(10)最后,在File菜单中选择Save,储存获得的数据。0XRF-5301PCEle AcouroModo Confioure Manipuato Dresentotion HchUnknown1000.000Sey.Saple800.000#IDInt.Ennc.600.000400.000200.000LUUU10.11120G.Seo.t0.00Es館CopThStandar5101AutoZcroRead0五、实验内容与方法1.叶酸标准溶液(2mg.L-")的配制:准确称取2mg叶酸标准品,加入几滴0.1mol-L-l氢氧化钠溶液助溶于烧杯中,充分溶解后转移至容量瓶,用蒸馏水定容至1000.00mL。准确吸取0.501.00,2.00,3.00,4.00,5.00mL叶酸标准溶液,分别置于10.00mL容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度。此系列标准叶酸的浓度为0.10,0.20,0.40,0.60,0.80,1.00mgL,在Ex=365nm,Em449nm处按照仪器工作条件从稀到浓测定荧光强度。以荧光强度为纵坐标,叶酸的含量为横坐标绘制标准曲线。2.待测样品的配制:取一粒研细的铁质叶酸片样品,加入几滴0.1mol-L-氢氧化钠溶液于烧杯中,再转移至容量瓶中用蒸馏水定容至50.00mL准确吸取5.00mL样品母液,置于50.00ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度,得到待测样品溶液。3.待测样品的测定:在Ex=355nm,Em=444nm处测定样品的荧光强度,在标准曲线上找出对应的含量,以此求出铁质叶酸片中的叶酸含量。六、实验数据记录数据与处理(1)叶酸标准溶液、待测液的浓度和荧光强度。编号024待测样135浓度/mg·L-荧光强度(2)根据仪器所绘标准曲线,记录待测样品溶液的浓度,并计算铁质叶酸片中叶酸的含量,用mg/片表示七、预习思考题
(10)最后,在 File 菜单中选择 Save,储存获得的数据。 五、实验内容与方法 1. 叶酸标准溶液(2mg·L-1)的配制:准确称取 2mg 叶酸标准品,加入几滴 0.1mol·L-1 氢氧 化钠溶液助溶于烧杯中,充分溶解后转移至容量瓶,用蒸馏水定容至 1000.00mL。准确吸取 0.50, 1.00,2.00,3.00,4.00,5.00mL 叶酸标准溶液,分别置于 10.00mL 容量瓶中,用蒸馏水定容至刻 度。此系列标准叶酸的浓度为 0.10,0.20,0.40,0.60,0.80,1.00 mg·L-1,在 Ex=365nm,Em= 449nm 处按照仪器工作条件从稀到浓测定荧光强度。以荧光强度为纵坐标,叶酸的含量为横坐标, 绘制标准曲线。 2. 待测样品的配制:取一粒研细的铁质叶酸片样品,加入几滴 0.1mol·L-1氢氧化钠溶液于烧 杯中,再转移至容量瓶中用蒸馏水定容至 50.00mL。准确吸取 5.00mL 样品母液,置于 50.00mL 容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度,得到待测样品溶液。 3. 待测样品的测定:在 Ex=355nm,Em=444nm 处测定样品的荧光强度,在标准曲线上找出 对应的含量,以此求出铁质叶酸片中的叶酸含量。 六、实验数据记录数据与处理 (1) 叶酸标准溶液、待测液的浓度和荧光强度。 编号 0 1 2 3 4 5 待测样 浓度/mg·L-1 荧光强度 (2)根据仪器所绘标准曲线,记录待测样品溶液的浓度,并计算铁质叶酸片中叶酸的含量, 用 mg/片表示 七、预习思考题
1.试解释荧光光度法较吸收光度法灵敏度高的原因?2.试述荧光分光光度计与紫外-可见分光光度计在结构上的有哪些不同点?八、讨论题1.在测定分子荧光强度时,为何要在与入射光成直角的方向上进行测量?2.配制叶酸标准溶液和待测样品时,为何加入氢氧化钠溶液助溶?九、注意事项1.荧光分光光度计的样品池是四面透光的方形池,取用时必须捏着对棱,切勿碰脏池身表面。2.液体样品在转移入样品池中时的液面不要超过样品池的三分之二高度,装样时手应拿在样品池口附近位置。3.配制标准溶液时,为了减少仪器偏差,取不同体积的同种溶液应用同一移液管。4.在使用荧光分光光度计时,须按照既定程序进行。在测定系列标准溶液的浓度和荧光强度时,必须按顺序放入测定。十、参考资料[1]许金钩,王尊本.荧光分析法.第三版.北京:科学出版社,2006[2] Licciardi M, Giammona G, Du J, et al. New folate-functionalized biocompatible block copolymermicelles as potential anti-cancer drug delivery systems, Polymer, 2006, 47: 2946[3] Andrew R H, Philip S L. Folate Receptor-Mediated Drug Targeting: From Therapeutics toDiagnostics,J Pharm Sci,2005,94 (10):2135[4]张国旺,水溶性CdTe纳米粒子的制备及其荧光性能,上海:上海大学化学系,2008,46
1. 试解释荧光光度法较吸收光度法灵敏度高的原因? 2. 试述荧光分光光度计与紫外-可见分光光度计在结构上的有哪些不同点? 八、讨论题 1. 在测定分子荧光强度时,为何要在与入射光成直角的方向上进行测量? 2. 配制叶酸标准溶液和待测样品时,为何加入氢氧化钠溶液助溶? 九、注意事项 1. 荧光分光光度计的样品池是四面透光的方形池,取用时必须捏着对棱,切勿碰脏池身表面。 2. 液体样品在转移入样品池中时的液面不要超过样品池的三分之二高度,装样时手应拿在样 品池口附近位置。 3. 配制标准溶液时,为了减少仪器偏差,取不同体积的同种溶液应用同一移液管。 4. 在使用荧光分光光度计时,须按照既定程序进行。在测定系列标准溶液的浓度和荧光强度 时,必须按顺序放入测定。 十、参考资料 [1] 许金钩,王尊本. 荧光分析法. 第三版. 北京:科学出版社,2006 [2] Licciardi M, Giammona G, Du J, et al. New folate-functionalized biocompatible block copolymer micelles as potential anti-cancer drug delivery systems, Polymer, 2006, 47: 2946 [3] Andrew R H, Philip S L. Folate Receptor-Mediated Drug Targeting: From Therapeutics to Diagnostics, J Pharm Sci, 2005, 94 (10): 2135 [4] 张国旺. 水溶性 CdTe 纳米粒子的制备及其荧光性能,上海:上海大学化学系,2008,46