e 限制性内切帼 ECORI MI PCRI PCR2 PCR3 P M2 8—5 23130bp 57 4,361bp Cleavage EcoRI 5 G AATTC 3 CTTAA 250bp 限制性内切酶对DNA的切割电泳对DNA片段的分离 限制性內切酶( restriction endonuc lease) 识别并切割特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶,俗称“基 因剪刀”。 电泳是利用DNA长度大小来分离DNA的方式(视频)
限制性内切酶 26 • 限制性内切酶 (restriction endonuclease) 识别并切割特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶,俗称“基 因剪刀”。 • 电泳是利用DNA长度大小来分离DNA的方式(视频) 限制性内切酶对DNA的切割 电泳对DNA片段的分离
0利用R上P检测MNR Restriction enzyme 2 Restriction enzyme 1 MAN Allele 2.5kb MM MM Allele W Allele 3 3.5kb A Allele 4 限制性片段长度多态性( restriction fragment ength po l morph i sm, RFLP) DNA序列发生变异,进而导致酶切后DNA片段长度发 生的变化 WNTR重复次数的变化会引起RFLP。 27
利用RFLP检测VNTR 27 • 限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism,RFLP) DNA序列发生变异,进而导致酶切后DNA片段长度发 生的变化。 • VNTR重复次数的变化会引起RFLP
DNA指纹技术的诞生 nature To read this story in full you will need to login or make a payment right) Journal home Archive Letters to Nature Full Text Letters to Nature Nature 318, 577-579(12 December 1985)I doi: 10.1038/318577a0: Accepted 24 October 1985 Forensic application of DNA fingerprints ARTICLETOOLS eter Gill Alec ). Jeffreys& David 3. Werrett M Export cita 1, Central Research Establishment, Home office Forensic science 占 Export references of Genetics, University of Leicester, University Road,Order Leicester LE1 7RH UK 1985年,英国遗传学家 Alec Jeffreys发明了DNA 指纹图谱,其基本原理就是利用RFLP鉴定WTR
DNA指纹技术的诞生 28 • 1985年,英国遗传学家Alec Jeffreys发明了DNA 指纹图谱,其基本原理就是利用RFLP鉴定VNTR
DNA指纹技术的原理 Jefferys reasoned that when a restriction enzyme cuts at specific sites on either side of the repeat region, the different numbers of repeats in the VNTR alleles would create restriction fragments of different sizes PROBE VNTR REPEAT 在ⅦTR座位两端酶切,由于WNTR的重复次 数不同,会产生大小不同的片段
DNA指纹技术的原理 29 • 在VNTR座位两端酶切,由于VNTR的重复次 数不同,会产生大小不同的片段
DNA指纹技术的原理 A restriction digest of a person's entire genome produces millions of DNA fragments of different sizes. Jeffreys realized that he could use his prob to identify the subset of restriction fragments containing the VNTR repeat DNA PIECES TO BE ANALYZED 对人体基因组酶切后,产生了几百万个DNA 片段,其中一些片段含有WNTR
DNA指纹技术的原理 30 • 对人体基因组酶切后,产生了几百万个DNA 片段,其中一些片段含有VNTR