1.命名与分类 取微生物属名的第一个宇母和种名的头 两个宇母组成三个斜体宇母如以表示,遇有 株名,再如在后面如果同一菌株先后发现几 个不同的酶,则用罗马数宇如以表示 EcoRI E:表示大肠杆菌属名第一个字母 C0:表示种名头两个字母 R:表示株名 :表示该菌中第一个被分离出来的酶
1. 命名与分类 取微生物属名的第一个字母和种名的头 两个字母组成三个斜体字母加以表示,遇有 株名,再加在后面.如果同一菌株先后发现几 个不同的酶,则用罗马数字加以表示. EcoRI E: 表示大肠杆菌属名第一个字母 Co: 表示种名头两个字母 R:表示株名 I:表示该菌中第一个被分离出来的酶
根据限制酶识别和切割DNA的特点,可将限 制酶分为:I、Ⅲ三种类型 I型和Ⅱ型限制酶无切割特异性或特异性不强 Ⅱ型限制酶切割位点位于识别位点之内或在附 近,特异性景强. 2.限制性核酸内切酶的基本特性 识别序列通常由4~8个碱基对组成,具有二重 旋转对称轴,序列呈回文结构 (palindromic structure). 所有限制酶切割DNA后,均产生含5'鳞酸基和 3羟基的末端
根据限制酶识别和切割DNA的特点,可将限 制酶分为:I、II、III三种类型 I型和III型限制酶无切割特异性或特异性不强. II型限制酶切割位点位于识别位点之内或在附 近,特异性最强. 2. 限制性核酸内切酶的基本特性 识别序列通常由4~8个碱基对组成,具有二重 旋转对称轴,序列呈回文结构 (palindromic structure). 所有限制酶切割DNA后,均产生含5磷酸基和 3羟基的末端
Hind III的识别序列:5-AAGCTT-3 3-TTCGAA-5 t 5-A AGCTT-3 3-TTCGA A-5 切割后形成具有粘性末端(cohesive end) 的DNA片段 限制性酶不在识别序列的对称轴上切割,而 是交错切制结果形成5'或3'单链突出的粘性末 端的DNA限制片段。 二个具有互相匹配的粘性末端的DNA片段可 以通过碱基的互补及DNA连接酶的作用而重新 连接起来
Hind III的识别序列:5`-A A G C T T-3` 3`-T T C G A A-5` 5`-A A G C T T-3` 3`-T T C G A A-5` 切割后形成具有粘性末端(cohesive end) 的DNA片段 限制性酶不在识别序列的对称轴上切割,而 是交错切割结果形成5或3单链突出的粘性末 端的DNA限制片段。 二个具有互相匹配的粘性末端的DNA片段可 以通过碱基的互补及DNA连接酶的作用而重新 连接起来
Hpl的识别序列: 5-GTTAAC-3 3-CAATTG-5 5-GTT AAC-3 3-CAA TTG-5 切割后形成具有平末端(blunt end)的DNA片段: 限制酶在识别序列的对称轴上切割,形成的 DNA片段没有突出的单链, 具有平末端的DNA片段也可以在DNA连接酶的 作用连接起来
HpaI的识别序列: 5` - G T T A A C - 3` 3` - C A A T T G - 5` 5` - G T T A A C - 3` 3` - C A A T T G - 5` 切割后形成具有平末端(blunt end)的DNA片段: 限制酶在识别序列的对称轴上切割,形成的 DNA片段没有突出的单链. 具有平末端的DNA片段也可以在DNA连接酶的 作用连接起来
不同的限制性核酸内切酶识别DNA中的碱 基对序列长短不同在随机排列的DNA序列中, 识别位点序列长的限制酶,在酶切后所得到的 DNA片段长,相反识别位点序列短的限制酶,酶 切后所得到DNA片段短。 3.同裂酶(Isoschizomers 有些来源不同的限制酶却识别和切制相 同的序列,这类限制酶称为同裂酶.同裂酶产 生同样切割,形成同样的末端,酶切后所得到 的DNA片段经连接后所形成重组序列,仍可能 被原来的限制酶所切割同裂酶的反应条件可 能存在差异
不同的限制性核酸内切酶识别DNA中的碱 基对序列长短不同.在随机排列的DNA序列中, 识别位点序列长的限制酶,在酶切后所得到的 DNA片段长,相反识别位点序列短的限制酶,酶 切后所得到DNA片段短。 3. 同裂酶(Isoschizomers) 有些来源不同的限制酶却识别和切割相 同的序列,这类限制酶称为同裂酶.同裂酶产 生同样切割,形成同样的末端,酶切后所得到 的DNA片段经连接后所形成重组序列,仍可能 被原来的限制酶所切割.同裂酶的反应条件可 能存在差异