MPF是什么? MPF指M期细胞中存在的促进细胞分裂的因子,1988, Lohka通过MPF纯化分析,发现MPF由两个亚基组成,P32 和P45,两者结合后有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶活性。 P32周期蛋白依赖性蛋白激酶 主要成分 P45周期蛋白 D72008
MPF是什么? MPF指M期细胞中存在的促进细胞分裂的因子,1988, Lohka通过MPF纯化分析,发现MPF由两个亚基组成,P32 和P45,两者结合后有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶活性。 主要成分 P32 周期蛋白依赖性蛋白激酶 P45 周期蛋白
·二、p34dc2激酶的发现及其与MPF的关系 Hartwell1960s,Nurse1970s分别以芽殖酵母和裂殖酵母为材 料,利用温度敏感突变株,发现许多与细胞分裂有关的基因 (cdc)。如: 裂殖酵母cdc2、芽殖酵母cdc28突变型在限制温度下无法分裂; weel突变型则提早分裂,cdc25突变型细胞体积增大而不分裂; cdc2和cdc28都编码34KD的蛋白激酶(P34cdc2,P34cdc28)促进细胞周期 进行,weel和cdc25分别表现为抑制和促进cdc2的活性。 。 cdc2和cdc28是最早分离的两个基因,两者的突变导致酵母 细胞分裂停留在G2M期,由此可见两者表达的产物P34dc2 P34dc28和MPF一样具有促使细胞分裂的作用
• Hartwell 1960s, Nurse 1970s 分别以芽殖酵母和裂殖酵母为材 料,利用温度敏感突变株,发现许多与细胞分裂有关的基因 ( cdc)。如: – 裂殖酵母cdc2、 芽殖酵母cdc28突变型在限制温度下无法分裂; – wee1突变型则提早分裂,cdc25突变型细胞体积增大而不分裂; – cdc2和cdc28都编码34KD的蛋白激酶(P34cdc2 , P34cdc28 )促进细胞周期 进行,weel和cdc25分别表现为抑制和促进cdc2的活性。 • cdc2和cdc28是最早分离的两个基因,两者的突变导致酵母 细胞分裂停留在G2/M期,由此可见两者表达的产物P34cdc2 , P34cdc28和MPF一样具有促使细胞分裂的作用。 •二、p34cdc2激酶的发现及其与MPF的关系
p34cdc2,p34cdc28和MPF有什么关系呢? 研究表明:P34dc2,P34cdc28和MP℉中的P32是同源性蛋白。 P34cdc2和另一种蛋白P56cdc13结合才有活性。 Hunt1980s发现海胆的卵裂过程中两种蛋白质的含量随细胞 周期进程变化而变化,命名为周期蛋白(cyclin)A和B,是 细胞进入M期必需的。其mRNA能诱导蛙卵非细胞体系进入 细胞周期循环,并且参与MPF功能调解。 进一步的研究发现MP℉的另一成分就是周期蛋白B,并且周 期蛋白B和酵母的P56dc13是同源物。 因此MPF=Cdc2+clyclin B。两个亚基结合后才有蛋白激酶活 性,Cdc2为催化亚基,周期蛋白B为调节亚基
• 研究表明: P34cdc2 ,P34cdc28和MPF中的P32是同源性蛋白。 • P34cdc2和另一种蛋白P56cdc13结合才有活性。 • Hunt 1980s发现海胆的卵裂过程中两种蛋白质的含量随细胞 周期进程变化而变化,命名为周期蛋白(cyclin)A和B,是 细胞进入M期必需的。其mRNA能诱导蛙卵非细胞体系进入 细胞周期循环,并且参与MPF功能调解。 • 进一步的研究发现MPF的另一成分就是周期蛋白B,并且周 期蛋白B和酵母的P56cdc13是同源物。 • 因此MPF=Cdc2+clyclin B。两个亚基结合后才有蛋白激酶活 性,Cdc2为催化亚基,周期蛋白B为调节亚基。 p34cdc2, p34cdc28和MPF有什么关系呢?
cyclin cyclin-dependent kinase(Cdk) (A) (B) mitosis interphase mitosis interphase 与周期蛋白的关系 MPF activity cyclin concentration Dr Tian 2008
MPF 与周期蛋白的关系
三、细胞周期蛋白(cyclin) 特点: ·在细胞周期中呈周期性变化。 ①含有一段约100个氨基酸的保守序列,称为周期蛋白框(cyclin box),介导 与CDK(cyclin dependent kinase)结合。②近N-端含有一段9个氨基酸残基组 成的特殊序列:RXXLGXIXN,称破坏框(destruction box),主要参与泛素介 导的周期蛋白A和B的降解。G1期周期蛋白分子中不含破坏框,但在C-端含有 一段PEST序列,被认为与G1期周期蛋白的更新有关。 ·作用:激活和引导CDK作用于不同底物。 已知几十种,主要有两类:G1期周期蛋白(在G1/S期转换中起作用),M期 周期蛋白(在G2M期转换中发挥作用)。 G1期周期蛋白的PEST框和M期周期蛋白的破坏框在周期蛋白含量调节中起重 要作用。 D7a2008
三、细胞周期蛋白(cyclin) • 特点: • 在细胞周期中呈周期性变化。 • ①含有一段约100个氨基酸的保守序列,称为周期蛋白框(cyclin box),介导 与CDK(cyclin dependent kinase)结合。②近N-端含有一段9个氨基酸残基组 成的特殊序列:RXXLGXIXN,称破坏框(destruction box),主要参与泛素介 导的周期蛋白A和B的降解。G1期周期蛋白分子中不含破坏框,但在C-端含有 一段PEST序列,被认为与G1期周期蛋白的更新有关。 • 作用:激活和引导CDK作用于不同底物。 • 已知几十种,主要有两类:G1期周期蛋白(在G1/S期转换中起作用),M期 周期蛋白(在G2/M期转换中发挥作用)。 • G1期周期蛋白的PEST框和M期周期蛋白的破坏框在周期蛋白含量调节中起重 要作用