目的和要求 1、熟悉石蜡包埋技术基本过程
1、熟悉石蜡包埋技术基本过程 目的和要求
原理 在显微镜下要观察人体组织,必须将组 织切成以微米为单位的薄片,使其透光并易 于观察,但直接切取柔软组织是难以办到的
在显微镜下要观察人体组织,必须将组 织切成以微米为单位的薄片,使其透光并易 于观察,但直接切取柔软组织是难以办到的。 原 理
石蜡包埋法是将“支持物质”一一一石蜡渗 入组织内部,为此,必须先将组织中水分除净, 用酒精进行脱水(70%→80%→90%→95%→100 %)。再用二甲苯置换出组织中的酒精,使其透 明,然后放入融化的石蜡中。将浸蜡的组织块 置于包埋框中,冷却后组织块便具有石蜡的硬 度,切片机便能将组织切成薄片
石蜡包埋法是将“支持物质”----石蜡渗 入组织内部,为此,必须先将组织中水分除净, 用酒精进行脱水(70%→80%→90%→95%→l00 %)。再用二甲苯置换出组织中的酒精,使其透 明,然后放入融化的石蜡中。将浸蜡的组织块 置于包埋框中,冷却后组织块便具有石蜡的硬 度,切片机便能将组织切成薄片
操作步骤 ■1.取材直接取材或灌注后取新鲜组织 (不超过6h),切成3×5×2mm小块。 ■2.固定保持细胞原有形态和结构,解决组织 自溶问题。10%中性甲醛、4%多聚甲醛等。 ■3.冲洗 自来水流水冲洗,目的:停止固定液 对组织的作用,去除固定液,以免影响染色
操作步骤 ◼ 1. 取材 直接取材或灌注后取新鲜组织 (不超过6h),切成3×5×2mm小块。 ◼ 2. 固定 保持细胞原有形态和结构,解决组织 自溶问题。10%中性甲醛、4%多聚甲醛等。 ◼ 3. 冲洗 自来水流水冲洗, 目的:停止固定液 对组织的作用,去除固定液,以免影响染色
4.脱水 通常多用酒精脱水,为减少组织收缩, 脱水酒精的浓度由低浓度开始,逐级升高浓度。 60%(1h)→70%(1h)→80%酒精(1h)→ 90%(1h)→95%(2h)→100%(2h) 注意:脱水的具体时间视组织块 大小体积与厚度而定
4. 脱水 通常多用酒精脱水,为减少组织收缩, 脱水酒精的浓度由低浓度开始,逐级升高浓度。 60% (1h)→70% (1h)→80%酒精(1h)→ 90% (1h)→95%(2h)→ 100 %(2h) 注意: 脱水的具体时间视组织块 大小体积与厚度而定