Step 1.Make a 10-fold dilution series 10 g moist soil. 稀释分离倾注平板 Step 2.For each dilution,transfer 1.0 ml of sol dilutions to replicate agar plates Step 3a.Add molten agar cooled to 45C plate. Step 4.Incubate plates under specifed conditions FIGURE 10.2 Dilution and pour plating technique.Here,the diluted soil suspension is incorporated di- in the agar medium rather than being surlace applied as in the case of spread plating (Adapted from Pepper et aL.1995)
稀释分离倾注平板
2、平皿反应快速检出法一一定性或半定量 纸片培养显色法 透明圈法 变色圈法 ■ 生长圈法 抑制圈
2、平皿反应快速检出法——定性或半定量 ▪ 纸片培养显色法 ▪ 透明圈法 ▪ 变色圈法 ▪ 生长圈法 ▪ 抑制圈
鉴鲨福素产生酱的孢子悬液 突变(紫外线,X射线,丝裂霉素C吖院黄等) 在琼脂平血上的分布(30一100个随落/平血) ☐直径90mm培养皿中放20ml琼脂培芥基 琼脂块培养法筛选抗生素产生菌程序 29℃ 培养2天 用直径6mm木塞穿孔器取出 aamo放入另一培养m中 (80~120琼脂块/平题》 保持一定湿度的小多 29℃ 培养4~5天 将琼脂块移到生物整定板上 aba△babh(170×250mm (130-150琥脂块/平板) 29℃ 培蓉17~18小时 选出接 抑菌圈的检查 入斜面 、 :
琼脂块培养法筛选抗生素产生菌程序
3、厌氧性微生物的分离法 (1)去除培养基中的溶解氧,降低E (2)创造无氧环境 物理除氧空气置换法:干燥器或厌氧培养罐 化学除氧H2+O2→H0(钯作催化剂) >GASPAK罐除氧:硼氢化钠、柠檬酸,碳酸氢钠 化学反应产生H2和CO2,H,与02反应生成水 (3)厌氧分离(培养)技术 高层琼脂柱技术 ·厌氧罐技术 厌氧手套箱技术
3、厌氧性微生物的分离法 (1)去除培养基中的溶解氧,降低Eh (2)创造无氧环境 物理除氧 空气置换法:干燥器或厌氧培养罐 化学除氧 H2 + O2 → H2O (钯作催化剂) ➢ GASPAK罐除氧:硼氢化钠、柠檬酸,碳酸氢钠 化学反应产生H2 和CO2,H2与O2反应生成水 (3)厌氧分离(培养)技术 ▪ 高层琼脂柱技术 ▪ 厌氧罐技术 ▪ 厌氧手套箱技术
Clamp with Palladium clamp screw Lid with catalyst pelle O-ring gasket MGC AnaeroPack Series CO, H and sodium borohvdride Anaerobic indicator (methylene blue) Culture plates GasPak
GasPak