四、紫外-可见吸收光谱 2.朗伯-比尔（Lambert-Beer)定律 如果浓度c是摩尔浓度（单位mol/儿），光程b(单位以cm表 示)，则吸光系数K2称为摩尔吸光系数，一般用E表示，其单位 为L/(mol.cm) ·朗伯比尔定律可改写为： A=1og(I。/I,)=bc 式中，e是吸光物质溶液在吸光物质浓度c为1mol/儿、光程b=1cm 时的吸光度；ε值越大，该吸光物质对此波长光的吸收能力越强，显 色反应越灵敏 ·一般情况下，的变化范围是10~105 ￡>104为强度大的吸收 ￡<103为强度小的吸收
• 如果浓度 c 是摩尔浓度（单位mol/L），光程 b （单位以cm表 示）， 则吸光系数 K2 称为摩尔吸光系数，一般用 ε 表示，其单位 为L/(mol·cm) • 朗伯-比尔定律可改写为： 式中，ε是吸光物质溶液在吸光物质浓度c为1mol/L、光程b = 1cm 时的吸光度；ε值越大，该吸光物质对此波长光的吸收能力越强，显 色反应越灵敏 • 一般情况下，ε的变化范围是10 ~ 105 ε > 104为强度大的吸收 ε < 103为强度小的吸收 A = log(I 0 / It ) = ebc 四、紫外-可见吸收光谱 2. 朗伯-比尔（Lambert-Beer）定律
四、紫外-可见吸收光谱 3.引起朗伯-比尔定律偏离的主要因素 ①非单色光引起的偏离 ●从理论上讲，朗伯-比尔定律只适用于单色光 但实际工作中，不可能从光学分析仪器上得到真正的单色光，只能 得到波长范围很窄的光谱带，导致进入试样的仍是在一定波段的复 合光 由于物质对不同波长的光具有不同的吸光程度，即使采用很窄的狭 缝宽度仍然会产生朗伯-比尔定律偏离，导致吸光度A与溶液浓度c 不成线性关系
3. 引起朗伯-比尔定律偏离的主要因素 ① 非单色光引起的偏离 l 从理论上讲，朗伯-比尔定律只适用于单色光 l 但实际工作中，不可能从光学分析仪器上得到真正的单色光，只能 得到波长范围很窄的光谱带，导致进入试样的仍是在一定波段的复 合光 l 由于物质对不同波长的光具有不同的吸光程度，即使采用很窄的狭 缝宽度仍然会产生朗伯-比尔定律偏离，导致吸光度A与溶液浓度c 不成线性关系 四、紫外-可见吸收光谱
四、紫外-可见吸收光谱 3.引起朗伯-比尔定律偏离的主要因素 ②杂散光号引起的偏离 >杂散光是紫外-可见分光光度计的主要分析误差来源 >产生杂散光的主要原因有： ①光栅（占~80%） ②组成吸光物质的粒子对入射光的散射 ③样品因素，例如样品在光照下产生的光致发光或荧光现象
② 杂散光引起的偏离 Ø 杂散光是紫外-可见分光光度计的主要分析误差来源 Ø 产生杂散光的主要原因有： ① 光栅（占~80%） ② 组成吸光物质的粒子对入射光的散射 ③ 样品因素，例如样品在光照下产生的光致发光或荧光现象 3. 引起朗伯-比尔定律偏离的主要因素 四、紫外-可见吸收光谱
四、紫外-可见吸收光谱 3.引起朗伯-比尔定律偏离的主要因素 ③噪声引起的偏离 ● 噪声会直接影响紫外-可见分光光度计的信噪比，降低仪器 的灵敏度 ●噪声限制紫外-可见分光光度计仪器对样品分析浓度的下限 ●噪声的主要来源：仪器的电子学系统
③ 噪声引起的偏离 l 噪声会直接影响紫外-可见分光光度计的信噪比，降低仪器 的灵敏度 l 噪声限制紫外-可见分光光度计仪器对样品分析浓度的下限 l 噪声的主要来源：仪器的电子学系统 3. 引起朗伯-比尔定律偏离的主要因素 四、紫外-可见吸收光谱
四、紫外-可见吸收光谱 3.引起朗伯-比尔定律偏离的主要因素 ④光谱带宽引起的偏离 光谱带宽会直接影响朗伯-比尔定律的偏离 带A 谱B
④ 光谱带宽引起的偏离 光谱带宽会直接影响朗伯-比尔定律的偏离 3. 引起朗伯-比尔定律偏离的主要因素 四、紫外-可见吸收光谱