○二、抗体酶的催化作用机理 ○1、过渡态理论与抗体酶 ●2、抗体酶催化的三种重要反应机制 水解作用机制 基团转移 连续反应机制 ●3、抗体酶催化反应的介质效应 0 酯解反应中介质效应：抗体酶在有机溶 剂中具稳定性。 。脱羧反应中介质效应；有机溶剂引起脱 羧反应速率增加。 酰基转移反应中介质效应：在疏水溶剂 中，活性较高
⚫二、抗体酶的催化作用机理 ⚫1、过渡态理论与抗体酶 ⚫2、抗体酶催化的三种重要反应机制 ⚫ 水解作用机制 ⚫ 基团转移 ⚫ 连续反应机制 ⚫3、抗体酶催化反应的介质效应 ⚫ 酯解反应中介质效应 ： 抗体酶在有机溶 剂中具稳定性。 ⚫ 脱羧反应中介质效应 ；有机溶剂引起脱 羧反应速率增加。 ⚫ 酰基转移反应中介质效应 ：在疏水溶剂 中，活性较高
三、抗体酶的催化反应类型 。1、转酰基反应 ●2、水解反应 ●3、Claisen重排反应 ●4、酰胺合成反应 ●5 Diels-.Alder反应 6、转酯反应 7、光诱导反应 ●8、氧化还原反应 ●9、脱羧反应 ●10、顺反异构化反应
三、抗体酶的催化反应类型 ⚫1、转酰基反应 ⚫2、水解反应 ⚫3、Claisen重排反应 ⚫4、酰胺合成反应 ⚫5 Diels-Alder反应 ⚫6、转酯反应 ⚫7、光诱导反应 ⚫8、氧化还原反应 ⚫9、脱羧反应 ⚫10、顺反异构化反应
四、抗体酶的制备 ○1、细胞融合法：用设计好的半抗原，通 过间隔链与载体蛋白（如牛血清白蛋白） 偶联制成抗原。然后对此抗原进行兔疫， 使宿主有机体针对抗原产生抗体，产生抗 体的脾脏细胞与骨髓细胞相融合。融合得 到的杂交细胞既能产生抗体又能在体外培 养。将杂交体克隆化，即能产生单一均匀 的抗体
四、抗体酶的制备 ⚫1、细胞融合法：用设计好的半抗原，通 过间隔链与载体蛋白（如牛血清白蛋白） 偶联制成抗原。然后对此抗原进行免疫， 使宿主有机体针对抗原产生抗体，产生抗 体的脾脏细胞与骨髓细胞相融合。融合得 到的杂交细胞既能产生抗体又能在体外培 养。将杂交体克隆化，即能产生单一均匀 的抗体
2、抗体结合位点化学修饰法：抗 体酶和酶一样也可以用化学修饰 法加以改造。对抗体酶进行结构 修饰的关键是找到一种温和的方 法在抗体结合位置或附近引入具 有催化功能的基因。游离巯基就 是适合的基团之一，它具有高亲 核性，易于氧化，及能通过二硫 化物进行交换反应或亲电反应而 选择性修饰的特点
2、抗体结合位点化学修饰法：抗 体酶和酶一样也可以用化学修饰 法加以改造。对抗体酶进行结构 修饰的关键是找到一种温和的方 法在抗体结合位置或附近引入具 有催化功能的基因。游离巯基就 是适合的基团之一，它具有高亲 核性，易于氧化，及能通过二硫 化物进行交换反应或亲电反应而 选择性修饰的特点