抗生素溶液 为防止细胞培养过程中发生污染,一般在培养液中加入青霉 素钠盐和硫酸链霉素,其浓度分别为每毫升含100U0和100ug。 配制时取青霉素1×106和链霉素1×106μg溶于100 ml Hanks或 PBS中,使其含量为青霉素1×104U/ml,链霉素1×104μgm, 使用时每100m培养液中加入0.5~1ml
抗生素溶液 为防止细胞培养过程中发生污染,一般在培养液中加入青霉 素钠盐和硫酸链霉素,其浓度分别为每毫升含100U和100μg 。 配制时取青霉素1×106和链霉素1×106μg,溶于100ml Hanks或 PBS中,使其含量为青霉素1×104U/ml,链霉素1×104μg/ml, 使用时每100ml培养液中加入0.5~1ml
培养基 培养基(培养液)是维持体外细胞生存和生长的溶液, 分天然培养基和合成培养基。 天然培养基 天然培养基有血清、血浆、和组织提取液(如鸡胚和 牛胚浸液)。 优点:营养成分丰富,培养效果好。 缺点:来源受限。成分复杂,影响对某些实验产物的 提取和实验结果的分析。易发生支原体污染
培养基 u 培养基(培养液)是维持体外细胞生存和生长的溶液, 分天然培养基和合成培养基。 天然培养基: Ø 天然培养基有血清、血浆、和组织提取液(如鸡胚和 牛胚浸液)。 Ø 优点:营养成分丰富,培养效果好。 Ø 缺点:来源受限。成分复杂,影响对某些实验产物的 提取和实验结果的分析。易发生支原体污染
合成培养基 合成培养基是根据细胞生存所需物质的种类和数量,用人 工方法模拟合成的。目前已设计出许多种培养基,如 TC199、MEM、RPMI-1640、DMEM等。 合成培养基主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无 机盐和其它一些辅助物质 优点:标准化生产,组分和含量相对固定。成本低 缺点:缺少某些成分,不能完全满足体外细胞生长需要
合成培养基 Ø 合成培养基是根据细胞生存所需物质的种类和数量,用人 工方法模拟合成的。目前已设计出许多种培养基,如 TC199、MEM、RPMI-1640、DMEM等。 Ø 合成培养基主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无 机盐和其它一些辅助物质。 优点:标准化生产,组分和含量相对固定。成本低 。 缺点:缺少某些成分,不能完全满足体外细胞生长需要
血清 ≯人工合成培养基只能维持细胞生存,要想使细胞生长和繁 殖,还需补充一定量的天然培养基(如血清) 血清中含有: ①多种蛋白质(白蛋白、球蛋白、铁蛋白等); ②多种金属离子; ③激素;各种生长因子; ④促贴附物质,如纤粘蛋白、冷析球蛋白、胶原等; ⑤胰酶抑制因子; ⑥转移蛋白; ⑦不明成分
Ø 人工合成培养基只能维持细胞生存,要想使细胞生长和繁 殖,还需补充一定量的天然培养基(如血清)。 Ø 血清中含有: ①多种蛋白质(白蛋白、球蛋白、铁蛋白等); ②多种金属离子; ③激素;各种生长因子; ④促贴附物质,如纤粘蛋白、冷析球蛋白、胶原等; ⑤胰酶抑制因子; ⑥转移蛋白; ⑦不明成分。 血 清
血清的作用 般说来,含5%小牛血清的培养基对大多数细胞可以维持 细胞不死,但支持细胞生长一般需加10%血清 对于血清支持细因生长的生物学效应已得到证明,但对血 清中的复杂成分至今尚未完全清楚。 血清中不仅存在促细胞生长因子,同对也存在细胞生长抑 制因子或毒性因子,因此在含血清培养基中培养的细胞所 反映的生物学特性是细胞和复杂血清因子的综合反应 在生长因子、蛋白质工程、基因表达调控等研究领域,迫 切需要用无血清培养基培养细胞
Ø 一般说来,含5%小牛血清的培养基对大多数细胞可以维持 细胞不死,但支持细胞生长一般需加10%血清。 Ø 对于血清支持细因生长的生物学效应已得到证明,但对血 清中的复杂成分至今尚未完全清楚。 Ø 血清中不仅存在促细胞生长因子,同对也存在细胞生长抑 制因子或毒性因子,因此在含血清培养基中培养的细胞所 反映的生物学特性是细胞和复杂血清因子的综合反应。 Ø 在生长因子、蛋白质工程、基因表达调控等研究领域,迫 切需要用无血清培养基培养细胞。 血清的作用