第八章基因工程菌培养 概述 基因工程菌生产的产品主要有二类,蛋白 质和非蛋白质。 基因操作: ●敲除或插入基因片段、增强启动子 一代谢工程 ●基因插入载体,转化工程菌
第八章 基因工程菌培养 一、概述 基因工程菌生产的产品主要有二类，蛋白 质和非蛋白质。 基因操作： ⚫敲除或插入基因片段、增强 启动子— —代谢工程 ⚫基因插入载体，转化工程菌
非蛋白质产物大多可以通过代谢工程,改 造细胞的一些基因,如在细胞中插入编码 酶的DNA,产生新的途径或增强某一途径, 从而得到新的化合物或增加产量。 蛋白类产物大多是外源基因片段整合到载 体(如质粒)上,然后转入宿主菌,表达 外源蛋白。 现代基因工程发酵的蛋白质产物主要是这 种方法构建重组菌
蛋白类产物大多是外源基因片段整合到载 体（如质粒）上，然后转入宿主菌，表达 外源蛋白。 现代基因工程发酵的蛋白质产物主要是这 种方法构建重组菌 非蛋白质产物大多可以通过代谢工程，改 造细胞的一些基因，如在细胞中插入编码 酶的DNA，产生新的途径或增强某一途径， 从而得到新的化合物或增加产量
产物/产品 宿主菌 菌体密度[gDCW几 培养基 产物产量 半乳糖苷辞 JM103 合成 4600U/OD 人a干扰素 AM-7 4870 合成 L 蛋白Ap半乳糖苷蹿 KA197 合成 19.2g兀L Min抗体 Rv308 合成 1.04gL 蛋白Ap半乳糖苷酶 TGI 95.5 合成 285×105U几 3异丙基苹果酸脱氢醇 C6 合成 16.00u/g 聚羟基丁酸 XL LI-Blue 101.4 复合 812g 聚羟基丁酸 XLl-Blue 175,4 半合成 6.5g几 聚羟基丁酸 124.6 合成 34.3g 苯基丙氨酸 AT2471 合成 46g/L 大肠杆菌氨酸合成辞 LFO3301 102 合成 16×10U/g 人骨形成蛋白2A YK537 ODm=5 半合成 2.78gL 人白介素31 YK537 OD60=53 半合成 3.3g兀L 人肿瘤坏死因子2 YK537 OD60=120 半合成 6g/L 人肿瘤坏死因子(31 YK537 OD60=60 半合成 5.l2g几L y干扰素( DHSa 104 合成 1.1x10°U几 细胞因子、疫苗、酶
细胞因子、疫苗、酶
产品最主要的用于疾病的诊断和治疗, 此外还有用于畜牧业、食品或工业用的生 物催化剂。 产品特点:要求高纯度。如果不纯,病人 可能产生的强的免疫反应或副作用这对人 是灾难性的。 有的蛋白转译后还要进行修饰,如糖基 化、磷酸化后才有活性。 附加值高。治疗蛋白最主要的是保证产 品的质量和安全,降低成本并不重要
产品最主要的用于疾病的诊断和治疗， 此外还有用于畜牧业、食品或工业用的生 物催化剂。 产品特点：要求高纯度。如果不纯，病人 可能产生的强的免疫反应或副作用这对人 是灾难性的。 有的蛋白转译后还要进行修饰，如糖基 化、磷酸化后才有活性。 附加值高。治疗蛋白最主要的是保证产 品的质量和安全，降低成本并不重要
宿主—载体系统 构建基因工程菌,必须选择宿主和表达系统 要求:翻译后的修饰要简单 如果用于食品要考虑宿主菌要求安全, 列入FDA表中 常用的宿主系统有:大肠杆菌 G+细菌 低等真核细胞 哺乳动物细胞
二、宿主-载体系统 构建基因工程菌，必须选择宿主和表达系统 要求：翻译后的修饰要简单 如果用于食品要考虑宿主菌要求安全， 列入FDA表中 常用的宿主系统有：大肠杆菌 G+细菌 低等真核细胞 哺乳动物细胞