第二章 分子克隆载体 2001年10月1
第二章 分子克隆载体 2001年10月17日
分子克隆载体是一类可供外源DNA插入并携 带重组DNA分子进入适当宿主细胞的DNA分子 本章主要讲授内容 分子克隆载体的特点;分子克隆载体的种类 大肠杆菌分子克隆载体;细菌和链霉菌的分子克隆载 体;真菌分子克隆载体;植物克隆载体; 动物分子克隆载体; 克隆载体的选择;克隆载体的组建
分子克隆载体是一类可供外源DNA插入并携 带重组DNA分子进入适当宿主细胞的DNA分子。 本章主要讲授内容： 分子克隆载体的特点; 分子克隆载体的种类; 大肠杆菌分子克隆载体; 细菌和链霉菌的分子克隆载 体；真菌分子克隆载体；植物克隆载体； 动物分子克隆载体； 克隆载体的选择；克隆载体的组建
第一节 分子克隆载体的特点
第一节 分子克隆载体的特点
发展概况 第一阶段(197年前):天然质粒和重组质粒的 利用,如pSC101,coE1,pCR,pBR313和pBR322 (1977, Bolivar et al) 2.第二阶段:增大载体容量(降低载体长度),建 立多克隆位点区和新的遗传标记基因。如pUC系列 载体。 3.第三阶段:进一步完善载体功能以满足基因工程克 隆中的不同要求,如M13mp系列载体,含T3,17, sp6启动子载体,表达型载体及各种探针型载体
一、发展概况 1. 第一阶段（1977年前）：天然质粒和重组质粒的 利用，如pSC101, colE1, pCR, pBR313和pBR322 (1977, Bolivar et al) 2. 第二阶段：增大载体容量（降低载体长度），建 立多克隆位点区和新的遗传标记基因。如pUC系列 载体。 3.第三阶段：进一步完善载体功能以满足基因工程克 隆中的不同要求，如M13mp系列载体，含T3，T7， sp6启动子载体，表达型载体及各种探针型载体
载体特点 1.至少有一个复制起点,因而至少可在一种生物 体中自主复制。 2.至少应有一个克隆位点,以供外源DNA插入。 3.至少应有一个遗传标记基因,以指示载体或重 组DNA分子是否进入宿主细胞 ECoRI HindIII BamhI 大肠杆菌载体 Sall pBR322结构图 pB322 (4.36kb) or
二、载体特点 1. 至少有一个复制起点，因而至少可在一种生物 体中自主复制。 2. 至少应有一个克隆位点，以供外源DNA插入。 3. 至少应有一个遗传标记基因，以指示载体或重 组DNA分子是否进入宿主细胞 pBR322 BamHI SalI HindIII PstI ScaI Ampr ori (4.36 kb) 大肠杆菌载体 pBR322结构图