实验二植物病原菌物的一般形态观察菌物种类、数量繁多,据估计,全世界有菌物150万种,已被描述的约10万种。它所引起的病害约占植物病害的70%,尽管菌物形态差异很大,但基本结构相似,大多数菌物有营养体和繁殖体之分,营养体是指吸收养分的器官,繁殖体是指从营养体上产生的各种类型的孢子。菌物产生抱子的机构,无论是有性的还是无性的,统称为子实体。菌物的抱子分为无性抱子和有性孢子两类。无性孢子有游动孢子、孢囊孢子、分生孢子和厚垣孢子;有性孢子有休眠孢子囊、卵孢子、接合抱子、子囊抱子和担抱子。菌物抱子的形态特征是鉴定和分类学上的重要依据,其营养体及其变态和菌组织体则是菌物分类的重要参考依据,有的还是重要的鉴别特征和分类依据。一、目的要求通过本次实验熟悉菌物的营养体和繁殖体的基本形态,为以后菌物病害的病原物鉴定和菌物分类奠定初步基础。二、仪器和用品显微镜、幻灯机、投影仪、计算机及多媒体教学设备,灭菌培养血、载玻片、盖玻片、浮载剂(蒸馏水和乳酚油)、挑针、镊子、双面刀片、擦镜纸、无菌水等。三、实验材料瓜果腐霉(Pythiumaphanidermatum)马铃薯晚疫病菌(Phytophthorainfestans)立枯丝核菌(Rhizoctoniasolani)苹果树腐烂病菌(Valsamali)小麦白粉病菌(Blumeriagraminis)甘薯软腐病菌(Rhizopusstolonifer)番茄晚疫病菌(Phytophthorainfestans)匍枝根霉(Rhizopusstolonifer)苹果灰斑病菌(Phyllostictapirina)大白菜霜霉病菌(Peronosporaparasitica)山楂白粉病(Podosphaeraoxyacanthae)油菜菌核病菌(Sclerotiumsclerotiorum)玉米丝黑穗病菌(Sphacelothecareiliana)谷子白发病菌(Sclerosporagraminicola)茄黄萎病菌(Verticilliumdahlia)梨褐腐病菌(Moniliniafructigena)黄瓜根腐病菌(Fusariumsolani)以上材料为病害标本或新鲜材料、挂图、病原菌永久玻片、多媒体教学课件、动画等。动画来源:西北农林科技大学植物保护虚拟仿真实验教学中心。6
6 实验二 植物病原菌物的一般形态观察 菌物种类、数量繁多,据估计,全世界有菌物 150 万种,已被描述的约 10 万种。它所引起 的病害约占植物病害的 70%,尽管菌物形态差异很大,但基本结构相似,大多数菌物有营养体和 繁殖体之分,营养体是指吸收养分的器官,繁殖体是指从营养体上产生的各种类型的孢子。菌物 产生孢子的机构,无论是有性的还是无性的,统称为子实体。菌物的孢子分为无性孢子和有性孢 子两类。无性孢子有游动孢子、孢囊孢子、分生孢子和厚垣孢子;有性孢子有休眠孢子囊、卵孢 子、接合孢子、子囊孢子和担孢子。菌物孢子的形态特征是鉴定和分类学上的重要依据,其营养 体及其变态和菌组织体则是菌物分类的重要参考依据,有的还是重要的鉴别特征和分类依据。 一、目的要求 通过本次实验熟悉菌物的营养体和繁殖体的基本形态,为以后菌物病害的病原物鉴定和菌物 分类奠定初步基础。 二、仪器和用品 显微镜、幻灯机、投影仪、计算机及多媒体教学设备,灭菌培养皿、载玻片、盖玻片、浮载 剂(蒸馏水和乳酚油)、挑针、镊子、双面刀片、擦镜纸、无菌水等。 三、实验材料 瓜果腐霉(Pythium aphanidermatum) 马铃薯晚疫病菌(Phytophthora infestans) 立枯丝核菌(Rhizoctonia solani) 苹果树腐烂病菌(Valsa mali) 小麦白粉病菌(Blumeria graminis) 甘薯软腐病菌(Rhizopus stolonifer) 番茄晚疫病菌(Phytophthora infestans) 匍枝根霉(Rhizopus stolonifer) 苹果灰斑病菌(Phyllosticta pirina) 大白菜霜霉病菌(Peronospora parasitica) 山楂白粉病(Podosphaera oxyacanthae) 油菜菌核病菌(Sclerotium sclerotiorum) 玉米丝黑穗病菌(Sphacelotheca reiliana) 谷子白发病菌(Sclerospora graminicola) 茄黄萎病菌(Verticillium dahlia) 梨褐腐病菌(Monilinia fructigena) 黄瓜根腐病菌(Fusarium solani) 以上材料为病害标本或新鲜材料、挂图、病原菌永久玻片、多媒体教学课件、动画等。 动画来源:西北农林科技大学植物保护虚拟仿真实验教学中心
四、实验内容及方法(一)菌丝和菌丝体除少数原始的类群以外,菌物典型的营养体是极为细小的丝状体,这种丝状体称为菌丝,生长成丛的菌丝称为菌丝体,低等菌物的菌丝是无隔的,大多数菌物是有隔菌丝。1.挑取马铃薯晚疫病菌或瓜果腐霉病菌,镜检无隔菌丝。2.挑取立枯丝核菌制片镜检有隔菌丝。3.观察各种病原菌物在平面和斜面培养基上形成的菌落,注意菌落大小、形状、厚薄、质地、颜色等形态特点。多媒体课件播放小麦白粉病菌菌丝生长过程。(二)菌丝组织体有些菌物的菌丝体,在一定的条件下或一定的发育阶段,可形成特殊的组织体,常见有菌核、子座和根状菌索。1.菌核:菌核是由拟薄壁组织和疏丝组织形成的一种休眠体,既是菌物贮藏养分的器官,又是菌物用以度过不良环境的休眠机构,菌核大小不一,色泽和形状也各不相同。菌核中的菌丝组织已有分化现象,外皮组织细胞排列紧密,色深壁厚,具有保护作用,为拟薄壁组织:内层细胞壁薄色淡,排列疏松,仍可维持营养作用,为疏丝组织。肉眼观察油菜菌核病、黄瓜菌核病标本,比较菌核形状、大小、颜色。镜检油菜菌核病菌菌核永久玻片,比较菌核外部组织和内部组织菌丝细胞的形状、大小及排列情况。2.子座:子座是由拟薄壁组织和疏丝组织形成的容纳子实体的座垫状结构,或由菌丝体与部分寄主组织结合而成的称为假子座。子座是菌物从营养体到紧殖体的过渡机构,除可在其上或其内形成子实体外,也有度过不良环境的作用。镜检苹果树腐烂病菌子座永久玻片。3.根状菌索:少数高等菌物的菌丝体还可纠结成绳索状的组织体,形如高等植物的根,故称根状菌索,其作用是帮助菌体蔓延和抵抗不良环境,根状菌索组织也有表皮和内部组织的分化。观察幻灯片上的根状菌索。(三)菌丝的变态结构1.吸器:是寄生在细胞间的菌物,特别是一些专性寄生菌在菌丝体上形成的吸收养分的器官,形状有球状、丝状、掌状、裂片状等。镜检小麦白粉病菌吸器永久玻片,注意吸器的形状及其形成的部位。多媒体课件播放白粉病菌吸器形成过程的动画。2.假根:为伸入基物内的菌丝体,形如高等植物的根系,故称假根。假根除用其吸收养分外,还有固着菌体的作用。镜检根霉菌假根永久玻片,注意假根与普通营养菌丝的区别。3.附着胞:从幻灯片或照片观察病菌侵染寄主植物形成附着胞的形态。多媒体课件播放白粉病菌附着胞形成过程的动画。4.菌环和菌网:捕食性菌物常由菌丝分化成菌环和菌网组织来捕捉线虫等小动物,然后再由菌丝侵入线虫体内吸取营养。(四)菌物的繁殖体孢子7
7 四、实验内容及方法 (一)菌丝和菌丝体 除少数原始的类群以外,菌物典型的营养体是极为细小的丝状体,这种丝状体称为菌丝,生 长成丛的菌丝称为菌丝体,低等菌物的菌丝是无隔的,大多数菌物是有隔菌丝。 1. 挑取马铃薯晚疫病菌或瓜果腐霉病菌,镜检无隔菌丝。 2. 挑取立枯丝核菌制片镜检有隔菌丝。 3. 观察各种病原菌物在平面和斜面培养基上形成的菌落,注意菌落大小、形状、厚薄、质地、 颜色等形态特点。多媒体课件播放小麦白粉病菌菌丝生长过程。 (二)菌丝组织体 有些菌物的菌丝体,在一定的条件下或一定的发育阶段,可形成特殊的组织体,常见有菌核、 子座和根状菌索。 1. 菌核:菌核是由拟薄壁组织和疏丝组织形成的一种休眠体,既是菌物贮藏养分的器官,又 是菌物用以度过不良环境的休眠机构,菌核大小不一,色泽和形状也各不相同。菌核中的菌丝组 织已有分化现象,外皮组织细胞排列紧密,色深壁厚,具有保护作用,为拟薄壁组织;内层细胞 壁薄色淡,排列疏松,仍可维持营养作用,为疏丝组织。肉眼观察油菜菌核病、黄瓜菌核病标本, 比较菌核形状、大小、颜色。镜检油菜菌核病菌菌核永久玻片,比较菌核外部组织和内部组织菌 丝细胞的形状、大小及排列情况。 2. 子座:子座是由拟薄壁组织和疏丝组织形成的容纳子实体的座垫状结构,或由菌丝体与部 分寄主组织结合而成的称为假子座。子座是菌物从营养体到繁殖体的过渡机构,除可在其上或其 内形成子实体外,也有度过不良环境的作用。镜检苹果树腐烂病菌子座永久玻片。 3. 根状菌索:少数高等菌物的菌丝体还可纠结成绳索状的组织体,形如高等植物的根,故称 根状菌索,其作用是帮助菌体蔓延和抵抗不良环境,根状菌索组织也有表皮和内部组织的分化。 观察幻灯片上的根状菌索。 (三)菌丝的变态结构 1. 吸器:是寄生在细胞间的菌物,特别是一些专性寄生菌在菌丝体上形成的吸收养分的器官, 形状有球状、丝状、掌状、裂片状等。镜检小麦白粉病菌吸器永久玻片,注意吸器的形状及其形 成的部位。多媒体课件播放白粉病菌吸器形成过程的动画。 2. 假根:为伸入基物内的菌丝体,形如高等植物的根系,故称假根。假根除用其吸收养分外, 还有固着菌体的作用。镜检根霉菌假根永久玻片,注意假根与普通营养菌丝的区别。 3. 附着胞:从幻灯片或照片观察病菌侵染寄主植物形成附着胞的形态。多媒体课件播放白粉 病菌附着胞形成过程的动画。 4. 菌环和菌网:捕食性菌物常由菌丝分化成菌环和菌网组织来捕捉线虫等小动物,然后再由 菌丝侵入线虫体内吸取营养。 (四)菌物的繁殖体——孢子
菌物的紧殖方式分无性和有性两种,分别产生无性抱子和有性抱子两大类型。菌物的无性累殖包括断裂、出芽和产生孢子等,菌物的有性生殖包括质配、核配和减数分裂三个阶段。1.无性孢子:不经过性细胞或性器官的结合便能产生孢子,称为无性孢子。菌物产生的无性孢子类型很多,主要的有游动孢子、孢囊孢子、分生孢子和厚垣孢子。(1)游动孢子:游动孢子是根肿菌、卵菌和壶菌的无性孢子,产生在由菌丝顶端细胞或由菌丝分化成的孢子囊梗的顶端细胞膨大形成的孢子囊内、具鞭毛,能游动。镜检番茄晚疫病菌的游动抱囊梗、游动抱子囊和游动抱子的永久玻片。(2)孢囊孢子:孢囊孢子是接合菌的无性孢子,生成方式和游动孢子相似,也是内生的,但无鞭毛,不能游动。镜检黑根霉的孢子囊梗,孢子囊和孢囊孢子的永久玻片。(3)分生孢子:分生孢子是子囊菌、半知菌和担子菌的无性孢子,分生孢子外生在分生孢子梗上,形状、大小、颜色不一,单生、链生或集生,分生抱子梗有的散生,有的束生,有的产生在分生子盘上或分生孢子器内。镜检分生孢子永久玻片。(4)厚垣抱子:菌丝中或孢子中个别细胞膨大、细胞壁加厚的孢子即厚垣孢子。镜检厚垣孢子的永久玻片。2.有性孢子:由两个不同的性细胞或性器官相结合而产生的孢子叫有性孢子,有性孢子主要有以下4种(1)卵孢子:主要由雄器和藏卵器交配形成,如卵菌的有性抱子。镜检谷子白发病菌的卵孢子或大白菜霜霉病菌卵孢子永久玻片,注意卵孢子形状、大小、颜色,孢壁形态。(2)接合孢子:是接合菌的有性孢子,由配子囊配合方式产生。镜检毛霉接合孢子永久玻片,注意接合孢子的大小,形状颜色及表现特点。(3)子囊抱子:是子囊菌的有性孢抱子,由两个异形配子囊交配生成,子囊孢子产生在子囊内,多为8个,子囊除极少数子囊菌裸生外,多数子囊菌生于子囊果中。镜检小麦白粉病菌永久玻片,注意观察闭囊壳,子囊、子囊孢子的形态,镜检油菜菌核病菌永久玻片,注意子囊盘、子囊和子囊孢子形态特点。(4)担孢子:是担子菌的有性孢子,由菌丝结合后减数分裂而成,外生于担子或先菌丝上。镜检玉米丝黑穗病菌永久玻片,观察冬孢子、先菌丝及担孢子的形态特点。五、作业1.绘有隔菌丝,无隔菌丝剖面图。2.绘分生孢子、孢囊孢子、卵孢子及子囊孢子的形态图,六、思考题1.菌丝有无隔膜是否反映一定的进化关系?2.举例说明菌丝变态结构的作用是什么?8
8 菌物的繁殖方式分无性和有性两种,分别产生无性孢子和有性孢子两大类型。菌物的无性繁 殖包括断裂、出芽和产生孢子等,菌物的有性生殖包括质配、核配和减数分裂三个阶段。 1. 无性孢子:不经过性细胞或性器官的结合便能产生孢子,称为无性孢子。菌物产生的无性 孢子类型很多,主要的有游动孢子、孢囊孢子、分生孢子和厚垣孢子。 (1)游动孢子:游动孢子是根肿菌、卵菌和壶菌的无性孢子,产生在由菌丝顶端细胞或由 菌丝分化成的孢子囊梗的顶端细胞膨大形成的孢子囊内、具鞭毛,能游动。镜检番茄晚疫病菌的 游动孢囊梗、游动孢子囊和游动孢子的永久玻片。 (2)孢囊孢子:孢囊孢子是接合菌的无性孢子,生成方式和游动孢子相似,也是内生的, 但无鞭毛,不能游动。镜检黑根霉的孢子囊梗,孢子囊和孢囊孢子的永久玻片。 (3)分生孢子:分生孢子是子囊菌、半知菌和担子菌的无性孢子,分生孢子外生在分生孢 子梗上,形状、大小、颜色不一,单生、链生或集生,分生孢子梗有的散生,有的束生,有的产 生在分生孢子盘上或分生孢子器内。镜检分生孢子永久玻片。 (4)厚垣孢子:菌丝中或孢子中个别细胞膨大、细胞壁加厚的孢子即厚垣孢子。镜检厚垣 孢子的永久玻片。 2. 有性孢子:由两个不同的性细胞或性器官相结合而产生的孢子叫有性孢子,有性孢子主要 有以下 4 种 (1)卵孢子:主要由雄器和藏卵器交配形成,如卵菌的有性孢子。镜检谷子白发病菌的卵 孢子或大白菜霜霉病菌卵孢子永久玻片,注意卵孢子形状、大小、颜色,孢壁形态。 (2)接合孢子:是接合菌的有性孢子,由配子囊配合方式产生。镜检毛霉接合孢子永久玻 片,注意接合孢子的大小,形状颜色及表现特点。 (3)子囊孢子:是子囊菌的有性孢子,由两个异形配子囊交配生成,子囊孢子产生在子囊 内,多为 8 个,子囊除极少数子囊菌裸生外,多数子囊菌生于子囊果中。镜检小麦白粉病菌永久 玻片,注意观察闭囊壳,子囊、子囊孢子的形态,镜检油菜菌核病菌永久玻片,注意子囊盘、子 囊和子囊孢子形态特点。 (4)担孢子:是担子菌的有性孢子,由菌丝结合后减数分裂而成,外生于担子或先菌丝上。 镜检玉米丝黑穗病菌永久玻片,观察冬孢子、先菌丝及担孢子的形态特点。 五、作业 1. 绘有隔菌丝,无隔菌丝剖面图。 2. 绘分生孢子、孢囊孢子、卵孢子及子囊孢子的形态图。 六、思考题 1. 菌丝有无隔膜是否反映一定的进化关系? 2. 举例说明菌丝变态结构的作用是什么?
实验二参考图片:图2-1菌物菌丝形态图2-2菌物菌丝组织图2-3菌物吸器类型a.无隔菌丝b.有隔菌丝1.疏丝组织2.拟薄壁组织1.白锈菌2.霜霉菌3.4.白粉菌5.锈菌阳大国您桃业调山脑维分机形点周环排构,用子AK线:菌环购点的用微装网图2-4根霉菌的假根图2-5附着胞图2-6菌环和菌网务图2-7菌物的无性孢子图2-8菌物的有性孢子A游动孢子B孢囊孢子C、D分生孢子E厚垣孢子1卵孢子2接合孢子3.子囊孢子4.担孢子C
9 实验二参考图片: 图 2-1 菌物菌丝形态 a.无隔菌丝 b.有隔菌丝 图 2-2 菌物菌丝组织 1.疏丝组织 2.拟薄壁组织 图 2-3 菌物吸器类型 1.白锈菌 2.霜霉菌 3.4.白粉菌 5.锈菌 图 2-4 根霉菌的假根 图 2-5 附着胞 图 2-6 菌环和菌网 图 2-7 菌物的无性孢子 A 游动孢子 B 孢囊孢子 C、D 分生孢子 E 厚垣孢子 图 2-8 菌物的有性孢子 1 卵孢子 2 接合孢子 3.子囊孢子 4.担孢子
实验三鞭毛菌和接合菌门菌物形态观察鞭毛菌是一类形态相似,但进化地位各不相同的一群低等菌类,其中不少是水生的,在新的分类系统中,它们则分属于原生生物界、真菌界和藻物界。但是它们的共同特征是无性繁殖时产生有鞭毛的游动孢子,故称为“鞭毛菌”能引起植物病害的鞭毛菌主要分布在原质菌门、卵菌门和壶菌门。接合菌门菌物大多是腐生,少数可引起农产品的腐烂,或者寄生在动物或昆虫体内。接合菌的共同特征是有性生殖产生接合孢子。一、目的要求了解鞭毛菌和接合菌门菌物的主要形态特征,掌握与园艺植物病害有关的重要属的形态特征及所致病害的症状特点,为病害诊断打下初步基础。二、仪器和用品显微镜、幻灯机、投影仪、计算机及多媒体教学设备;蒸馏水、吸水纸、解剖刀、挑针、镊子、纱布、刀片、通草、酒精灯、无菌水等。三、实验材料芸蔓根肿菌(Plasmodiophorabrassicae)马铃薯粉痴菌(Spongosporasubterranea)玉蜀泰节壶菌(Physodermamaydis)瓜果腐霉(Pythiumaphanidermatum)致病疫霉(Phytophthorainfestans)葡萄霜霉病(Plasmoparaviticola)十字花科霜霉病(Peronosporaparaditica)大豆霜霉病(Peronosporamanschurica)黄瓜霜霉病(Pseudoperonosporacupensis)莴苣霜霜霉病(Bremialacrucae)十字花科白锈病(Albugocandida)匍枝根霉(Rhizopusstolonifer)准备以上病害标本、新鲜材料、挂图、永久玻片、多媒体教学课件等。四、实验内容及方法(一)根肿菌纲(Plasmodiophoromycetes)根肿菌纲的分类地位,至今意见还不一致,该纲菌物为数不多,只有一个目,根肿菌目(Plasmodiophorales)。根肿菌的特点是营养体为无细胞壁的原质团;有性繁殖整个原生质团形成大量散生或成堆的厚壁休眠孢子(休眠孢子囊):无性繁殖也由原生质团形成薄壁的游动孢子囊其中产生前端具有两根长短不等尾鞭的游动孢子,根肿菌都是植物细胞内的专性寄生菌,具有明显的水生习性,常引起植物根部产生刺激性病变,形成膨肿状,其越冬和传播与土壤关系密切,10
10 实验三 鞭毛菌和接合菌门菌物形态观察 鞭毛菌是一类形态相似,但进化地位各不相同的一群低等菌类,其中不少是水生的,在新的 分类系统中,它们则分属于原生生物界、真菌界和藻物界。但是它们的共同特征是无性繁殖时产 生有鞭毛的游动孢子,故称为“鞭毛菌”能引起植物病害的鞭毛菌主要分布在原质菌门、卵菌门 和壶菌门。 接合菌门菌物大多是腐生,少数可引起农产品的腐烂,或者寄生在动物或昆虫体内。接合菌 的共同特征是有性生殖产生接合孢子。 一、目的要求 了解鞭毛菌和接合菌门菌物的主要形态特征,掌握与园艺植物病害有关的重要属的形态特征 及所致病害的症状特点,为病害诊断打下初步基础。 二、仪器和用品 显微镜、幻灯机、投影仪、计算机及多媒体教学设备;蒸馏水、吸水纸、解剖刀、挑针、镊 子、纱布、刀片、通草、酒精灯、无菌水等。 三、实验材料 芸薹根肿菌(Plasmodiophora brassicae) 马铃薯粉痂菌(Spongospora subterranea) 玉蜀黍节壶菌(Physoderma maydis) 瓜果腐霉(Pythium aphanidermatum) 致病疫霉(Phytophthora infestans) 葡萄霜霉病(Plasmopara viticola) 十字花科霜霉病(Peronospora paraditica) 大豆霜霉病(Peronospora manschurica) 黄瓜霜霉病(Pseudoperonospora cupensis) 莴苣霜霜霉病(Bremia lacrucae) 十字花科白锈病(Albugo candida) 匍枝根霉(Rhizopus stolonifer) 准备以上病害标本、新鲜材料、挂图、永久玻片、多媒体教学课件等。 四、实验内容及方法 (一)根肿菌纲(Plasmodiophoromycetes) 根肿菌纲的分类地位,至今意见还不一致,该纲菌物为数不多,只有一个目,根肿菌目 (Plasmodiophorales)。根肿菌的特点是营养体为无细胞壁的原质团;有性繁殖整个原生质团形 成大量散生或成堆的厚壁休眠孢子(休眠孢子囊);无性繁殖也由原生质团形成薄壁的游动孢子囊, 其中产生前端具有两根长短不等尾鞭的游动孢子,根肿菌都是植物细胞内的专性寄生菌,具有明 显的水生习性,常引起植物根部产生刺激性病变,形成膨肿状,其越冬和传播与土壤关系密切