6.TimHunt（蒂姆亨特1943）foundcyclinin1983用海胆卵细胞为材料，受精以后，用35S标记的一个氨基酸作为蛋白质合成的前体，与海胆的受精卵孵育，不同时间点取样，电泳，进行放射性显影，结果发现，原来有些亮度较强的带，在某些时间点变弱了，说明卵裂过程中的蛋白质是周期性的出现与消失，因此就称这种蛋白为周期蛋白(cyclin)TimHunt35S-Met:FertilizedeggsmitosisinterphasemitosisinterphaseMPFactivitycyclinFrom Timconcentrationand hiscolleagues16min60min80min120
6. Tim Hunt（蒂姆 亨特1943~） found cyclin in 1983 • 用海胆卵细胞为材料，受精以后，用35S标记的一个氨基酸 作为蛋白质合成的前体，与海胆的受精卵孵育，不同时间点 取样，电泳，进行放射性显影，结果发现，原来有些亮度较 强的带，在某些时间点变弱了，说明卵裂过程中的蛋白质是 周期性的出现与消失，因此就称这种蛋白为周期蛋白 （cyclin）
: When the gel was developed on Friday 23July 1982, I found that the strongest bandearly on suddenly got very much weakerat about the time when the eggs wereabout to divide in two. This was a stunningstarting discovery
• When the gel was developed on Friday 23 July 1982, I found that the strongest band early on suddenly got very much weaker at about the time when the eggs were about to divide in two. This was a stunning, starting discovery
7.Whatistherelationshipbetweencyclinsorcdc2andMPF?1988，JamesMaller实验室的Lohka等人以非洲爪蟾卵细胞为材料分离纯化MPF，发现MPF是一个复合体，有两个蛋白质组成，一个亚基是32kD，另一个亚基是45kD，还发现MPF具有蛋白激酶活性。后来，用cdc2抗体，能够与cdc2结合在一起，当与MPF孵育后，发现cdc2抗体也能与32kD的亚基结合在一起，说明cdc2与32KD的亚基是同源物；用同样的方法，也验证了cyclinB与45KD的亚基是同源物；结果分析：MPF是一个二聚体，其中一个催化亚基是激酶，另一个调节亚基是周期蛋白周期蛋白，是细胞周期引擎的正调控因子，cyclin与细胞周期蛋白依赖性激酶结合调节其活性
7. What is the relationship between cyclins or cdc2 and MPF? • 1988，James Maller实验室的Lohka等人以非洲爪蟾卵细胞为材料， 分离纯化MPF，发现MPF是一个复合体，有两个蛋白质组成，一个亚 基是32kD，另一个亚基是45kD，还发现MPF具有蛋白激酶活性。 • 后来，用cdc2抗体，能够与cdc2结合在一起，当与MPF孵育后，发 现cdc2抗体也能与32kD的亚基结合在一起，说明cdc2与32KD的亚基 是同源物；用同样的方法，也验证了cyclin B 与45KD的亚基是同源物； • 结果分析：MPF是一个二聚体，其中一个催化亚基是激酶，另一个调 节亚基是周期蛋白 cyclin：周期蛋白，是细胞周期引擎的正调控因子， 与细胞周期蛋白依赖性激酶结合调节其活性
MPF是一种使多种底物蛋白磷酸化的蛋白激酶；由M期Cyclin-Cdk (Cyclin-dependent protein kinase)形成的复合物。MPF=(CDK1=p34cdc2)+cyclinBcyclincyclin-dependentkinase(Cdk)
• MPF是一种使多种底物蛋白磷酸化的蛋白激酶；由M期 Cyclin-Cdk ( Cyclin-dependent protein kinase)形成的复 合物。 • MPF=(CDK1=p34cdc2)+cyclinB
p34cdc2激酶的发现及其与MPF的关系（已知）非洲爪蟾卵：MPF=p32+p45；MPF是激酶裂殖酵母：cdc2（基因）→p34cdc2（蛋白）p34cdc2激酶→调控Gz/M转换；p34cdc2十p56cdc13。cdc即细胞分裂周期之缩写。芽殖酵母：cdc28（基因）→p34cdc28（蛋白）p34cdc28激酶→调控G,/S和Gz/M转换；p34cdc28=p34cdc2（同源物）。p34cdc2~p32（同源物）。海胆卵：含量随细胞周期进程变化而变化的蛋白质即周期蛋白（cyclin），cyclinB是MPF的另一种主要成分；CyclinB=p56cdc13（同源物）结论：MPF=催化亚基单位（CDK）十调节亚单位（Cyclin）。CDK为周期蛋白（cyclin）依赖性蛋白激酶
p34cdc2激酶的发现及其与MPF的关系 • （已知）非洲爪蟾卵：MPF ＝ p32 ＋ p45；MPF是激酶 • 裂殖酵母：cdc2（基因）→ p34cdc2（蛋白） p34cdc2激酶→调控G2 /M转换； p34cdc2 ＋ p56cdc13。cdc即细胞分裂周期之缩写。 • 芽殖酵母：cdc28（基因）→ p34cdc28（蛋白）p34cdc28激酶→调控G1 /S和 G2 /M转换；p34cdc28 ≈p34cdc2（同源物）。 • p34cdc2 ≈ p32（同源物）。 • 海胆卵：含量随细胞周期进程变化而变化的蛋白质即周期蛋白（cyclin）， cyclinB是MPF的另一种主要成分；cyclinB ≈p56cdc13（同源物）。 结论：MPF ＝ 催化亚基单位 （CDK）＋调节亚单位（Cyclin）。CDK 为周期蛋白（cyclin）依赖性蛋白激酶