核酸内切酶切开二聚 体的5’末端,形成3’- OH和5’-P的单链缺口 核酸外切酶从5’-P到 3’-OH方向切除二聚 体,并扩大缺口 DNA聚合酶以另一 条互补链为模板,从 原有链上暴露的3’- OH 端起合成缺失片 段 连接酶将新合成链的3’- OH与原链的5’-P相连接
核酸内切酶切开二聚 体的5’末端,形成3’- OH和5’-P的单链缺口 核酸外切酶从5’-P到 3’-OH方向切除二聚 体,并扩大缺口 DNA聚合酶以另一 条互补链为模板,从 原有链上暴露的3’- OH 端起合成缺失片 段 连接酶将新合成链的3’- OH与原链的5’-P相连接
紫外诱变的特点 • 方便、诱变效果很好的常用诱变剂 • 在红光下操作或暗培养 • 参数:紫外灯功率、工作距离、照射时间
紫外诱变的特点 • 方便、诱变效果很好的常用诱变剂 • 在红光下操作或暗培养 • 参数:紫外灯功率、工作距离、照射时间
4.2.2 5-溴尿嘧啶诱变——碱基类似物 机理: 与碱基的结构类似, 在DNA复制时,它们 可以被错误地掺入 DNA,引起诱变效应 酮式的5-BU结构与胸腺 嘧啶相似 ,与A配对 5-BU很容易进行酮式与 烯醇式结构的互变异构 烯醇式5-BU不与A而与G配对 A:T→G:C 参数:浓度、时间、缓冲液
4.2.2 5-溴尿嘧啶诱变——碱基类似物 机理: 与碱基的结构类似, 在DNA复制时,它们 可以被错误地掺入 DNA,引起诱变效应 酮式的5-BU结构与胸腺 嘧啶相似 ,与A配对 5-BU很容易进行酮式与 烯醇式结构的互变异构 烯醇式5-BU不与A而与G配对 A:T→G:C 参数:浓度、时间、缓冲液
诱变育种的基本过程如下: 在诱变处理前,一般应预先做诱变剂用量对菌体 死亡数量的致死曲线,选择合适的处理剂量。 合适诱变剂量的选择
诱变育种的基本过程如下: 在诱变处理前,一般应预先做诱变剂用量对菌体 死亡数量的致死曲线,选择合适的处理剂量。 合适诱变剂量的选择
• 出发菌株的选择 一是考虑出发菌株是否具有特定生产性状的能力或 潜力,即菌株是否具有产生特定代谢产物的催化酶 系的基因。 •自然界直接分离到的野生型菌株 •经历过生产条件考验的菌株 •已经历多次育种处理的菌株 菌株来源 其次是出发菌株最好已具备一些有利的性状,如生 长速度快、营养要求低和产孢子早而多的菌株
• 出发菌株的选择 一是考虑出发菌株是否具有特定生产性状的能力或 潜力,即菌株是否具有产生特定代谢产物的催化酶 系的基因。 •自然界直接分离到的野生型菌株 •经历过生产条件考验的菌株 •已经历多次育种处理的菌株 菌株来源 其次是出发菌株最好已具备一些有利的性状,如生 长速度快、营养要求低和产孢子早而多的菌株