。 真核生物中的RNA聚合酶可按其对α鹅 膏蕈碱敏感性而分为三种,它们均由 10~12个大小不同的亚基所组成,结构 非常复杂,其功能也不同。 种类 亚细胞定位 对α鹅膏草碱敏感性 功能 RNA pol I 核仁 不敏感 合成rRNA前体 RNA polII 核基质 极敏感 合成HnRNA RNA pollΠ 核基质 敏感 合成tRNA前体 snRNA及5 S rRNA
• 真核生物中的RNA聚合酶可按其对α-鹅 膏蕈碱敏感性而分为三种,它们均由 10~12个大小不同的亚基所组成,结构 非常复杂,其功能也不同。 种类 亚细胞定位 对α-鹅膏蕈碱敏感性 功能 RNA polⅠ 核仁 不敏感 合成 rRNA 前体 RNA polⅡ 核基质 极敏感 合成 HnRNA RNA polⅢ 核基质 敏感 合成 tRNA 前体 snRNA 及 5S rRNA
酵母RNA聚合酶I和I (a】 6】 酵母RNA聚合酶I(a),Ⅱ(b)的电子品体摄像图
酵母RNA聚合酶Ⅰ和Ⅱ
启动子和转录因子 启动子(promoter)是指RNA聚合酶识别、结 合和开始转录的一段DNA序列。RNA聚合酶起 始转录需要的辅助因子(蛋白质)称为转录因 (transcriptional factor) 利用足迹法(footprint)和DNA测序法可以确定 启动子的序列结构。 例:大肠杆菌启动子共有序列的功能
启动子和转录因子 启动子( promoter)是指RNA聚合酶识别、结 合和开始转录的一段DNA序列。 RNA聚合酶起 始转录需要的辅助因子(蛋白质)称为转录因 子(transcriptional factor)。 利用足迹法(footprint)和DNA测序法可以确定 启动子的序列结构。 例:大肠杆菌启动子共有序列的功能
足迹法确定 32P end-labeled DNA 启动子序列 Specific binding protein DNase nicks DNase nicks VV↓V↓V↓ 三 二 32p-labeled fragments Gel electrophoresis 32p-labeled pattern fragments
足迹法确定 启动子序列
大肠杆菌启动子共有序列的功能 起点 Pribnow 16-19bp 框 识别区 5-9bp, A AAT×XXXXX XX G XXXX TTGACAXXXXXXXXXXXXXXAAT XXXX XXXX AACTGTXXXXXXXXXXXXXXTTA T XXXX AATXXXXXX X× -35 -10 色
大肠杆菌启动子共有序列的功能 ×× A G T C ××××TTGACA××××××××××××××AAT ××××××××××××××TTA AAT×××××× ××××AACTGT AAT×××××× ×× ××× ×××× × Pribnow 框 -35 -10 识别区 16-19bp 5-9bp 起点