(二)尿囊液的收获 1)从冰箱中取出鸡胚,用碘酒、酒精消毒气 室部位; 2)用无菌镊子除去胶布并去除气室部分的卵 壳; 3)用无菌的毛细吸管插入尿囊腔中轻轻吸取 尿囊液(避免血管破裂),置于无菌中号试管 中; 4)获得的尿囊液取一部分做血凝和血凝抑制 试验(定性),判断病毒的增殖情况并对 病毒进行鉴定;同时做无菌实验
1)从冰箱中取出鸡胚,用碘酒、酒精消毒气 室部位; 2)用无菌镊子除去胶布并去除气室部分的卵 壳; 3)用无菌的毛细吸管插入尿囊腔中轻轻吸取 尿囊液(避免血管破裂),置于无菌中号试管 中; 4)获得的尿囊液取一部分做血凝和血凝抑制 试验(定性),判断病毒的增殖情况并对 病毒进行鉴定;同时做无菌实验。 (二) 尿囊液的收获
(三)血凝和血凝抑制实验 某些病毒包膜表面的血凝素(HA)能与人 “O”型红细胞、脊椎动物如豚鼠、鸡等的 红细胞上的血凝素受体结合,引起红细胞 凝集。在病毒悬液中加入相应的特异性抗 血清后,由于相应的抗体与HA结合,使其 失去凝集作用,再加入人的“O”型血、鸡 或豚鼠的红细胞则不再发生血凝现象,即 为血凝抑制。上述两种现象可作为判断病 毒存在的指标及鉴定病毒
某些病毒包膜表面的血凝素(HA)能与人 “O”型红细胞、脊椎动物如豚鼠、鸡等的 红细胞上的血凝素受体结合,引起红细胞 凝集。在病毒悬液中加入相应的特异性抗 血清后,由于相应的抗体与HA结合,使其 失去凝集作用,再加入人的“O”型血、鸡 或豚鼠的红细胞则不再发生血凝现象,即 为血凝抑制。上述两种现象可作为判断病 毒存在的指标及鉴定病毒。 (三) 血凝和血凝抑制实验
1.血凝实验: ①取U型孔有机玻璃板一块,按顺序编号; ②于第1孔加入生理盐水0.9ml,余孔各加0.5ml; ③于第1孔加收获的尿囊液0.1ml; ④另取一支吸管将第1孔混匀后吸取0.5ml至第2孔; 再将第2孔混匀后吸0.5ml至第3孔,以次类推, 直至第8孔,从第8孔中吸取0.5ml弃去。第9孔 不含病毒,为红细胞对照孔。每孔加入1%鸡血 球0.25ml
1.血凝实验: ①取U型孔有机玻璃板一块,按顺序编号; ②于第1孔加入生理盐水0.9ml,余孔各加0.5ml; ③于第1孔加收获的尿囊液0.1 ml; ④另取一支吸管将第1孔混匀后吸取0.5ml至第2孔; 再将第2孔混匀后吸0.5 ml 至第3孔,以次类推, 直至第8孔,从第8孔中吸取0.5 ml 弃去。第9孔 不含病毒,为红细胞对照孔。每孔加入1%鸡血 球0.25ml
孔号 123456789 生理盐 0.9 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 水(ml) 病毒液 0.1 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 弃 (ml) 病毒液 1: 1: 稀释度 10 20 40 80 160 320 640 1280 1%鸡红 细胞(ml) 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25
孔号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 生理盐 水(ml) 0.9 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 病毒液 (ml) 0.1 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 弃 0.5 病毒液 稀释度 1: 10 1: 20 1: 40 1: 80 1: 160 1: 320 1: 640 1: 1280 — 1%鸡红 细胞(ml) 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25