实时荧光定量PcR Real-time Quantitative PCR, qRT-PCR 是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整 个PCR进程,从而对未知模板进行定量分析的方法。 实时荧光定量PcR过程中,荧光染料能特异性掺入DNA双链,发出 荧光信号,而不掺入双链中的染料分子不发出荧光信号,从而保证荧 光信号的增加与PCR产物增加完全同步 实时荧光定量PCR技术是一次DNA定量技术的飞跃,运用该项技术, 可以对DNA、RNA样品进行定量和定性分析
实时荧光定量PCR (Real-time Quantitative PCR,qRT-PCR) • 是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整 个PCR进程,从而对未知模板进行定量分析的方法。 • 实时荧光定量PCR过程中,荧光染料能特异性掺入DNA双链,发出 荧光信号,而不掺入双链中的染料分子不发出荧光信号,从而保证荧 光信号的增加与PCR产物增加完全同步。 • 实时荧光定量PCR技术是一次DNA定量技术的飞跃,运用该项技术, 可以对DNA 、RNA样品进行定量和定性分析
SYBR Green与DNA双螺旋小沟区域结合 荧光染料 sYBR Green能特异性掺入DNA双链,发出荧 光信号,而不掺入双链中的染料分子不发出荧光信号 从而保证荧光信号的增加与PcR产物增加完全同步
SYBR Green 与DNA双螺旋小沟区域结合 荧光染料SYBR Green能特异性掺入DNA双链,发出荧 光信号,而不掺入双链中的染料分子不发出荧光信号, 从而保证荧光信号的增加与PCR产物增加完全同步
SYBR Green作用原理示意图 热变性 引物 荧光物质 EFE 引物退火 DNA聚合酶FF ;i 延伸反应 ;,F;-F-F LL|LlLll
SYBR Green作用原理示意图