2）偶联方法： 偶联成功与否取决于： •载体：功能基团：芳香氨基，羧基， 羧甲基等。 •酶分子:侧链非必需基团：羧基，巯 基，羟基，酚基，咪唑基
2）偶联方法： 偶联成功与否取决于： •载体：功能基团：芳香氨基，羧基， 羧甲基等。 •酶分子:侧链非必需基团：羧基，巯 基，羟基，酚基，咪唑基
常用的偶联反应有：重氮化法、 叠氮法、溴化氰法、烷基化法等
常用的偶联反应有：重氮化法、 叠氮法、溴化氰法、烷基化法等
•优点：酶与载体结合牢固，不会轻 易脱落，可连续使用。 •缺点：反应条件较激烈，易影响酶 的空间构象而影响酶的催化活性
•优点：酶与载体结合牢固，不会轻 易脱落，可连续使用。 •缺点：反应条件较激烈，易影响酶 的空间构象而影响酶的催化活性
3.交联法（crosslinking） 借助双功能试剂使酶分子之间发生交 联的固定化方法。 双功能试剂： 常用的是戊二醛 O O H — C — CH2 — CH2 — CH2 — C — H
3.交联法（crosslinking） 借助双功能试剂使酶分子之间发生交 联的固定化方法。 双功能试剂： 常用的是戊二醛 O O H — C — CH2 — CH2 — CH2 — C — H
戊二醛有两个 醛基，均可与酶 或蛋白质的游离 氨基反应,使酶蛋 白交联。 此法与共价偶联法利用的均是共价键， 不同之处：交联法不使用载体
戊二醛有两个 醛基，均可与酶 或蛋白质的游离 氨基反应,使酶蛋 白交联。 此法与共价偶联法利用的均是共价键， 不同之处：交联法不使用载体