （1）便于外源基因定位整合 （2）基因为多拷贝，表达量高 （3）导入的外源基因性状稳定 性高 （4）能直接表达原核基因