8.1.2 酶的诱导现象 B.2边 Chcose &2遁 Lactose No P-galactosidlase was produced B-galactsidase was produced B-半乳糖苷酶
8.1.2 酶的诱导现象 B-半乳糖苷酶
Inducer added 无乳糖时,几个B-gal/cell Induction 加入乳糖时,5000个 再去掉乳糖,lac mRNA下降 乳糖能激发lac mRNA的合成 0 10 Time (minutes) 乳糖的诱导作用是由酶前体转化而来,还是诱导新酶 合成? 培养基(35S-aa,无乳糖)→E.coli繁殖→ 培养基(无5S-aa,加入乳糖) →-gal(无35S) 分解底物的酶只有在底物存在时才出现!
分解底物的酶只有在底物存在时才出现! ◼ 无乳糖时,几个B-gal/cell 加入乳糖时,5000个 再去掉乳糖,lac mRNA下降 乳糖能激发lac mRNA的合成 ◼ 乳糖的诱导作用是由酶前体转化而来,还是诱导新酶 合成? 培养基(35S-aa, 无乳糖)→ E.coli繁殖→ 培养基(无35S -aa, 加入乳糖) → β-gal(无35S)
8.1.3 调控机理 1调控区结构 ■lacL,1045bp,独立Pi ■P,82bp,-82~+1 ■0,35bp,-7≈+28 ■lacZYA -50 40-30-20 -10 10 20 30 Promaer binds RNA polymerase binds repressor
8.1.3 调控机理 1 调控区结构 ◼ lacI, 1045bp,独立Pi ◼ P, 82bp,-82~+1 ◼ O, 35bp,-7~+28 ◼ lacZYA
RNA polymerase 2.阻遏状态 regulatory gene DNA-Pi CA Plac lacZ lacY lacA constitutive expression no transcription (nil) ↓ operon repression 体外结合竞争实验: lac repressor 阻遏物+RNA pol,off RNA pol+阻遏物, 0n
体外结合竞争实验: 阻遏物+RNA pol, off RNA pol+阻遏物, on 2. 阻遏状态
RNA polymerase 3诱导状态 (holoenzyme) regulatory gene DNA-Pi CAP Plac lacZ lacY lacA constitutive transcription expression operan induction lac repressor (helix-turn-helix) inactivated repressor 诱导作用:在可诱导的操纵元中, inducer (allolactose) 加入对基因表达有调节作用的小分 诱导物 子后,开启基因的转录活性
3 诱导状态 诱导物 诱导作用:在可诱导的操纵元中, 加入对基因表达有调节作用的小分 子后,开启基因的转录活性