1)常见标记抗体的典光素 荧光素分子 激发光波长发射光波长 (nm) 中文名 (nm) FITC 490 520 异硫氰酸荧光素 PE 488 575 藻红蛋白 PerCp 490 675 多甲藻叶绿素蛋白 APC 650 660 别藻青蛋白 PE-Cy5 496/546 670 藻红蛋白-花青素5 PE-Cy7 496/546 767 藻红蛋白-花青素7 Alexa Flour 488 495 519 Alexa Flour 647650 665 Alexa Flour 350346 442 Alexa Flour 405401 421 Pacific Blue 405 455 Pacific Organ 405 551 Brilliant 407 421 Violet(BV, BUV)348 395-737
17 1） 常见标记抗体的荧光素
能量传递复合染料机制 575nm CY5 488nm 670nm PE CY5 红色荧光 藻红蛋白 CY5 花青素5
PE CY5 CY5 CY5 488nm 575nm 670nm 红色荧光 花青素5 藻红蛋白 能量传递复合染料机制
常用免疫荧光染料组合 荧光染料 激发波长 m)发射波长(m) 颜色 FITC+PE 488 525、575 绿色、橙色 FITC+PeCy5 488 525、675 绿色、红色 FITC+ECD 488 525、625 绿色、橙红色 FITC+PE+PeCy5 488 525、575、675绿色、橙色、红色 FITC+ECD+PeCy5 488525、625、675绿色、橙红色、红色 四色:FTC/PE/ Percp/APC;五色:FITC/PE/PeCy5/PeCy7/APC 六色:FIC/PE/PeCy5/PeCy7/APC/ APC-Cy7 七色:FITC/PE/PeCy5/PeCy7/APC/ APC-Cy7/BV421 At: FITC/PE/Pecy5/ Pe Cy7/APC/APC-Cy7/BV421/BV570
常用免疫荧光染料组合 荧光染料 激发波长 （nm） 发射波长（nm） 颜色 FITC+PE 488 525、575 绿色、橙色 FITC+PeCy5 488 525、675 绿色、红色 FITC+ECD 488 525、625 绿色、橙红色 FITC+PE+PeCy5 488 525、575、675 绿色、橙色、红色 FITC+ECD+PeCy5 488 525、625、675 绿色、橙红色、红色 四色：FITC/PE/Percp/APC；五色： FITC/PE/PeCy5/PeCy7/APC 六色：FITC/PE/PeCy5/PeCy7/APC/APC-Cy7 七色：FITC/PE/PeCy5/PeCy7/APC/APC-Cy7/BV421 八色：FITC/PE/PeCy5/PeCy7/APC/APC-Cy7/BV421/BV570
2)核酸荧光染料 PI(碘化酉啶535,623)可选择性的插入核酸双螺旋碱基对中。 常用于DNA分析,卿要用 RNase处理细胞排除RNA对DNA荧光定量的影 响;P不能透过活细胞膜,常用于鉴定死细胞。 7-AAD(7-氨基放线菌素D545,647)以插入的方式与DNA链的G C碱基对结合,不能透过活细胞膜,常用于鉴定死细胞。 DAPI(4,4,6-二脒基二苯基明哚358,456)可以非嵌入方式与 DNA链上的A_T碱基对特异性结合。变异系教明显小于萁他染料 种理翘的DNA定量染料。 Hoechst(343,450)常见为 Hoechst3332和 hoechst33258,非嵌 入的方式与DNA链上的A-T碱基对结合。能对活细胞棨色,用于活细 胞DNA定量分析,如精子分选;还用于侧群细胞的分选。 PY(派若宁560,573)RNA染料,能进入活细胞。 °A0(吖啶橙509,525)DNA、RNA染料,染色后DNA星黄绿色荧光 ,RNA星橙黄色荧光,可进行DNA/RNA双参数分析
• PI（碘化丙啶 535, 623） 可选择性的插入核酸双螺旋碱基对中。 常用于DNA分析，需要用RNase处理细胞排除RNA对DNA荧光定量的影 响；PI不能透过活细胞膜，常用于鉴定死细胞。 • 7-AAD（7-氨基放线菌素D 545, 647 ） 以插入的方式与DNA链的GC碱基对结合，不能透过活细胞膜，常用于鉴定死细胞。 • DAPI（4,4,6-二脒基二苯基吲哚 358, 456） 可以非嵌入方式与 DNA链上的A-T碱基对特异性结合。变异系数明显小于其他染料，一 种理想的DNA定量染料。 • Hoechst（343, 450）常见为Hoechst33342和Hoechst33258，非嵌 入的方式与DNA链上的A-T碱基对结合。能对活细胞染色，用于活细 胞DNA定量分析，如精子分选；还用于侧群细胞的分选。 • PY（派若宁 560, 573） RNA染料，能进入活细胞。 • AO（吖啶橙 509, 525） DNA、RNA染料，染色后DNA呈黄绿色荧光 ，RNA呈橙黄色荧光，可进行DNA/RNA双参数分析。 2）核酸荧光染料
3)其他常用荧光染料 测量参数 荧光染料激发波长(nm)荧光波长(mm) 报告基因 GFP 475 509 YFP 514 527 细胞示踪染料 CFSE 495 519 FAM 488 525 细胞膜电位 DiO-C6 485 505 Rhodamine 123 511 546 细胞内pH值 SNARF-1 514 587/640 细胞内钙浓度 Fluo3 506 528 Indo-1(low) 361 485 Indo-1(high) 330 405 氧自由基 DCFHDA 505 535
3）其他常用荧光染料 测量参数 荧光染料 激发波长(nm) 荧光波长(nm) 报告基因 GFP 475 509 YFP 514 527 细胞示踪染料 CFSE 495 519 FAM 488 525 细胞膜电位 DiO-C6 485 505 Rhodamine123 511 546 细胞内pH值 SNARF-1 514 587/640 细胞内钙浓度 Fluo3 506 528 Indo-1(low） 361 485 Indo-1(high） 330 405 氧自由基 DCFHDA 505 535