(3)限制与修饰系统相关的三个基因 ①hsdR:编码限制性內切酶 这类酶能识别DNA分子上的特定位点,并将双 链DNA切断 ②hsdM:编码限制性甲基化酶 这类酶使DNA分子特定位点上的碱基甲基化, 即起修饰DNA的作用。 ③hsdS:编码限制性內切酶和甲基化酶的协同表达 作用是协同上述两种酶识别特殊的作用位点
(3)限制与修饰系统相关的三个基因 ① hsd R: 编码限制性内切酶 ② hsd M: 编码限制性甲基化酶 ③ hsd S: 编码限制性内切酶和甲基化酶的协同表达 这类酶能识别DNA分子上的特定位点,并将双 链DNA切断 这类酶使DNA分子特定位点上的碱基甲基化, 即起修饰 DNA的作用。 作用是协同上述两种酶识别特殊的作用位点
限制和修饰作用的分子机制 1.大肠杆菌宿主细胞K株,B株,有各自的限制和 修饰系统。 2.入噬菌体长期生长在大肠杆菌宿主细胞K株,B株 中 1)宿主细胞甲基化酶,将染色体DNA和噬菌体 DNA特异性保护 2)封闭自身所产生的核酸内切酶的识别位点 (修饰)
2.入噬菌体长期生长在大肠杆菌宿主细胞 K株,B株 中, 1)宿主细胞甲基化酶,将染色体DNA和噬菌体 DNA特异性保护. 2)封闭自身所产生的核酸内切酶的识别位点-- ----(修饰) 1.大肠杆菌宿主细胞 K株,B 株 ,有各自的限制和 修饰系统。 限制和修饰作用的分子机制
3.外来DNA入侵时,遭到宿主限制性內切酶的特异降 解 (限制) 4.由于降解不完全,外来少数DNA分子在宿主细胞中 繁殖过程中被宿主细胞的甲基化酶修饰,虽然是外 来却不被降解。 5.接受了新宿主菌甲基化修饰的同时,丧失了原宿主 菌修饰的标记,丧失在原宿主细胞中的存活能力。 基因工程中,应采用缺少限制作用的菌株作为受体
3. 外来DNA入侵时,遭到宿主限制性内切酶的特异降 解 ------(限制) 4. 由于降解不完全,外来少数DNA分子在宿主细胞中 繁殖过程中被宿主细胞的甲基化酶修饰,虽然是外 来却不被降解。 5.接受了新宿主菌甲基化修饰的同时,丧失了原宿主 菌修饰的标记,丧失在原宿主细胞中的存活能力。 基因工程中,应采用缺少限制作用的菌株作为受体
第一节限制性核酸內切酶 1、限制-修饰系统 2、限制性核酸內切酶的命名和类型 3、山型限制性核酸内切酶的基本特性 4、影响限制性内切酶活性的因素 5、限制性内切酶对DNA的消化作用
1、限制-修饰系统 2、限制性核酸内切酶的命名和类型 3、II型限制性核酸内切酶的基本特性 4、影响限制性内切酶活性的因素 5、限制性内切酶对DNA的消化作用 第一节 限制性核酸内切酶
限制性内切酶的命名 1973年H0Smth和D. Nathans提议的命名系统, 命名原则如下: 1.用属名的第一个字母和种名的头两个字母组成3 个字母的略语表示寄主菌的物种名,组成酶的基 本名称。 大肠杆菌( Escher/ ichia co/)用Ec表示; 流感嗜血菌( Haemophi/ lus inf/ uenzae)用所表示
1973年H.O Smith和D. Nathans提议的命名系统, 命名原则如下: 限制性内切酶的命名 1.用属名的第一个字母和种名的头两个字母组成3 个字母的略语表示寄主菌的物种名,组成酶的基 本名称。 大肠杆菌(Escherichia coli)用Eco表示; 流感嗜血菌(Haemophilus influenzae)用Hin表示