（2）流式细胞分选仪测定法原理：将DNA染色后，DNA含量与荧光强度成正比：而DNA含量恰好跟细胞周期不同时相有关。G1期细胞的DNA含量是二倍体：S期是二倍体到四倍体：G2期和M期都是四倍体：通过流式细胞仪分选后，绘制如下图；tellsinG26.91%16.25%R2cellsinGaandR2Mahasescellis linSphasaWTKOG1/SprogressioninRKOWTandPelativeamountofDNApercellmiR-21knockoutcellstarbierary,unita)（3）缩时摄像技术：可以得到准确的细胞周期时间及分裂间期和分裂期的准确时间
（2）流式细胞分选仪测定法 • 原理：将DNA染色后，DNA含量与荧光强度成正比；而DNA含量恰 好跟细胞周期不同时相有关。G1期细胞的DNA含量是二倍体；S期是 二倍体到四倍体； G2期和M期都是四倍体；通过流式细胞仪分选后， 绘制如下图； （3）缩时摄像技术：可以得到准确的细胞周期时间 及分裂间期和分裂期的准确时间
2细胞周期同步化法（cell synchrony）（1）天然同步化（naturalsynchronization），在自然界中，有些生物本身有部分地或短时间的细胞分裂同步的现象。如有一种粘菌的变形体plasmodia，及某些受精卵早期卵裂爪蟾早期胚胎果蝇早期胚胎
2 细胞周期同步化法（cell synchrony） （1）天然同步化（natural synchronization） • 在自然界中，有些生物本身有部分地或短时间的细胞分裂 同步的现象。如有一种粘菌的变形体plasmodia, 及某些 受精卵早期卵裂 爪蟾早期胚胎 果蝇早期胚胎
(2)人工选择同步化(SelectedM期细胞变圆synchronization)黏着力减弱有丝分裂选择法：用于单层贴壁生长细胞。优点是细胞未经任何药物处理，细胞同步化效率高。缺点是振荡分离M期细胞分离的细胞数量少。密度梯度离心法：根据不同时期的细胞在体积和重量上存在差别进行直接用于M期细胞分离。优点是方法简单省时，效率分析，或继续培养，高，成本低。缺点是对大多数种类获得其他时相的的细胞并不适用。同步化细胞
(2)人工选择同步化(Selected synchronization) 有丝分裂选择法：用于单层贴壁生 长细胞。优点是细胞未经任何药物 处理，细胞同步化效率高。缺点是 分离的细胞数量少。 密度梯度离心法：根据不同时期的 细胞在体积和重量上存在差别进行 分离。优点是方法简单省时，效率 高，成本低。缺点是对大多数种类 的细胞并不适用
(3)药物诱导法DNA合成阻断法一G1/S-TdR双阻断法：最终将细胞群阻断于G1/S交界处。优点是同步化效率高，几平适合于所有体外培养的细胞体系。缺点是诱导过程可造成细胞非均衡生长。（例如采用最多的DNA合成抑制剂为TdR或羟基脲）分裂中期阻断法：通过抑制微管聚合来抑制细胞纺锤体的形成，将细胞阻断在细胞分裂中期。优点是操作简便，效率高。缺点是这些药物的毒性相对较大。（例如用秋水仙素、秋水酰胺和诺考达唑）G1GSSsSMMMMG2G2G2G2BCDA处于对数生加入TdR将TdR洗脱，再加入TdR.细胞被长期的细胞S期细胞被抑制解除抑制抑制在G1/S交界处
(3)药物诱导法 • DNA合成阻断法 ─ G1/S-TdR双阻断法：最终将细胞群阻断于G1/S交 界处。优点是同步化效率高，几乎适合于所有体外培养的细胞体系。 缺点是诱导过程可造成细胞非均衡生长。（例如采用最多的DNA合成 抑制剂为TdR或羟基脲） • 分裂中期阻断法：通过抑制微管聚合来抑制细胞纺锤体的形成，将细 胞阻断在细胞分裂中期。优点是操作简便，效率高。缺点是这些药物 的毒性相对较大。（例如用秋水仙素、秋水酰胺和诺考达唑） 处于对数生 长期的细胞 加入TdR, S期细胞被抑制 将TdR洗脱, 解除抑制 再加入TdR,细胞被 抑制在G1/S交界处
2.通过两次加入过量TdR阻断DNA合成的方法进行细胞周期同步化处理时，细胞群体被阻断在（)A. G1/SB. S/G2C. G2/MD. M/G1
2. 通过两次加入过量TdR阻断DNA合成的方 法进行细胞周期同步化处理时，细胞群体被 阻断在（） A. G1/S B. S/G2 C. G2/M D. M/G1