细胞工程 嫩茎节河里。在伸长期,籽菡的所有器官、茎节 植物细胞、组织及原生 间及花里均出现核DNA含量(内倍性)和C-值数 质体培养 目的快遠增加。在籽苗里,这些增加源于下胚轴与 胚惧间的过渡组织。与其它器官相比,叶显示高频 941408 率的具2CDNA含量的细胞(60%)。(李思经) 植物有性繁殖的生物学训控及其在植物育种中的应941411 用[会,英]/ Adachi,T, Biotechnol,A 改良芸苔属作物的体细胞杂交作用[会,英] ic,-1993,-265~268译自DBA,1993,12(25),pa,v.L.…/ Biotechnol. Agric,-1993. 93-14547 18~26[译自DBA,1993,12(25),93-14603] 就以下方面讨论了借助植物生物技术克服育种 将带有所需基因的6种植物( Brassica 8pi- 碍的新方法:i,禾本科大黍和双穗雀稗原生质体 scen8、 Moricandia arvensis、 Trachysto 培养及无融合生殖种的融合;i,通过番茄有性和 ma ballia, Diplotaris catholica、 Erucastr 无性繁殖克服杂交不亲和性;及i,荞麦胚囊超微 m laevigatum、 Camellin sative)叶肉原生 结构的退化研究。(李思经) 质体与芥菜和B, carinate胚轴原生质体用PEG 941409 3500进行融合(等量原生质体溶液和PEG混合15 有性不亲和亲本的属间体细胞杂交:甜橙和酒饼觞~20分钟)。裉据融合亲本的不同形态特征鉴定融 「英]/ Louzada,E.S.…! Plant Cell Rep,合产物。叶肉原生质体在开始培养24小时后瓦解 3,12(12).-687~690译自DBA,1993,存活原生质体的异核融合率为5~20%。所有体细 12(25),93-14568] 胞杂种的形态学特征均介于双亲之间。培养的芸苔 利用聚乙二醇将从核衍生的胚性愈伤分离出的属植物富集了来自野生种的生物和非生物胁迫耐性 甜橙品种 Hamlin原生质体与酒饼籍( Atalantia基因,并增加了产量有关性状的变化范围。还得到 ceylanica)叶片原生质体融合。从融合培养物中了质体和线粒体有关性状的变异体。(孙雷心) 再生5株植株,经同功酶分析和根尖细胞染色体数941412 目测定证实,这5株再生株为甜橙 Hamlin与酒饼植物细胞培养物体细胞胚发生作用的机 筋属间异源四倍体体细胞杂种。杂种之间出现两种/ Komamine,A.…/ Biotechnol. Agric 不同叶片形态,即正常型与窄叶型。但染色体数及1993-37~44译自DBA,1993,12(25),93 同功酶谱带均无差异。这是有性不亲和属间杂种植14604 株生产的首次报道。(李思经) 以胡萝卜悬浮细胞培养物为模型系统详述了体 1410 细胞胚发生作用的各个方面。从胚性细胞团建立了 黄瓜籽苗和植株中的体细胞多倍性发育[英/Gil-高效、不同步的胚发生系统,在悬浮细胞培养物中 ise,L,J.W.…/ Plant sci.-1993,91建立活性单细胞。利用这些系统研究了形态、生 (2)·-171~179译自DBA,1993,12(25),理、生化和分子生物学机理。体细胞胚发生作用可 93-14569] 分为4个阶段。在有生长素存在时,活性细胞不均 用流式细胞光度术测定了黄瓜植株发育中籽苗等分裂产生胚性细胞团(0期)、然后发育成球形 和植株的个体器官里细胞的核DNA含量。结果表前胚(1期)、球形胚(2期)和心形及鱼雷形胚 明,DNA含量(2C~64)不同的细胞以不同(3期)。在1期阶段末期出现的内源生长素 比例存在。这一体细胞多倍性是植株发育阶段和个mRNA、Ca2·和DNA合成作用的极性分布可能在 体器官所特有的。它存在于种子胚的下胚轴和胚根胚发生作用中起重要作用。2期内发生活跃的极性 里,也存在于幼嫩次生根、未成熟叶、花芽和极幼细胞分裂。检测到作为胚发生作用全能性表达分子
标记的4种蛋(a、h、「?17原,2种mg/2,4-110.0mg/ Dicamba的培养基 Orna.(孙心 吓始持续细胞分裂~5天的离体生长植株上分离 941413 原生质体(用1% Cellulose-R10和0,25%Mace- 水稻愈伤组织再生植株的体细胞克隆变异体[会, rozy me),几天后0~22%的原生质体至少分裂 3EJ/Adkins, S. W., Biotechnol. Agric 一次。2~16%的原生质逕续分裂,培养8周 1993,269~272译自DBA,1993,12(25),93后形成可见集,其中:0~80%为常规的胚状结 -14606 构。4周后将其从藻煦盐培养物上取下并移入固休 研究了从水稻愈伤再生的R1植株生的R2料培养基在光下68~88%的胚状物产生发育良好的 省耐完全浸没的能力。倥温温约水族系统苗。再生植株可育。(孙雷心) 中进行测定,与享本对和比,%的体细胞克隆941416 明显增加了抗淹能力。仼泰国田间条件下进行测试脱水、培养基渗透性和脱落酸对胶树体细胞胚成 时,除几个例外外,这种改进可传给R3代。在调熟的影响英]/ Etienne,H.…/J.Exp. 控条件下生长的R2代植株的其它农艺重要特性也Bot-193,44(267),-1613~1619译自DBA, 变化。对大多数所测特性来讲,R2群体的频数1993,12(2 分布明显不同于亲本,这表明通过组培传代已使 将橡胶树未成熟种子内珠被片置于含234mol/ R2获得了一些特性的退化和改良。鉴定出了…小 蔗糖和4,4mmol/m8,4-D和激动素的 部分改良了籽粒生产、粒重和苗重的体细胞克隆。 Carron愈伤DOD25培养基上。将愈伤组织转到含 这些改良性状若能稳定遗传将具有极大价值。(孙50mmol/ma亚精胺、1,35mmol/m33,4-D和 雷心 BA及5umol/m3ABA的胚发生作用表达培养基 卜:。在含18mmol/ 4-D和0,91 不同浓度蔗糖对油椰多胚培养物生长和脯氨酸累积A的培养基上形成体细胞胚,体细胞胚在含234 的影响会,英 Tarmizi,A,H,… Biote-mol/m蔗糖和500mg/1活性炭的改良MS培养基上 hnol, Agric,-193,-365~368[译自DBA,193,成熟,并在含146mol/m3蔗糖和87mmol/m3赤霉 秦的培养基上萌发。繁殖时,将胚培养于含 在补加不同浓度蔗糖的MS培养基上培养油椰mol/m蔗糖和289mol/m赤霉素的培养基上 多胚性(PE)培养物。每间隔一定时间分析培养慢脱水或在含351mo1/m蔗糖和1mmol/msAB 物的鲜重增加、含水量和晡氨酸含量。0,3~0,7MA的培养基上成熟可大幅度提高胚的萌发力和植株 蔗糖阻過培养物生长和增殖。与其它处理相比,用再生率。各处理均增强了胚活力,有助于根和苗分 0,5M蔗糖处理培养物鲜重降低显著且褐变程度最组织形成分生组织及淀粉和蛋白质生物合成,并 轻。0,3~0,7M蔗糖还诱导氨酸累积,紧积量与使体细胞胚的水分状态接近于成熟胚。(孙雷心 所测蔗糖浓度线性相关。各处理均降低了培养物含941417 水量,表明培养物处于水份胁迫状态。含水量从约麻黄的离体繁殖英]/ O/ Dowd,N,A,…/J 90%降至80~60%脯氨酸含量增加3~18倍。这 rtic,Sci,-1993,68(6),-1013~1020译 种蔗糖与脯氨酸累积间的关系可用于基本生长贮存自DBA,1993,12(26),93-15231 和冷藏油榔PE培养物的研究中。(孙雷心) 在含8%蔗糖、0,05MIBA和0~0,5M激 941415 动素、玉米素或BA的MS培养基上培养脆麻黄苗节 通过直接胚发生作用从拟南芥cv. Columbia原生外植体。随细胞分裂素浓度的增加每外植体的平均 质体再生植株英]0′ Neill,C.M.…J,苗数增加,平均苗长降低。用2,4-D替换IBA Exp.Bot.-1993,44(267),-1579~1585译自导致形成愈伤和苗生长性畸变。在含0,05 mILA DBA,1993,12(26),93-15228 和0.05HM激动素的培养基上培养麻黄属的10个其 建立了从拟南芥ev. Columbia(C24)叶肉它品种苗培养物。IAA可使之健康生根。用一步 原生质体再生能育植株的方法。用此法再生快速且法,即使苗在含1%蔗糖和5,0MIAA的半量MS 重复性。此法的新特性是通过直接体细胞胚发生培养基的 Sorbarodst中生长并发根,繁殖了木贼麻 作用大量再生。从在含8,0mg/ I Dicamba加0,1黄、山岭麻黄、矮麻黄和崴麻黄。形成了健康的小 201994-2008ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreservedhttp:/ww
植株。(孙出心 。不同植物器官的再生能力不同。例如:半夏珠 941418 宇的再生能力最高、其次是叶片和叶柄。鱔藤属 垂枝桦胚发生作用基因BP8的鉴定[英J/ Puuppo- anoectochilus∫om08ns、地黄和桔梗在分 nen- Limia,R,…/ Plant mol,Biol.-1993,化不定方面以苗尖和侧芽为最好的组织源。通过 3(2)423~428[译自DBA,1993,12(26),更换液体和固态培养基可保持不定营养增殖的能 93-15233 力。在加3%蔗糖和g/NAA(对半夏和桔 利用 Southern杂交在垂枝桦基因组中定位了梗)或不加植惚生长因子(对藤和地黄)的半量 与胡萝卜胚发生作用基因DC8同源的序列。通过将MS诸莽上不定芽易于生根。组织培养是大量繁 消化的垂枝桦基因组DNA与胡萝下cDNA(相应殖这些药用植物的非常有用的方法。(孙雷心) 于DC8)杂交,确定了漫住杂交原件。用产生最491421 佳信号/本底比的条体进行垂枝桦基因组文库的噬禾本科和豆科品种体细胞杂种的分子状态[会,英] 斑杂交,提纯了信号最强的克隆。定位了与胡萝卜/ Niizeki,M.…/ Biotechnol.. Agric.-1993 探针杂交的区域并测定了名为BP8的序列。BP8332~335译自DBA,1993,12(26),93- DNA序列由3160bp组成,编码53kD的推断蛋白,15244 在氨基酸水平上该序列有52%的区域与DC8基因 用限制性片段分析和 Southern点印分析法研 相同。该BP8蛋白含20个11氨基酸的重复,因而属究科间和属间体细胞杂种或杂种愈伤的细胞器DN LEA蛋白组。从垂枝桦不同体细胞胚发生阶段细A。通过原生质体融合得到一种禾本科品种水稻及 胞和非胚性材料提取的mRNA与BP8探针 North-3个豆科品种(大豆、首蓿和百脉根)间杂种愈 ern杂交没有信号,表明BP8基因表达程度低。建伤。科间杂种发生了水稻染色体的同步消除,但在 议不能用此基因作垂枝桦细胞培养物胚发生作用的线粒体DNA( mt dnA)中则含有两亲本的种特 遗传指示剂。(孙雷心) 异性DNA片段和双亲中均未发现的新型DNA片 941419 段。这表明这些杂种含有两种品种的血tDNA或重 通过烟草和黄花烟草体细胞杂交选出新的烟草繁殖组 mtdna。但在多数情况下只保留豆科品种的叶 系会,英]/ Guozhang,B.…/ Biotechnol.绿体DNA。属间杂交的体细胞杂种为对称或非对 Agric.-1993-273~278译自DBA,193,12称性的。后者为x射线辐射所致。其 mtDNA的特 (26),93-15234 性与科间杂种 mtDNA的复杂性基本相同,而叶绿 通过融合烟草(var. Gexin1)和黄花烟草体DNA的分子状态则比校简单。(孙雷心) (var, Heilaohu)原生质体产生了种间体细胞941422 杂种植株。不能利用原始体细胞杂种的原因如下:体细胞胚胎发生:高等植物早期发育的模式[英]/ 1极不稳定;2,体细胞杂种的育性很差;3,体细胞 Zimmerman,J,L./ Plant cell-193,5 杂种表现了一些不需要的黄花烟草特性。将杂种植(10),-1411~1423[译自DBA,1994,13(1) 株与烤烟回交后克服了上述缺陷,进行筛选后,繁94-00308] 育成新的繁殖系。弯叶( curved leaf)产量、叶 体细胞胚胎发生是细胞培养物再生植株的重要 片质量和抗病性的三年测定结果表明,此新繁育系途径,亦是研究植物体细胞胚胎发生中早期调节和 具有很好的遗传稳定性和对烟草疾病的多重抗性。形态发生的潜在模式。本文着重综述了利用体细胞 它对花椰菜花叶病毒具有一定耐性并对叶斑病有显胚胎发生作为模式系统了解高等植物生活史中最早 著抗性。此新系在烟草生产中具有极高的商业价期发育所需的基因表达调控一一受精的合子发育为 值。(孙雷心) 成熟胚。讨论了下列内容:体细胞胚诱导与发育;体 941420 细胞与合子的胚胎发生;胚发育与激素;体细胞胚 利用组培法快速无性繁殖药用植物[会,英]/Gau,胎发生期间的基因表达一一从体细胞胚分离基因 T.G,…/ Biotechnol. Agric,-199-300~晚期体细胞胚胎发生丰富(LEA)基因在体细胞 304[译自DBA,1993,12(26),93-152391 胚中的表达,体细胞胚产生的分泌蛋白,体细胞胚 从不同草药组织来源〔如顶芽和侧芽、珠芽 分离的共它基因及体细胞胚胎发生中非胚性基因的 未成熟叶片、叶柄、茎段和根尖等)再生出不定表达;胚胎发生中细胞分化的分子标记;体细胞胚
作为一遗传系统;体细胞胚胎发生的显微外科分DBA,1994,13(1),94-00313」 析;及体细胞胚发育的未来研究前景。(李思经) 从花生未成熟胚轴和未成熟子叶诱导体细胞胚 941423 胎发生(SE)和植株繁殖。SE所用培养基含有L一 甘蓝及其它品种的原生质体培养与再生[英/Kik,6盐、泛酸、200mg/酪蛋白水解物,1%山梨醇 C.… Plant Cell Tissue Organ Culture和6%蔗糖(0,6%琼脂固化):为了研究各种植 1993,35(2)-107~114译自DBA,1994 物生长素对SE的影晌,向培养基里加入2,4-D 13(1),94-00309 2,4,5T、2,A,5·TH、二氯甲氧苯酸 从甘蓝叶肉原生质体成功地繁殖成植株。一种 Picloram,NA在(22,6,45,2,90,2和135,6M) 改良的 Pelletier方法非常有勛于原生质体培养和”寮乙酸、3-吲哚丙酸、IBA、对-氮苯氧乙酸 植株繁殖。方沾是原生质伓以50G个原生质体/或IAA。2,4-D使培养物响应率最高,每个响 ml(2m等分试拌)度培养于培养基B上,于25℃、应培养物产生的平均体细胞胚数亦最多。仅玉米素 黑暗下培养一周。然后将此培养物转移到光照下,稍促进SE产率。6%蔗糖使培养物响应率及每个 “大多数细胞分裂2或3次时,加入2ml培养基外植体产生的体细胞平均数均最高。从胚轴诱导 C。8周后,加入8m1培养基D,随后把培养皿内SE时,2,4-D比 Picloram更有效。对于子叶 含物分成4等分,置于4个培养皿里。2~3周外植体,用二氯甲氧苯酸或NAA从体细胞胚获得 后,把愈伤转移到含有MS盐、1%蔗糖、1mg/植株再生率最高。(李思经) A和0,1mg/NAA的固体MSⅡ培养基 3941426 周后,又把愈伤转入增殖培养基K3中(补加0.03凝胶剂对梨再生苗增殖率和生长的影响[葡]/Lop M蔗糖、2mg/1玉米素和013mg/LIAA.用0,8% Daichin琼脂固化)。采用最佳组合的分离方法、1993,5(1),47~49[译自DBA,1994,13 培养技术及培养基时,植板效率为4.1~4,9%植(1),94-00320 株再生率为15%。(李思经 将带有2~3个腋芽的梨茎外植体培养在补加 941424 554,9/M肌醇、87,6mM蔗糖、6,661MBA,0,53 钥对小麦、小黑麦、油菜及烟草组培物再生苗和根MNAA和144M赤霉素的MS培养基上。测试 的影啊芙J/ Purna 了 Gelritc(1.5,2.0和3,0g/1)和 Cialgas或Di- Organ Culture-1993,35(2).-131fco琼脂(6,0、8.0、10,0和12,0g/l)的效果。所 139[译自DBA,194,13(1),94-00312]有培养物均在26~28℃光照/21~26℃黑暗、16小 研究了CuSO4对小麦、小黑麦、汕菜及烟草时光周期下温育35天。然后继代培养在相同培养基 组培物的体细胞或产雄性征的愈伤或叶圆片培养物上。含 Cialgas琼∥(所有测试浓度)及含低浓度 繁殖的影响。培养物(除烟草24℃外)温育在 Difco的培养基对再生苗的增殖率和生长最佳。含 估测小麦和小黑麦 Gelrite的培养基诱导玻璃化。(李思纟 的苗再生,7周后估测汕菜的苗再生。组培物对铜931427 处理的形态发生反应显示基因型差异,如用铜处理洋葱花序的体外鳞茎形成和植株再生[荚J/Mola 小麦体细胞培养物时强烈促进增殖,而01~100 A Hortscience,-1993, M Cuso4对油菜却无效或起抑制作用;CuSO428(10),-1052译自DBA,1994,13(2),94 处理亦促进小黑麦培养物生根。不同培养基应用等00914 量浓度CuSO4时,基础培养基组分仅起修饰效应。 摘带5mm长花葶组织的洋葱‘ Sweet Sp 繁殖小麦株直接转入盆栽土壤时CuSO4预处理促nish’未成熟花序,将每个伞形花序纵向分成四 进植株存活。AgNO亦促进苗再生,显著地增加份培养于含4,4MBA、30g/蔗糖和8g/1琼脂的 形态发生,而CuSO4却无此显著效应。(李思经)MS培养基(pH5,7)上,条件为2℃、18小时光 941425 周期。研究了加入0,0、0,005、0,01、0,05或01 花生体细胞胚胎发生:生长调节剂和蔗糖的影响 m thidiazuron对苗形成的影响。将在含BA培 apen,S,… Plant cell Tissue Or-养基上培养的外植体的再生苗转至鳞茎诱导培养基 gan Culture.-1993,35(2).-151~156译自(MS加120g/l蔗糖和5g/活性炭)上。培养4~
6周后或不在苗诱导培养基上预培养只在鳞茎诱导94143 培养基上培养10或12周后,将鳞茎转入土壤。在含直接从山黧豆属种子培养物高频诱异器官发生[英J 低浓度 thidi a时形成的苗数增加,但在高浓 Malik,K.A.…/ Ann bot( London) 度下减少。每外植体间接和直接形成鳞茎的数分别1993,72(6),-629~637译自DBA,1994, 为9,7和6,5,每外植体再生苗数分别为8和3,9。13(3),94-01521 (孙诣心) 研究了山豆属(Lall;以)…些种的完整 941428 籽苗培养物形态发的接高频诱导和整 藩花生体细胞胚形态学和转化之间的关系[英]/湃主的培养条仟。苔再生包活在含细胞分裂素或 Wetzstein, H. Y.., Plant S TZ的MS上培养成熟的种子。从在含有Kn、BA 92(1),-81~89译自历A,194,132),或TDz的培养基上萌发的种子发育的完整籽苗的 94-00915] 子叶节和周围组织(不经过中间的愈伤阶段)发生 从落花生cv,AT1a7未成熟子叶外植体分化苗的分化。TDZ浓度为10M时可促进苗的形成, 而来的体细胞胚(SE)形态非常复杂。以轴和子扁荚山黧豆(L, cicera)和丹吉尔山黧豆( 计发育为依据将SE分为6种类型,单个或聚集的 Bngtanus)平均为331~33.7个苗/籽苗,浓度为 SE均为如此;是在组织学水平上的分类。SE的形50M时,香草豌豆达到54,7个苗/籽苗。在含有 态与转化百分数和植株习性有关但与转化率无关。2,5 uM NAA的改良MS培养基上再生苗生根,将 诱导培养基中的2,4-D含量不影响SE生根或转存活小植株转至土壤中。(田桂英) 化,而对SE形态略有影响。不加预选的SE总转化941431 率为27%。两极、较典型的正常SE有规则的苗尖植物生长调节剂对无芒雀麦愈伤细胞生长,植株再 并发育成单轴植株,转化率为40~47%。宽扇形生及体克隆变异的影响[芙/ Wattanasiri,C SE约有38%转化,产生并合茎和多枝的植株,这…/ Euphytica,-1993,69(1~2)(无页码) 些SE具有多分生组织区。角状SE绿色但一般不能译自DBA,1994,13(3),94-01 长成苗,仅7%转化。一些种类的低转化率是由于 在补加不同组合2,4-D和kn的MS培养基 苗分生组织的发育不良。再生株开花结籽,其子代上培养无芒雀麦( Bromus inerm3s)未成熟花 生长正常。(孙雷心) 序。在试验的毎一种培养基上从幼嫩花序外植体诱 941429 导出愈伤。全部愈伤每月继代5~6次,并转移至 由细胞悬浮培养、愈伤组织培养和再生诱发的甜菜无植物生长剂的MS上再生植株。Kn诱导愈伤形 线粒体DNA重排[英]/ Dikalova,A.E.…成芽,在所有培养基上生根。只在含2或6mg/l Theor. Appl. Genet. -1993, 86(6).-699 2,4-D、02mg/lkn的培养基上从愈伤再生 704译自DBA,1994,13(2),94-0917 植株。未形成白化苗。全部体细胞无性系高度和 研究了甜菜不育系(22003二倍体雄性不育)叶宽低于亲本(SBG7),但无性系F9A、F10A 植株、愈伤培养物(来自腋芽培养物)、悬浮细胞和F10B的分葉数和叶茎比(干重)大于亲本。大 培养物和再生植株的线粒体DNA( mt DNA)的多数体细胞无性系的叶长、总干重和比叶重与亲本 结构变化。BamH限制性分析证明发生了不同于相同。体克隆变异将有助于作物改良。(田桂英 对照株的 mtDNA的结构改变。悬浮细胞培养物的941432 mtDnA发生了多发性重排,其中一些与愈伤培养培养基组分及脯氨酸对水稻愈伤生长、体细胞胚胎 物中的相同,其它则为从头产生。 Bam hi消化的发生和再生的作用[英/ Raval,M,… Indian 悬浮细胞培养物 mtdnA可与编码细胞色素氧化酶.Exp,Biol-1993,31(7),-600~603译自 Ⅱ亚基(COXⅡ)和NADH脱氢酶I亚基(NdI)DBA,194,13(8),94-01525] 基因点杂交。愈伤组织和再生株的线粒体基因组没 优化了从4种本地粳稻栽培苗GR-3、GR- 有变化。F1-ATP-ase双亚基和脱辅基细胞色素102、Jaya和Te-Tep种子有效地诱导愈伤的条件。 b基因在 mtDNA中的位置保持不变。1个线粒体向MS培养基加入2,5mg/12,4-D可100%诱导 基因组变化了的不育株含有1,6kb小环。这种变化愈伤。N6培养基对愈伤生长、胚性愈伤形成及植 是由体克变引起。(孙雷心) 株繁殖效果优于MS。Te-Tep愈伤生长最好,GR 201994-2008ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreservedhttp:/www.cnki.net