第四章酶的提取与分离纯化预处理):包括固液分离和细胞(pretreatment)破碎(分离胞内产物)等。(提取):除初步纯化(roughfractionation)去与自的产物性质差异很大的杂质(精制):除去高度纯化(finefractionation)与产物性质相似的杂质浓缩与干燥(concentrationanddesiccation(成品加工):使酶与溶剂分离的过程
第四章 酶的提取与分离纯化 ⚫预处理(pretreatment):包括固液分离和细胞 破碎(分离胞内产物)等。 ⚫初步纯化(rough fractionation) (提取):除 去与目的产物性质差异很大的杂质。 ⚫高度纯化(fine fractionation) (精制):除去 与产物性质相似的杂质。 ⚫浓缩与干燥(concentration and desiccation) (成品加工):使酶与溶剂分离的过程
第一节酶的分离发酵液预处理一、(一)发酵液的相对纯化1.无机离子的去除2.杂蛋白质的去除3.色素及其他物质的去除
第一节 酶的分离 一、发酵液预处理 (一)发酵液的相对纯化 1. 无机离子的去除 2. 杂蛋白质的去除 3. 色素及其他物质的去除
(二)发酵液的固液分离主要方法是离心分离和过滤1.影响发酵液过滤的因素1)菌种2)培养基组成提高过滤性能的方法2. 31絮凝和凝聚2)稀释、加热加助滤剂,常用硅藻土等3)1
(二)发酵液的固液分离 1 . 影响发酵液过滤的因素 ⚫1)菌种 ⚫2)培养基组成 2. 提高过滤性能的方法 1)絮凝和凝聚 2)稀释、加热 3)加助滤剂,常用硅藻土等
二、细胞破碎(一)细胞壁组成细胞壁的主要成分:细菌:肽聚糖(N-乙酰萄糖胺,N-乙酰胞壁酸酵母:葡聚糖,甘露聚糖,蛋白质真菌:多糖(几丁质和葡聚糖
二、细胞破碎 (一)细胞壁组成 ⚫细胞壁的主要成分: ⚫ 细菌:肽聚糖(N-乙酰萄糖胺,N-乙酰胞壁酸) ⚫ 酵母:葡聚糖,甘露聚糖,蛋白质 ⚫ 真菌: 多糖(几丁质和葡聚糖) ⚫
各种微生物细胞壁的结构与组成微生放线霉菌酵母菌革兰氏阳性革兰氏阴性物菌细菌细菌壁厚同G+15~5010~13100~300100~250/nm层次单层多层多层多层主要肽聚糖肽聚糖多聚糖葡聚糖(30%~40%)组成(40% ~(5% ~10%)甘露聚糖(30%)(80%~90%90%)脂类脂蛋白几丁质(1%~2%)多糖脂多糖蛋白质蛋白质(6%~8%)胞壁酸(11% ~ 22%)脂类(8.5%~13.5%)蛋白质磷脂脂多糖蛋白质(1%2%)
微生 物 革兰氏阳性 细菌 革兰氏阴性 细菌 放线 菌 酵母菌 霉菌 壁厚 /nm 15 ~ 50 10 ~ 13 同G+ 100 ~ 300 100 ~ 250 层次 单层 多层 多层 多层 主要 组成 肽聚糖 (40% ~ 90%) 多糖 胞壁酸 蛋白质 脂多糖 (1%〜2%) 肽聚糖 (5% ~ 10%) 脂蛋白 脂多糖 (11% ~ 22%) 磷脂 蛋白质 葡聚糖(30% ~ 40%) 甘露聚糖(30%) 几丁质(1% ~ 2%) 蛋白质(6% ~ 8%) 脂类(8.5% ~ 13.5%) 多聚糖 (80% ~ 90%) 脂类 蛋白质 各种微生物细胞壁的结构与组成