9.4IsolationandCharacterizationofCellOrganelles（细胞器）Centrifugationcanseparatemanytypesofoganellesfrom cellhomogenate,1st Step:Differential centrifugationFilterhomogenatetoremoveclumpsofunbrokencells,connectivetissue,etc.CentrifugeSupernatant(上清液)Pourout:rout:Poulout:300,000gx15000gx100.000gx10min60m2hPourout6tinPelletPlasmaLRibosomalLMitochondria,SolubleFilterNucleipartofmembrane,subunits,chloroplasts,homogenate(颗粒团)smallmicrosomalcytoplasmlysosomes,fractionpolyribo-and(cytosol)(fragmentsofsomesperoxisomesendoplasmicreticulum),and largepolyribosomes沉降顺序：细胞核一线粒体,溶酶体与过氧化物酶体一内质网与高尔基体一核糖体
9.4 Isolation and Characterization of Cell Organelles (细胞器) Centrifugation can separate many types of oganelles from cell homogenate, 1st Step: Differential centrifugation 沉降顺序：细胞核—线粒体,溶酶体与过氧化物酶体—内质网与高尔基体—核糖体。 Pellet (颗粒团) Supernatant (上清液)
差速离心法（Differentialcentrifugation优点：操作简单，离心后用倾倒法即可将上清液与沉淀分开，并可使用容量较大的角式转子。缺点：①分离效果差，不能一次得到纯颗粒；须经反复悬浮和离心加以纯化；②壁效应严重，特别是当颗粒很大或浓度很高时，在离心管一侧会出现沉淀③颗粒被挤压，离心力过大、离心时间过长会使颗粒变形、聚集而失活
优点：操作简单，离心后用倾倒法即可将上清液与沉淀 分开，并可使用容量较大的角式转子。 缺点：①分离效果差，不能一次得到纯颗粒；须经反复 悬浮和离心加以纯化； ②壁效应严重，特别是当颗粒很大或浓度很高时，在离 心管一侧会出现沉淀； ③颗粒被挤压，离心力过大、离心时间过长会使颗粒变 形、聚集而失活。 差速离心法 (Differential centrifugation)