生物大分子波谱学原理 TOCSY C实验及处理 同相谱与COSY等反相谱不同,间接维的点数不必 很大,一般512点足够 混合时间的选择与要求的传递距离有关,传递距离 越长,需要的时间越长,一般短的可取20-30ms, 长的可取100ms左右。要注意:混合脉冲所用的功 率不能太大,尤其混合时间较长的。否则可能损坏 放大器及探头,另外混合脉冲产生的热量将使样品 发热,使得 TOCSY的峰位同其他谱相比发生位移。 由于 TOCSY是同相谱,一般用相移60—90度的正 弦窗函数
TOCSY 生物大分子波谱学原理 吴季辉 C 实验及处理 •同相谱与COSY等反相谱不同，间接维的点数不必 很大，一般512点足够。 •混合时间的选择与要求的传递距离有关，传递距离 越长，需要的时间越长，一般短的可取20-30ms， 长的可取100ms左右。要注意：混合脉冲所用的功 率不能太大，尤其混合时间较长的。否则可能损坏 放大器及探头，另外混合脉冲产生的热量将使样品 发热，使得TOCSY的峰位同其他谱相比发生位移。 •由于TOCSY是同相谱，一般用相移60－90度的正 弦窗函数
生物大分子波谱学原理 TOCSY 0.6 0.4 250 FIGURE 6. 44 Variation of cross-peak intensity as a function of isotropic mixing time for an isoleucine spin system. (a)Cross-peak intensity for transfer from the ho spin with the h spin removed and(b)cross- peak intensity for magnetization transfer from the ' H spin. The curves for the destination spins are ( Ho,(--)H, (-.)HY,(.H2, and(----)'H. The transfer functions were calculated using the following coupling constants: J 10.0 Hz and JH HA=12 Hz. Vicinal couplings to methyl groups were 6.7 Hz, all geminal couplings were -15 Hz, and all other vicinal couplings were 7 Hz. The effect of relaxation during the mixing was not considered
TOCSY 生物大分子波谱学原理 吴季辉
生物大分子波谱学原理 TOCSY D应用 TOCSY可提供整个自旋体系的连接,而且信号强 对于谱峰证认很有用 Y Y 8 YYββ 8 Y Q Eaa E K48 K29 K48 K29 K48 K29 8.07.9 8079 8.079 F2 (ppm) FIGURE 6. 45 Sections of H,0 TOCSY spectra acquired with mixing times of 48 (left),83(center), and 102 ms(right). The cross-peaks observed protons of Lys29 and Lys48 are assigned at the different mixing times. Cross peaks to the spin-system termini are observed only at the longer mixing times
TOCSY 生物大分子波谱学原理 吴季辉 D 应用 TOCSY可提供整个自旋体系的连接，而且信号强， 对于谱峰证认很有用
生物大分子波谱学原理 TOCSY-wagergate (0)-SINE.100(30,di,iso,100) % (0)-sINE,10030,di,iso,10 p19p11p10p1091101091101109110911010p101111 70dB QdB 9dB 9dB 9dB9dB 9dB 9dB9dB9dB 9dB 9dB 9dB 9dB 9dB: 44dB 44dB 预饱和,低功率选择性90脉冲(对准水峰)
TOCSY-wagergate 生物大分子波谱学原理 吴季辉 预饱和， 低功率选择性90脉冲（对准水峰）
生物大分子波谱学原理 TOCSY-doublewagergate (0)-SINE.100(30,di,is,100) (0)SINE.50(13,di,is0,50) (0)SINE.50(1,di,is,50) (0)-SINE.50(45i,i,50) (0) (0)(0) (0) (0):(0) (0)-SINE.50(24,di,iso,50) (0)-SINE.100(30;di,is0,100) 1p19p11p110p110p110p110p110p110p110p1p11:p113 OdB 60dB OdB 9dB9dB 9dB 9dB9dB 9dB9dB 9dB9dB: 44dB: 44dB dl恢复前梯度脉冲清除残留磁化,两个 WATERGATE以改善基线
TOCSY-doublewagergate 生物大分子波谱学原理 吴季辉 d1恢复前梯度脉冲清除残留磁化，两个WATERGATE以改善基线