琼脂糖凝胶电泳的影响因素 除样品DNA本身的大小外，琼脂糖凝胶电泳的分辨 能力与胶的浓度、缓冲液、电压等有很大关系。 TABLE 6.1 Range of Separation in Gels Containing Different Amounts of Agarose Efficient range of Amount of agarose in gel separation of linear (%[w/v]) DNA molecules (kb) 0.3 5-60 0.6 1-20 0.7 0.8-10 0.9 0.5-7 1.2 0.4-6 1.5 0.2-3 2.0 0.1-2
11 琼脂糖凝胶电泳的影响因素 除样品DNA本身的大小外，琼脂糖凝胶电泳的分辨 能力与胶的浓度、缓冲液、电压等有很大关系
琼脂糖凝胶电泳的参数： 1.缓冲液： TAE(醋酸缓冲液)50倍1000ml母液： 缓冲能力弱，但是可以分离高分子量的DNA TBE(硼酸盐缓冲液)50倍母液 缓冲能力强，可以分离低分子量的DNA 12
12 琼脂糖凝胶电泳的参数： 1.缓冲液： TAE（醋酸缓冲液）50倍1000ml母液： 缓冲能力弱，但是可以分离高分子量的DNA TBE （硼酸盐缓冲液）50倍母液 缓冲能力强，可以分离低分子量的DNA
2凝胶的含量：根据检测的DNA大小 3.加DNA样品：<1μg,指示剂 4.电泳条件：大片段低电压长时间，小片段 高电压短时间 5.染色和观察：溴化乙锭(ethidium bromide,EB)染色，在300nm波长的紫 外下观察（疑胶成像仪）。 能看到0.05μg的微量DNA DNA的片断大小与荧光强度成正比。 13
13 2.凝胶的含量：根据检测的DNA大小 3.加DNA样品：<1μg，指示剂 4.电泳条件：大片段低电压长时间，小片段 高电压短时间 5.染色和观察：溴化乙锭（ethidium bromide，EB）染色，在300nm波长的紫 外下观察（凝胶成像仪）。 能看到0.05 μg的微量DNA DNA的片断大小与荧光强度成正比
50XTAE buffer comb 50X TH agarose sealing mold 玻璃片 14
14 玻璃片
55C,you can handle it pour the gel into the mold put the gel in the tank add buffer 15
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