菌株的育种 从自然界中筛选有产酸能力的菌株,并建立其培养条件 ·在确立突变技术和阐明氨基酸生物合成系统调节机制 的基础上发展为营养缺陷变异株、抗药性菌株的育种 ·随着重组DNA技术的发展,接合、转导、转染、细胞融 合等手段首先用于体内基因重组,是早期用基因重组方 法构建生产菌株的尝试 随着载体、受体系统的构建及体外基因重组技术的日 益完善氨基酸生物工程菌的构建有了长足的发展。 ·苏氨酸等的生产菌株被成功地构建并应用于工业化生
菌株的育种 • 从自然界中筛选有产酸能力的菌株,并建立其培养条件. • 在确立突变技术和阐明氨基酸生物合成系统调节机制 的基础上发展为营养缺陷变异株、抗药性菌株的育种。 • 随着重组DNA技术的发展,接合、转导、转染、细胞融 合等手段首先用于体内基因重组,是早期用基因重组方 法构建生产菌株的尝试。 • 随着载体、受体系统的构建及体外基因重组技术的日 益完善,氨基酸生物工程菌的构建有了长足的发展。 • 苏氨酸等的生产菌株被成功地构建并应用于工业化生 产
2.1用野生株的方法 这是从自然界获得的分离菌株进行发酵 生产的一种方法。 典型的例子就是谷氦酸发酵 改变培养条件的发酵转换法中,有变化铵 离子浓度、磷酸浓度,使谷氨酸转向谷 氨酰胺和缬氨酸发酵
2.1 用野生株的方法 • 这是从自然界获得的分离菌株进行发酵 生产的一种方法。 • 典型的例子就是谷氨酸发酵。 • 改变培养条件的发酵转换法中,有变化铵 离子浓度、磷酸浓度,使谷氨酸转向谷 氨酰胺和缬氨酸发酵
22用营养缺陷变异株的方法 这一方法是诱变出菌体内氨基酸生物合 成某步反应阻遏的营养缺陷型变异体, 使生物合成在中途停止,不让最终产物 起控制作用。 这种方法中有用高丝氨酸缺陷株的赖氦 酸发酵,有用精氨酸缺陷株的鸟氨酸发 酵,还有用异亮氨酸缺陷株的脯氨酸发 酵
2.2 用营养缺陷变异株的方法 • 这一方法是诱变出菌体内氨基酸生物合 成某步反应阻遏的营养缺陷型变异体, 使生物合成在中途停止,不让最终产物 起控制作用。 • 这种方法中有用高丝氨酸缺陷株的赖氨 酸发酵,有用精氨酸缺陷株的鸟氨酸发 酵,还有用异亮氨酸缺陷株的脯氨酸发 酵
23类似物抗性变异株的方法 用一种与自己想获得的氨基酸结构相类 似的化合物加入培养基内,使其发生控 制作用,从而抑制微生物的生长。这样, 就可以得到在这种培养基中能够生长的 变异株,而这种变异株正是解除了调控 机制的,能够生成过量的氨基酸 利用此方法发酵的有:苏氨酸、赖氨酸 异亮氨酸、组氨酸和精氨酸
2.3 类似物抗性变异株的方法 • 用一种与自己想获得的氨基酸结构相类 似的化合物加入培养基内,使其发生控 制作用,从而抑制微生物的生长。这样, 就可以得到在这种培养基中能够生长的 变异株,而这种变异株正是解除了调控 机制的,能够生成过量的氨基酸。 • 利用此方法发酵的有:苏氨酸、赖氨酸、 异亮氨酸、组氨酸和精氨酸
24体内及体外基因重组的方法 基因工程包括细胞内基因重组方法和试管内的体外 基因重组方法。 体内基因重组在应用上又称为杂交育种,主要方法 包括:转化、转染、接合转移、转导和细胞融合等, 这都是在细胞内暂时地产生染色体的局部二倍体, 在两条DNA链之间引起两次以上的交叉,是遗传性 重组现象。 细胞内基因重组技术的缺点是,现在只在同种或有 近缘关系的微生物之间进行并较难成功
2.4 体内及体外基因重组的方法 • 基因工程包括细胞内基因重组方法和试管内的体外 基因重组方法。 • 体内基因重组在应用上又称为杂交育种,主要方法 包括:转化、转染、接合转移、转导和细胞融合等, 这都是在细胞内暂时地产生染色体的局部二倍体, 在两条DNA链之间引起两次以上的交叉,是遗传性 重组现象。 • 细胞内基因重组技术的缺点是,现在只在同种或有 近缘关系的微生物之间进行并较难成功