免疫学及免疫学检验 ()透射比浊法 1.原理抗原抗体在一定缓冲液中形成免疫复合 物(C),当光线透过反应溶液时,由于溶液内 复合物粒子对光线的反射和吸收,引起透射 光减少,免疫复合物量越多,透射光越少 即光线吸收越多,可用吸光度表示。吸光度 和复合物的量成正比,当抗体量固定时,与 待检抗原量成正比。用抗原标准品建立标准 曲线,可测出待检抗原含量
免疫学及免疫学检验 (一) 透射比浊法 1. 原理 抗原抗体在一定缓冲液中形成免疫复合 物(IC),当光线透过反应溶液时,由于溶液内 复合物粒子对光线的反射和吸收,引起透射 光减少,免疫复合物量越多,透射光越少, 即光线吸收越多,可用吸光度表示。吸光度 和复合物的量成正比,当抗体量固定时,与 待检抗原量成正比。用抗原标准品建立标准 曲线,可测出待检抗原含量
免疫学及免疫学检验 2.操作步骤 (1)用稀释缓冲液将待检样品和标准品按规定稀 释,取一定量加至测定管中。 (2)加最适工作浓度(用方阵法预先滴定)的抗体, 孵育一定时间,测定吸光度(A)值。 (3)以不同浓度抗原含量为横轴,吸光度为纵轴 绘标准曲线。从标准曲线可得待检抗原量
免疫学及免疫学检验 2. 操作步骤 (1) 用稀释缓冲液将待检样品和标准品按规定稀 释,取一定量加至测定管中。 (2) 加最适工作浓度(用方阵法预先滴定)的抗体, 孵育一定时间,测定吸光度(A)值。 (3) 以不同浓度抗原含量为横轴,吸光度为纵轴, 绘标准曲线。从标准曲线可得待检抗原量