临床病理资料 154例(88例存档石蜡包埋标本和66例 手术切除新鲜大肠腺癌标本)大肠腺 患者,术前均未接受化疗、放疗及其他 治疗。其中男性78例,女性76例,年龄 在23-85岁之间,平均年龄为497岁
临床病理资料 154例（88例存档石蜡包埋标本和66例 手术切除新鲜大肠腺癌标本）大肠腺癌 患者，术前均未接受化疗、放疗及其他 治疗。其中男性 78例，女性 76例，年龄 在 23-85岁之间，平均年龄为49.7岁
66例新鲜手术切除标本均为大肠腺癌: 分化程度:高分化腺癟30例,中分化腺癌23 例,低分化腺癌13例。 浸润深度:粘膜层10例,粘膜下层0例,肌 层14例,浆膜层37例,外周组织5例。 转移:有淋巴结转移者16例,无淋巴结转 移者50例;有血道转移者1例,无血道转 移者65例;无种植性转移
66例新鲜手术切除标本均为大肠腺癌： 分化程度:高分化腺癌30例，中分化腺癌23 例，低分化腺癌13例。 浸润深度:粘膜层10例，粘膜下层0例，肌 层14例，浆膜层37例，外周组织5例。 转移：有淋巴结转移者16例，无淋巴结转 移者50例；有血道转移者1例，无血道转 移者65例；无种植性转移
88例存档蜡块全部为腺癌: 分化程度:高分化腺癌21例,中分化腺癌18例, 低分化29例和未分化20例; 浸润深度:粘膜层62例,粘膜下层1例,肌层17 例、浆膜层5例,外周组织3例; 转移:有淋巴结转移者14例,无淋巴结转移者74 例;有血道转移者11例,无血道转移者77例; 有种植性转移者10例,无种植性转移者78例
88例存档蜡块全部为腺癌: 分化程度：高分化腺癌21例，中分化腺癌18例， 低分化29例和未分化20例； 浸润深度：粘膜层62例，粘膜下层1例，肌层17 例、浆膜层5例，外周组织3例； 转移：有淋巴结转移者14例，无淋巴结转移者74 例；有血道转移者11例，无血道转移者77例； 有种植性转移者10例，无种植性转移者78例
技术路线 免疫组化(SP法) FCM RT-PCR技术 检测66例大肠腺癌手术切 检测66例大肠腺癌手术切 检测154例大肠腺癌组织 除新鲜组织和相应正常大 除新鲜组织和相应正常大肠 和相应正常食管组织中 肠粘膜手术切除新鲜组织 EphA2蛋白表达 中DNA倍体、细胞周期 粘膜手术切除新鲜组织中 细胞增殖率 EphA2mRNA表达 探讨EphA2表达与大肠腺癌病理临床因素、DNA倍体、细胞周期的关系
技 术 路 线 免疫组化（SP法) FCM RT-PCR技术 检测154例大肠腺癌组织 和相应正常食管组织中 EphA2蛋白表达 检测66例大肠腺癌手术切 除新鲜组织和相应正常大 肠粘膜手术切除新鲜组织 中DNA倍体、细胞周期、 细胞增殖率 探讨EphA2表达与大肠腺癌病理临床因素、DNA倍体、细胞周期的关系 检测66例大肠腺癌手术切 除新鲜组织和相应正常大肠 粘膜手术切除新鲜组织中 EphA2mRNA表达
实验方法 免疫组化 ◆步骤(略) 令对照组设计:以已知EphA2阳性食管鳞癌和正常食管 粘膜腺体组织切片作为阳性对照,用正常兔lsG代替一抗 作为阴性对照,用PBS代替一抗作为空白对照。 心免疫组化结果判定及定量分析:EPhA2免疫组化阳性 表达位于细胞胞浆,呈棕黄色。定量分析采用高清晰图 像处理系统,随机取10个高倍视野进行图像分析,对免 疫组化切片检测FphA2阳性细胞数,依据阳性细胞所占肿 瘤细胞面积的百分比和染色强度判断结果
一. 免疫组化 ❖ 步骤 （略） ❖ 对照组设计：以已知EphA2阳性食管鳞癌和正常食管 粘膜腺体组织切片作为阳性对照，用正常兔IgG代替一抗 作为阴性对照，用PBS代替一抗作为空白对照。 ❖ 免疫组化结果判定及定量分析：EPhA2免疫组化阳性 表达位于细胞胞浆，呈棕黄色。定量分析采用高清晰图 像处理系统，随机取10个高倍视野进行图像分析，对免 疫组化切片检测EphA2阳性细胞数，依据阳性细胞所占肿 瘤细胞面积的百分比和染色强度判断结果。 实 验 方 法