2 SDS -PAGE 色态和 SDS-coated proteins 心中 已 BSDS-PAGE分离的蛋白 Place mixture of proteins on gel, apply electric field 质可以用Coomassie Cross-linked blue染色,也可银染 polyacrylamlde Partially gel (silver stain separated proteins Direction of migration BSDS-PAGE能分离分子 量差异小于10%的蛋白 Stain to visualize separated bands 质 8用于蛋白质纯化和分子 量近似值测定
SDS -PAGE ± SDS-PAGE 分离的蛋白 质可以用 Coomassie blue 染色,也可银染 (silver stain ) ± SDS-PAGE 能分离分子 量差异小于 10% 的蛋白 质 ±用于蛋白质纯化和分子 量近似值测定
Il.等电聚焦(isoelectric focusing,EF) B在凝胶上加入一种两性电解质(ampholyte),电泳 时会形成连续的pH梯度 8电泳后,各种蛋白质停留在与其等电点(p)相同 的位置 BEF产生三种效应:浓缩效应,分子筛效应和电荷 效应 EF能分离pI值仅相差0.01的蛋白质(即一个净 电单位)
Ⅱ. 等电聚焦(isoelectric focusing ,IEF ) ±在凝胶上加入一种两性电解质(ampholyte),电泳 时会形成连续的 pH 梯度 ±电泳后,各种蛋白质停留在与其等电点(pI)相同 的位置 ± IEF 产生三种效应:浓缩效应,分子筛效应和电荷 效应 ± IEF 能分离 pI 值仅相差 0.01 的蛋白质(即一个净 电单位)
.双向电冰(two-dimensional gel electrophoresis) 分离分子量差异很小的蛋白质 双向电泳=IEF+SDS-PAGE 第一向:根据电荷差异用EF分离 第二向:根据分子量差异用SDS PAGD分离
Ⅲ. 双向电泳(two-dimensional gel electrophoresis) 分离分子量差异很小的蛋白质 双向电泳 = IEF + SDS-PAGE 第一向:根据电荷差异用 IEF 分离 第二向:根据分子量差异用 SDSPAGE 分离
双向电泳(two-dimensional gel electrophoresis IEF SDS-PAGE Isoelectric An ampholyte solution is pH9 incorporated into a gel. pH3 A stable pH Protein After staining. solution is added and the gel after electric field distributed along application of is reapplied. pH gradient an electric according to field. their pl values】
双向电泳(two-dimensional gel electrophoresis) IEF SDS-PAGE
双向电泳(two-dimensional gel electrophoresis) 每一个点代表一条多肽链,每一条多肽链有自 已的等电点和分子量。多肽链可以用染色法或 放射自显影进行检测
双向电泳(two-dimensional gel electrophoresis) 每一个点代表一条多肽链,每一条多肽链有自 己的等电点和分子量。多肽链可以用染色法或 放射自显影进行检测