种子检验学种子检验学实验马守才博士/副教授
种子检验学实验 马守才 博士/副教授 种子检验学
实验四品种真实性的SSR分子标记分析一、目的要求1通过实验操作或现场参观了解品种真实性SSR分子标记分析的基本仪器设备、引物和步骤。2)学会识别分子标记电泳图谱或照片图谱,能识别和判断品种图谱的差异
实验四 品种真实性的SSR分子标记分析 一、目的要求 (1)通过实验操作或现场参观了解品种真实性SSR分子标记分 析的基本仪器设备、引物和步骤。 (2)学会识别分子标记电泳图谱或照片图谱,能识别和判断 品种图谱的差异
二、实验原理简单重复序列(simplesequencerepeats,SsR)分布于小麦基因组的不同位置上,不同品种每个位点上重复单位数自及序列可能不同。由于每个重复序列两侧的序列是高度保守和单拷贝的,因而可以根据两侧的序列设计一对特异引物,利用PCR技术对重复序列进行扩增,得到的PCR产物在电泳过程中的电场作用下,由于分子量大小不同得到分离,经硝酸银染色或者荧光染料标记检测区分开。3
3 二、实验原理 简单重复序列(simple sequence repeats,SSR)分布于小麦基 因组的不同位置上,不同品种每个位点上重复单位数目及序列可 能不同。由于每个重复序列两侧的序列是高度保守和单拷贝的, 因而可以根据两侧的序列设计一对特异引物,利用PCR技术对重 复序列进行扩增,得到的PCR产物在电泳过程中的电场作用下, 由于分子量大小不同得到分离,经硝酸银染色或者荧光染料标记 检测区分开
由于不同品种的遗传组成不同,所以根据引物DNA序列存在差异或引物结合部位之间的DNA片段大小存在差异,即可鉴定小麦品种
4 由于不同品种的遗传组成不同,所以根据引物DNA序列存 在差异或引物结合部位之间的DNA片段大小存在差异,即可 鉴定小麦品种
三、材料和用具(见实验过程)四、方法和步骤(一)种子或幼苗DNA提取纯化1.CTAB法2.SDS法3.试剂盒法5
5 三、材料和用具 (见实验过程) 四、方法和步骤 (一) 种子或幼苗DNA提取纯化 1.CTAB法 2.SDS法 3.试剂盒法