T细胞增殖功能测定单向混合淋巴细胞培养5.计算相对反应（RR）（实验组cpm一阴性对照组cpm）RR=阳性对照组cpm一阴性对照组cpm
单向混合淋巴细胞培养 5. 计算相对反应（RR） （实验组cpm－阴性对照组cpm） RR＝ 阳性对照组cpm－阴性对照组cpm T细胞增殖功能测定
T细胞增殖功能测定单向混合淋巴细胞培养注意点1.细胞活力：个使用冷冻细胞时，复苏后应检香细胞活力。2.培养液中添加的血清：有的血清可能会刺激或抑制反应3.本底应小于2000rpm，阳性对照组应大于20000rpm
单向混合淋巴细胞培养 注意点 1. 细胞活力：使用冷冻细胞时，复苏后应检查细 胞活力。 2. 培养液中添加的血清：有的血清可能会刺激或 抑制反应。 3. 本底应小于2000 rpm，阳性对照组应大于20000 rpm。 T细胞增殖功能测定
T细胞增殖功能测定抗原诱导的特异性增殖反应原理本试验测定T细胞在体外对某一特定抗原的特异性免疫应答能力。所用抗原可以是初次接触的抗原，也可以是曾经免疫过的抗原。常用的测定回忆反应的抗原有纯化蛋白衍生物（PPD）和破伤风类毒素（TT）。这2种抗原都被常规列入计划免疫接种范畴，成人应该对它们有回忆反应在某些免疫缺陷病中，对它们的特异性回忆反应可减弱或消失
抗原诱导的特异性增殖反应 原理 本试验测定T细胞在体外对某一特定抗原的特 异性免疫应答能力。所用抗原可以是初次接触的 抗原，也可以是曾经免疫过的抗原。常用的测定 回忆反应的抗原有纯化蛋白衍生物（PPD）和破 伤风类毒素（TT）。这2种抗原都被常规列入计 划免疫接种范畴，成人应该对它们有回忆反应。 在某些免疫缺陷病中，对它们的特异性回忆反应 可减弱或消失。 T细胞增殖功能测定
T细胞增殖功能测定抗原诱导的特异性增殖反应方法（以T细胞对破伤风类毒素刺激的增殖反应为例）1.分离PBMC和APC，APC用丝裂霉素或放射性核素处理。2.96孔板中每孔加入1x105PBMC和1x104APC。3.每孔中加入系列稀释的破伤风类毒素溶液，不同孔中抗原终浓度分别为0、1、5、10和20ug/ml。每一种浓度设3复本。4.37C°，5%CO，6天。5.加3HTdR，继续培养18小时。计数
抗原诱导的特异性增殖反应 方法（以T细胞对破伤风类毒素刺激的增殖反应为 例） 1. 分离PBMC和APC，APC用丝裂霉素或放射性核素 处理。 2. 96孔板中每孔加入1x105 PBMC和1x104 APC。 3. 每孔中加入系列稀释的破伤风类毒素溶液，不同 孔中抗原终浓度分别为0、1、5、10和20µg/ml。 每一种浓度设3复本。 4. 37C° ，5％CO2，6天。 5. 加3HTdR，继续培养18小时。计数。 T细胞增殖功能测定