siRNA的生成及作用过程 dsRNA ①经Dicer切割形 Dicer 成双链小片段 siRNA Componshtn RISC ②RISC的形成 siRNA unwinding Activated RISC Association with target mRNA ③效应阶段 Target mRNA cleavage Sense Target mRNA Antisense
①经Dicer切割形 成双链小片段 ②RISC的形成 ③ 效应阶段 siRNA的生成及作用过程
RNAi的放大效应机制 dsRNA siRNAs DICER RISC complexes Target mRNA RdRF DICER Exonucleases Degraded RNA RNAi扩增模型
RNAi扩增模型 RNAi的放大效应机制
3.siRNA的生物学意义 ● 在转录水平、转录后水平参与基因的表 达调控 ·维持基因组的稳定 ·保护基因组免受外源核酸侵入
3.siRNA的生物学意义 • 在转录水平、转录后水平参与基因的表 达调控 • 维持基因组的稳定 • 保护基因组免受外源核酸侵入
4.RNA干扰的应用及前景 1.基因功能的研究 确定目的基因 化学合成 设计sRNA的序列 体外转录 获得SiRNA产物 sRNA表达载体 sRNA转染 RNA表达框架 RNA效果检测
4. RNA干扰的应用及前景 1.基因功能的研究
RNA Pol Il BamHI Sense Strand Loop Antisense Strand Terminate Hind lll 5'GATCCCNNNNNNNNNNNNNNNNNNNTTCAAGAGANNNNNNNNNNNNNNNNNNNTTTTTTGG AAA3 3 GGNNNNNNNNNNNNNNNNNNNAAGTTCTCTNNNNNNNNNNNNNNNNNNNAAAAAACCTTTTCGA 5' Hygro expression 19t Sense strand pSilencer 2.1-U6 hygro Loop (4.4kb 3UU Antisense strand G 6 A