碱性氨基酸等电点的计算碱性氨基酸(Lys、Arg 和 His):两个大的pKa加起来/2=PI(通常大于 7)Lys 的 pK1 (COOH)为 2.1、pK2 (-NH3+)为 9.0, pK3为 10.5小试牛刀COOHH2NNH2L-Lysine
碱性氨基酸(Lys、Arg 和 His): 两个大的 pKa 加起来/2=PI (通 常大于 7) Lys 的 pK1 (COOH)为 2.1、pK2 (-NH3+)为 9.0,pK3为 10.5 碱性氨基酸等电点的计算 小试牛刀
(二)氨基酸的理化性质色氨酸2.芳香族氨基酸紫外吸收光密度280 nm:色氨酸、酪氨酸酪氨酸多数蛋白含这两种氨基酸残基,测定蛋白溶液苯丙氨酸280nm光吸收值可快速0240250260270280290300310简便分析蛋白含量。波长(nm)芳香族氨基酸的吸收光谱
2.芳香族氨基酸紫外吸收 色氨酸、酪氨酸 芳香族氨基酸的吸收光谱 280 nm: 多数蛋白含这两种氨基酸 残 基 , 测 定 蛋 白 溶 液 280nm光吸收值可快速 简便分析蛋白含量。 0 240 250 260 270 280 290 300 310 波 长 (nm) 光 密 度 色氨酸 酪氨酸 苯丙氨酸 (二)氨基酸的理化性质
(二)氨基酸的理化性质3.α-氨基参加的反应(1)与亚硝酸反应α一氨基与亚硝酸反应,生成羟酸,并放出N2NH2OH→ R-CH-COOH + H2O +IN2'R-CH-COOH + HNO2 -一分子游离氨基形成一分子氮气,因此可以用来定氮,这是Vans1yke(文司菜克)定氮法的原理,利用这种定氮法,可以对氨基酸定量和检测蛋白质的水解程度
(1)与亚硝酸反应 α-氨基与亚硝酸反应,生成羟酸,并放出N2 3.α-氨基参加的反应 一分子游离氨基形成一分子氮气,因此可以用来定氮,这是Van slyke (文司莱克)定氮法的原理,利用这种定氮法,可以对氨基酸定 量和检测蛋白质的水解程度。 R CH COOH NH2 + HNO2 R CH COOH OH + H2 O + N2 ↑ (二)氨基酸的理化性质
(二)氨基酸的理化性质3.α-氨基参加的反应(1)与亚硝酸反应α-氨基酸与亚硝酸反应&-氨基(如赖氨酸)亚氨基一脯氨酸、羟脯氨酸结合N---精氨酸、组氨酸和色氨酸环中的N
(1)与亚硝酸反应 α-氨基酸与亚硝酸反应 3.α-氨基参加的反应 (二)氨基酸的理化性质 ε-氨基(如赖氨酸) 亚氨基—脯氨酸、羟脯氨酸 结合N-精氨酸、组氨酸和色氨酸环中的N
(二)氨基酸的理化性质3.α-基参加的反应(2)与甲醛的反应:用过量的中性甲醛与氨基酸反应,可游离出氢离子,然后用NaOH滴定,从消耗的碱量可以计算出氨基酸的含量,称为间接滴定法。COOHR-C-COOR-HO-+ H+中和NH2NH2HCHOR-C-COO-羟甲基氨基酸NHCH2OHHCHOC-COO-R-C二羟甲基氨基酸N(CHOH)2用途:可以用来直接测定氨基酸的浓度
(2) 与甲醛的反应:用过量的中性甲醛与氨基酸反应,可游离出氢离子,然 后用NaOH滴定,从消耗的碱量可以计算出氨基酸的含量,称为间接滴定法。 (二)氨基酸的理化性质 3.α-氨基参加的反应 用途:可以用来直接测定氨基酸的浓度