测序过程: 1模板与引物杂交 2引物的延长和合成阻断 *四个试管分别加入DNA聚合酶dNTP标记底物 *终止剂不同 dda ddg ddc ddT *四个试管中所有产物是一系列长度只差一个核苷酸 的聚合链 3电泳ACGT次序高压电泳 4放射自显影得到直读图象
• 测序过程: – 1.模板与引物杂交 – 2.引物的延长和合成阻断 * 四个试管分别加入 DNA聚合酶 dNTP 标记底物 * 终止剂不同 ddA ddG ddC ddT * 四个试管中所有产物是一系列长度只差一个核苷酸 的聚合链 – 3.电泳 ACGT次序 高压电泳 – 4.放射自显影得到直读图象
dNTP A,C,G或T 碱基 HOP一0P-0-P-0-CH0 OH OH OH 3 2 OH ddNTP A,C,G或T 碱基 0 5 HO一P-0一P-0-P-0-CH,0 OHOHOH 3′ 图11-1dNTP和dNTP的分子结构式
5′…… CACTGATGAGTCOGTGAACGAAACGG.. GTGACTACTCAGGCACTTGCTTIGCC.,, -L5 A A A a C A C C C A G 二 G T T 無 T 图91双脱氧法测序原理示意图
A C G T A 图11-2 ALFexpress全自动测序仪基本操作原理
第十章梭酸分子条交技术 概念:具有互补序列的两条核酸单链在 定条件下,按碱基配对原则形成双链 的过程。 探针待测核酸杂交分子 核酸分子杂交的基本原理 核酸分子杂交的基本方法 探针的标记
第十章 核酸分子杂交技术 • 概念：具有互补序列的两条核酸单链在 一定条件下，按碱基配对原则形成双链 的过程。 • 探针 待测核酸 杂交分子 • 核酸分子杂交的基本原理 • 核酸分子杂交的基本方法 • 探针的标记