(二)印渍救术 Northerm blotting 又称为 Northern条交,即①分。 是一种牾从琼脂糖凝胶中转即到硝酸纤维 橐隙上的亦法。 n要用导检测基一组织或细胞中巳知的特异 mRM的水平以灰比较不同组织和细胞的 同一基囡的曠觊
(二)RNA印渍技术 Northern blotting ▪ 又称为Northern杂交,即RNA-DNA杂交分析。 是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维 素膜上的方法。 ▪ 主要用于检测某一组织或细胞中已知的特异 mRNA的表达水平以及比较不同组织和细胞的 同一基因的表达情况
(三)白质印敦术 Western blotting 又称为化sm泰交,或即溃术, 即利用抗原抗体反应,检测转彩到臂 酸纤维橐隴上的特异帐蛋白质。 应用:用导检测葶品中特异蛋质 的存在、细胞中特异蛋质的半定量 分析以蛋白质分子的相互作用研究
(三)蛋白质印渍技术 Western blotting ▪ 又称为Western杂交,或免疫印渍技术, 即利用抗原-抗体反应,检测转移到硝 酸纤维素膜上的特异性蛋白质。 ▪ 应用:用于检测样品中特异性蛋白质 的存在、细胞中特异蛋白质的半定量 分析以及蛋白质分子的相互作用研究 等
限制性内切酶 RNA样品 酶切DNA溶液 蛋白样品 电泳转移↓杂交 转移到NC膜后与 转移到NC膜或尼龙膜转移到№C膜或FVDF 标记探针杂交 后与标记探针杂交 膜后与抗体反应 种印迹技术的 放或 射化 自学 显显 影色 DNA印迹 RNA印迹 蛋白印迹
三种印迹技术的比较
(~)①N即迹技木( Southern blotting 用导基因组⑩MA、重组质粒和噬菌体的 分析。 (二)只印迹救术( orthen blotting 用R的定咝定量分析。 (三)自质的即迹分析( Western blottin 用导蛋白质定啦定量况粗互作用研究
(一)DNA印迹技术(Southern blotting) 用于基因组DNA、重组质粒和噬菌体的 分析。 (二)RNA印迹技术(Northern blotting) 用于RNA的定性定量分析。 (三)蛋白质的印迹分析 (Western blotting) 用于蛋白质定性定量及相互作用研究
京印迹 Dot blotting 爽点条交法是不经电哪,而将被检标 本直接京到膘上,烍烤固定,用于条交。 这种亦法耗时短,可散半定量分析 張隙上可同时检测多个梯品
斑点印迹 Dot blotting ▪ 斑点杂交法是不经过电泳,而将被检标 本直接点到膜上,烘烤固定,用于杂交。 这种方法耗时短,可做半定量分析,一 张膜上可同时检测多个样品