(二)细胞周期检验点及其作用G/S检验点:启动DNA的复制S期检验点:#检验DNA复制是否完毕G2/M检验点:检验细胞环境因素是否合适,能DNA是否完全复制。5否开始分裂中-后期检验点:检验染色体是否都与纺锤体相连RestingSpindleAssemblyCheckpointstateCheckfor:.Chromosomeattachmentto spindleG2CheckpointCheckfor:·Cell sizeM·DNAreplicationG1CheckpointG2G1Checkfor:.Cell sizeNutrients·GrowthfactorsG1期检验点:酵母一-Start;S.DNA damage(DNAsynthesis)动物细胞-RestrictionPointRestingstate (GO)本质:周期性活化的蛋白激酶
(二)细胞周期检验点及其作用 • G1 /S检验点:启动DNA的复制 • S期检验点:检验DNA复制是否完毕 • G2/M检验点:检验细胞环境因素是否合适,DNA是否完全复制,能 否开始分裂 • 中-后期检验点:检验染色体是否都与纺锤体相连 G1期检验点:酵母——Start; 动物细胞——Restriction Point 本质:周期性活化的蛋白激酶
三、 MPF(Maturation-promoting factor),卵细胞成熟促进因子(maturationpromotingfactor,MPF)又称细胞有丝分裂促进因子(Mitosis-promotingfactor),早期称为M期促进因子(M-phasepromotingfactor,MPF),是指M期细胞中存在的促进细胞分裂的因子作用:促使细胞从G2期进入M期
三、 MPF( Maturation-promoting factor) • 卵细胞成熟促进因子(maturation promoting factor,MPF), 又称细胞有丝分裂促进因子(Mitosis-promoting factor), 早期称为M期促进因子(M-phase promoting factor, MPF), 是指M期细胞中存在的促进细胞分裂的因子 作用:促使细胞从G2期进入M期
(一)MPF的发现及其生化实质1.细胞融合与Pcc(Prematurechromosomalcondense)1970,Johnson和Rao,在Nature发表文章,将HeLa细胞同步化在M期,然后将M期的HeLa细胞在灭活的仙台病毒介导下和袋鼠的肾细胞间期不同时期(G1.S.G2)的细胞分别融合,在光学显微镜下观察其形态变化:发现G1期的染色体提前凝聚了PCC:即早熟染色体凝缩,主要是指与M期细胞融合的间期细胞(G1、S和G,)发生的形态各异的染色体凝缩。不同时相的间期细胞与M期细胞融合,产生的PCC形态各异:G,期PCC为细单线状(因DNA未复制D)S期PCC为粉末状(因DNA由多个部位开始复制DG,期PCC为双线染色体状(说明DNA复制已完成)这样的形态变化可能与DNA复制状态有关。结论:既然M期细胞可以诱导PCC,提示在M期细胞中可能存在一种诱导染色体凝集的因子,称为细胞有丝分裂促进因子
㈠MPF 的发现及其生化实质 1.细胞融合与 PCC ( Premature chromosomal condense) • 1970, Johnson和Rao ,在Nature发表文章,将HeLa细胞同步化在 M期,然后将M期的HeLa细胞在灭活的仙台病毒介导下和袋鼠的肾细 胞间期不同时期(G1, S, G2)的细胞分别融合,在光学显微镜下观 察其形态变化;发现G1期的染色体提前凝聚了。 • PCC:即早熟染色体凝缩,主要是指与M期细胞融合的间期细胞(G1、 S和G2)发生的形态各异的染色体凝缩。 • 不同时相的间期细胞与M期细胞融合,产生的PCC形态各异: G1期PCC为细单线状(因DNA未复制), S期PCC为粉末状(因DNA由多个部位开始复制), G2期PCC为双线染色体状(说明DNA复制已完成), 这样的形态变化可能与DNA复制状态有关。 • 结论:既然M期细胞可以诱导PCC,提示在M期细胞中可能存在一种 诱导染色体凝集的因子,称为细胞有丝分裂促进因子
M期细胞与G(A)、S(B)和G,(C)期细胞融合诱导早熟染色体凝缩(PCC)M期人染色体M期人染色体M期人染色体北力8484G期G2期M期S期M期M期XYXYA888884VE诱导PtkG2期细胞染色体诱导PtkS期细胞染色体诱导PtkG期细胞染色体M期人染色体新0M期人染色体M期人染色体4-AXBCA
M期细胞与G1(A)、S(B)和G2(C)期细胞融合诱导早熟染 色体凝缩(PCC)
2.爪蟾卵子成熟过程1971,Y.Masui和C.L.Markert用非洲爪蟾来做实验(卵母细胞体积大、肉眼可见,数量多)生发泡(germinalvesicle,GV)G2期的细胞核非常大,很明显;因为在G2期要合成大量的营养物质pr;此时这个体积很大的细胞核,称为生发泡孕酮减数分裂I各级卵母细胞受精受精卵减数分裂Ⅱ第一次卵裂此实验表明:激素(孕酮)诱导卵母细胞成熟;
2.爪蟾卵子成熟过程 • 1971, Y.Masui和C.L.Markert 用非洲爪蟾来做实验(卵母细胞体积大、 肉眼可见,数量多 ) • 生发泡(germinal vesicle, GV)G2期的细胞核非常大,很明显;因 为在G2期要合成大量的营养物质pr;此时这个体积很大的细胞核, 称为生发泡 • 此实验表明:激素(孕酮)诱导卵母细胞成熟;