性腺分泌物(半透明胶状物)阻塞集精瓶口,如有,应及时排除。以利精液流入集精瓶 ⑤采精用具的处理同牛。 4、公兔的采精 (1)用01%高锰酸钾溶液洗净抹干公兔和台兔的外生殖器官周围。 (2)将台兔放入公兔笼中,以诱起公兔的性欲,但勿使其发生本交。当公兔有性的要求 后,即可将台兔拿出。 (3)稍停一下后,再将台兔放入公兔笼,采精员一手固定台兔的颈皮和耳朵,使台兔臀 部向着公兔,另一手持假阴道。当公兔爬跨台兔后,持假阴道一手即伸入公兔的后腹部接 纳阴茎 (4)当公兔阴茎插入假阴道后,即向前一跳,并发出“咕”的叫声,便从台兔背上倒下 时,则表示公兔已经射精。 (5)将台兔和假阴道取出,并打开假阴道上的气嘴放水放气,然后取下集精瓶。 (6)采精器具用后洗涤干净,并凉挂于原来位置,下次再用 五、作业 1、仔细观察采精过程,分析各种公畜的性行为。 2、简单叙述各种家畜的采精方法有何异同? 3、你认为目前的采精方法有什么优缺点?如何改进? 实验二精子活率、密度、畸形率和精液 PH值的测定 目的 通过实验,了解精子的运动方式:识别正常精子和异常精子的形态。初步学会和掌握 精液密度、精子的活率、畸形率和精液酸碱度(PH)的测定方法。熟悉肉眼检査精液品质 的方法
6 性腺分泌物（半透明胶状物）阻塞集精瓶口，如有，应及时排除。以利精液流入集精瓶。 ⑤采精用具的处理同牛。 4、公兔的采精 （1）用 0.l%高锰酸钾溶液洗净抹干公兔和台兔的外生殖器官周围。 （2）将台兔放入公兔笼中，以诱起公兔的性欲，但勿使其发生本交。当公兔有性的要求 后，即可将台兔拿出。 （3）稍停一下后，再将台兔放入公兔笼，采精员一手固定台兔的颈皮和耳朵，使台兔臀 部向着公兔，另一手持假阴道。当公兔爬跨台兔后，持假阴道一手即伸入公兔的后腹部接 纳阴茎。 （4）当公兔阴茎插入假阴道后，即向前一跳，并发出“咕”的叫声，便从台兔背上倒下 时，则表示公兔已经射精。 （5）将台兔和假阴道取出，并打开假阴道上的气嘴放水放气，然后取下集精瓶。 （6）采精器具用后洗涤干净，并凉挂于原来位置，下次再用。 五、作业 l、仔细观察采精过程，分析各种公畜的性行为。 2、简单叙述各种家畜的采精方法有何异同？ 3、你认为目前的采精方法有什么优缺点？如何改进？ 实验二 精子活率、密度、畸形率和精液 PH 值的测定 一、目的 通过实验，了解精子的运动方式；识别正常精子和异常精子的形态。初步学会和掌握 精液密度、精子的活率、畸形率和精液酸碱度（PH）的测定方法。熟悉肉眼检查精液品质 的方法
、材料 家畜精液、载玻片、凹灶玻片、盖玻片、球棒、医用中性石腊油、75%酒精棉球、酒 精灯、伊红染液、纱布、棉花、火柴、PH比色器、PH试纸、烧杯、显微镜、保温箱。 方法步骤 (一)精液的肉眼检查 1、射精量:将采得的精液倒入有刻度的试管或杯中,测其容量。各种家畜的平均射精量 为:牛4(2~10mL):羊1(07~2mL):猪250(150~500mL)。 2、观察精液的色泽并嗅闻气味 3、云雾状的观察:观察精液的云雾状翻腾滚动。按以下符号记入表内,云雾状显著者, 以“+++”表示,有云雾状以“++”表示;云雾状不明显者以“+”表示 (二)精子活率测定 测定精子活率的方法很多,有活精子计算法,死活精子染色法和目测法。目测法因使 用的材料和工具不同,又可分为平板压片法、悬滴检査法和油盖检査法三种。现将目测法 的三种方法的实验步骤分别介绍如下: 、平板压片法 1)将载玻片、盖玻片、玻棒等接触精液的器具洗净候干备用。用时先用蘸有75%酒精 的脱脂棉球抹擦之,然后通过酒精灯进行火焰消毒,待冷候用。 (2)滴一滴精液(如太浓,可先用生理盐水稀释)于消毒过的载玻片上,盖上消毒过的 干净盖玻片 (3)将制好的片子放在显微镜载物台上,先用低倍镜观察,后用高倍镜(400~600倍) 观察(如气温低,须将显微镜置于保温箱内升温到37℃后,再进行镜检)。 悬滴检查法 1)滴一小滴精液于消毒好的盖玻片中央, (2)在凹灶处周围涂上少量水,然后将凹处对准盖玻片上的精液,并覆盖于盖玻片上, 使其贴在一起 (3)将玻片倒转过来,使精液滴悬挂于盖玻片下,便可放在显微镜下观察。 油盖检查法
7 二、材料 家畜精液、载玻片、凹灶玻片、盖玻片、球棒、医用中性石腊油、75%酒精棉球、酒 精灯、伊红染液、纱布、棉花、火柴、PH 比色器、PH 试纸、烧杯、显微镜、保温箱。 三、方法步骤 （一）精液的肉眼检查 1、射精量：将采得的精液倒入有刻度的试管或杯中，测其容量。各种家畜的平均射精量 为：牛 4（2～10mL）；羊 1（0.7～2 mL）；猪 250（150～500 mL）。 2、观察精液的色泽并嗅闻气味。 3、云雾状的观察：观察精液的云雾状翻腾滚动。按以下符号记入表内，云雾状显著者， 以“+++”表示，有云雾状以“++”表示；云雾状不明显者以“+”表示。 （二）精子活率测定 测定精子活率的方法很多，有活精子计算法，死活精子染色法和目测法。目测法因使 用的材料和工具不同，又可分为平板压片法、悬滴检查法和油盖检查法三种。现将目测法 的三种方法的实验步骤分别介绍如下： 1、平板压片法 （1）将载玻片、盖玻片、玻棒等接触精液的器具洗净候干备用。用时先用蘸有 75％酒精 的脱脂棉球抹擦之，然后通过酒精灯进行火焰消毒，待冷候用。 （2）滴一滴精液（如太浓，可先用生理盐水稀释）于消毒过的载玻片上，盖上消毒过的 干净盖玻片。 （3）将制好的片子放在显微镜载物台上，先用低倍镜观察，后用高倍镜（400～600 倍） 观察（如气温低，须将显微镜置于保温箱内升温到 37℃后，再进行镜检）。 2、悬滴检查法 （1）滴一小滴精液于消毒好的盖玻片中央。 （2）在凹灶处周围涂上少量水，然后将凹处对准盖玻片上的精液，并覆盖于盖玻片上， 使其贴在一起。 （3）将玻片倒转过来，使精液滴悬挂于盖玻片下，便可放在显微镜下观察。 3、油盖检查法
(1)滴一滴精液于消毒过的载玻片上 (2)在精液上面滴一滴医用中性石腊油即可放在显微镜下观察。 4、活率的评定 (1)在显微镜下观察精子的运动方式,并区别直线前进式运动、旋转式运动和摆动式运 动的精子活动的情况。 (2)根据视野中呈直线前进式运动的精子所占比例进行测定。如全部精子均呈直线前进 式运动,看不到非直线前进式运动的精子,可评为“1.0”分:如果视野中只有80%的精 子呈直线前进式运动,其余20%呈非直线前进式运动,则评为“08”分,其余依此类推 测定时要求多看几个视野,然后进行综合评定。在一个视野中,如果呈前进式运动的精子 占多数,则重点估测非前进式运动的精子所占比例,反之则估测前进式运动的精子所占比 例 (三)精液密度检查 测定精液密度的方法有估测法,红细胞计数法和光电比色法。其中估测法通常结合精 子活率进行检查,一般用测定活率的平板压片法进行 取一小滴精液于清洁的载玻片上,加上盖玻片,使精液分散成均匀一薄层,但不得有 气泡,也不能使精液外流或溢于盖玻片上,置显微镜下放大400~600倍观察,按下列等 级评定其密度(如图2-1) ) 图2-1稀 1、稀:精子分散存在,精子间的空隙超过一个精子长度,这种精液一般每毫升所含精子 在2亿以下。 2、中:精子之间的空隙明显,精子彼此之间距离约有一个精子的长度。有些精子的活动 情况可以清楚地看到。这种精液的密度评为“中”,一般每毫升所含精子数约在2~10 亿之间
8 （1）滴一滴精液于消毒过的载玻片上。 （2）在精液上面滴一滴医用中性石腊油即可放在显微镜下观察。 4、活率的评定 （1）在显微镜下观察精子的运动方式，并区别直线前进式运动、旋转式运动和摆动式运 动的精子活动的情况。 （2）根据视野中呈直线前进式运动的精子所占比例进行测定。如全部精子均呈直线前进 式运动，看不到非直线前进式运动的精子，可评为“1.0”分；如果视野中只有 80％的精 子呈直线前进式运动，其余 20% 呈非直线前进式运动，则评为“0.8”分，其余依此类推。 测定时要求多看几个视野，然后进行综合评定。在一个视野中，如果呈前进式运动的精子 占多数，则重点估测非前进式运动的精子所占比例，反之则估测前进式运动的精子所占比 例。 （三）精液密度检查 测定精液密度的方法有估测法，红细胞计数法和光电比色法。其中估测法通常结合精 子活率进行检查，一般用测定活率的平板压片法进行。 取一小滴精液于清洁的载玻片上，加上盖玻片，使精液分散成均匀一薄层，但不得有 气泡，也不能使精液外流或溢于盖玻片上，置显微镜下放大 400～600 倍观察，按下列等 级评定其密度（如图 2-1）。 1、稀：精子分散存在，精子间的空隙超过一个精子长度，这种精液一般每毫升所含精子 在 2 亿以下。 2、中：精子之间的空隙明显，精子彼此之间距离约有一个精子的长度。有些精子的活动 情况可以清楚地看到。这种精液的密度评为“中”， 一般每毫升所含精子数约在 2～10 亿之间。 图 2-1 稀 中 密
3、密:在整个视野中精子密度很大,彼此间空隙很小,看不清各个精子运动的活动情况, 这一级属于“密”,一般每毫升含精子数约在10亿以上 (四)PH的测定 比色试纸法 (1)取一滴精液于清洗干净的凹玻片上,然后用一小张精密试纸(65~8:0)放于精液滴 (2)让精液渗湿试纸后即在精密试纸比色图上比色,并记录结果。 (五)精子畸形率的检查 1、滴一小滴精液于消毒过的载玻片一端, 2、用另一块边缘光滑的玻片(最好为凹灶玻片)的一端斜抵于精液前成35℃角,使凹灶 玻片底面与精液接触,并向两旁散开后,即向载玻片的另一端轻快推去,使精液均匀地涂 于载玻片上。(见图2-2) 图2-2精液抹片示意图 图2-3左图为正常精子(左下为原生质小滴), 右图为各种畸形精子 3、让抹片风干后,先在显微镜下观察所抹片子如何,如理想,则可染色:否则,洗去重 做
9 3、密：在整个视野中精子密度很大，彼此间空隙很小，看不清各个精子运动的活动情况， 这一级属于“密”，一般每毫升含精子数约在 10 亿以上。 （四）PH 的测定 1、比色试纸法 （1）取一滴精液于清洗干净的凹玻片上，然后用一小张精密试纸（6.5～8.0）放于精液滴 上。 （2）让精液渗湿试纸后即在精密试纸比色图上比色，并记录结果。 （五）精子畸形率的检查 1、滴一小滴精液于消毒过的载玻片一端。 2、用另一块边缘光滑的玻片（最好为凹灶玻片）的一端斜抵于精液前成 35℃角，使凹灶 玻片底面与精液接触，并向两旁散开后，即向载玻片的另一端轻快推去，使精液均匀地涂 于载玻片上。（见图 2-2） 3、让抹片风干后，先在显微镜下观察所抹片子如何，如理想，则可染色；否则，洗去重 做。 图 2-3 左图为正常精子（左下为原生质小滴）， 右图为各种畸形精子 图 2-2 精液抹片示意图
4、在风干的抹片上滴上2~3滴5%伊红染液,并用玻棒稍为推开。染色3~5min,然后 轻轻用水洗去多余的染料,候干镜检。 也可以用下列方法固定染色。(1)用0.5%的龙胆紫酒精染色3min,水洗,待干后即 可镜检(也可用由普通红蓝墨水代替)。(2)置95%酒精中(或5%福尔马林溶液)固定5 6min,取出以水冲洗后,凉干或烘干,用蓝、红墨水等染色3~5min,再用水冲洗,干燥 后置于显微镜下检查。 5、镜检:在任意若干个视野中计算200个精子中有多少个畸形精子(注意区别正常精子 和头、颈、中段部以及尾部畸形的精子)。并记载于表中。(见图2-3) 6、计算精子的畸形率 精子畸形率=畸形精子数/(正常精子数十畸形精子数)×100% 四、作业 1、列表记载本次实验所得的精液密度、精子的活率及精液PH数值 2、将精子畸形率的检查结果详细记入下列表格中。 项目|正常精子 畸形精子 总观察数畸形率 头部颈部中段|尾部总数 (%) 观察数 总计 3、在检査精子活率时,为了获得比较准确的结果,你认为应注意哪些事项 实验三公畜精液的稀释及低温保存 目的 熟悉精液稀释液的配制方法 2、掌握低温保存的技术
10 4、在风干的抹片上滴上 2 ～3 滴 5%伊红染液，并用玻棒稍为推开。染色 3～5min，然后 轻轻用水洗去多余的染料，候干镜检。 也可以用下列方法固定染色。（1）用 0.5%的龙胆紫酒精染色 3min，水洗，待干后即 可镜检（也可用由普通红蓝墨水代替）。（2）置 95%酒精中（或 5%福尔马林溶液）固定 5～ 6min，取出以水冲洗后，凉干或烘干，用蓝、红墨水等染色 3～5min，再用水冲洗，干燥 后置于显微镜下检查。 5、镜检：在任意若干个视野中计算 200 个精子中有多少个畸形精子（注意区别正常精子 和头、颈、中段部以及尾部畸形的精子）。并记载于表中。（见图 2-3） 6、计算精子的畸形率： 精子畸形率 = 畸形精子数 /（正常精子数＋畸形精子数）×100% 四、作业 1、列表记载本次实验所得的精液密度、精子的活率及精液 PH 数值。 2、将精子畸形率的检查结果详细记入下列表格中。 项目 正常精子 畸形精子 总观察数 畸形率 头部 颈部 中段 尾部 总数 （%） 观察数 总计 3、 在检查精子活率时，为了获得比较准确的结果，你认为应注意哪些事项？ 实验三 公畜精液的稀释及低温保存 一、目的 1、熟悉精液稀释液的配制方法； 2、掌握低温保存的技术