注射。 豚鼠:注射部位可选用大腿内侧面、背部、肩部等皮下脂肪少的部位。通常为 大腿内侧面注射。一般需两人合作,一人固定豚鼠,一人进行注射。 猫:将臀部皮肤拉起,将注射针刺入皮肤与肌肉之间,注入药液。 犬:将犬的颈部或背部皮肤拉起,注射针刺入皮下进行注射。 (2)皮内注射法: 先将注射部位剪去毛。左手绷紧皮肤,右手持注射器,小于15°角刺入皮内, 注射药液,注射处出现一白色小皮丘。 (3)腹腔注射法: 小鼠:左手捉持小鼠,腹部向上,右手将注 射器针头刺入皮肤,其部位是距离下腹部腹白线 稍向左或右的位置。向前推进3一5mm,接着使注 射器针头与皮肤呈45°角刺入腹肌,继续向前刺 人,通过腹肌讲入腹控后抵抗消失,这时即可轻 轻注入药液。小鼠的一次注射量为0.1一0.2m1/10g 体重(图8)。 大鼠:腹腔注射与小鼠相同。注射量为 图8小鼠腹腔注射法 1-2ml/100g体重。 豚鼠、猫、免等:豚鼠、猫腹腔注射部位同小鼠。兔在下腹部近腹白线左右两 侧约lcm处,犬在脐后腹白线侧边1一2cm处注射为宜。 (4)静脉注射法: 大鼠和小鼠:一般采用尾静脉注射,事先将小鼠和大鼠置于固定的筒内或铁丝 罩内,或扣于烧杯内,使尾巴露出,于45一50℃温水中浸泡、或用60-100瓦电灯 泡烘烤、或用75%酒精棉球擦之,使血管扩张,选择尾巴左右两侧静脉注射,注 射时若出现隆起的白色皮丘,说明未注入血管,应重新向尾根部移动注射。一次注 射量小鼠为0.05一0.1ml/10g体重(图9)。注射完毕后用棉球按压止血。 图9小鼠尾静脉注射法 图10家兔耳缘静脉注射法
5 注射。 豚鼠:注射部位可选用大腿内侧面、背部、肩部等皮下脂肪少的部位。通常为 大腿内侧面注射。一般需两人合作,一人固定豚鼠,一人进行注射。 猫:将臀部皮肤拉起,将注射针刺入皮肤与肌肉之间,注入药液。 犬:将犬的颈部或背部皮肤拉起,注射针刺入皮下进行注射。 (2)皮内注射法: 先将注射部位剪去毛。左手绷紧皮肤,右手持注射器,小于 15°角刺入皮内, 注射药液,注射处出现一白色小皮丘。 (3)腹腔注射法: 小鼠:左手捉持小鼠,腹部向上,右手将注 射器针头刺入皮肤,其部位是距离下腹部腹白线 稍向左或右的位置。向前推进 3—5mm,接着使注 射器针头与皮肤呈 45°角刺入腹肌,继续向前刺 人,通过腹肌进入腹腔后抵抗消失,这时即可轻 轻注入药液。小鼠的一次注射量为 0.1—0.2m1/10g 体重(图 8)。 大鼠:腹腔注射与小鼠相同。注射量为 1—2ml/100g 体重。 豚鼠、猫、免等:豚鼠、猫腹腔注射部位同小鼠。兔在下腹部近腹白线左右两 侧约 lcm 处,犬在脐后腹白线侧边 1—2cm 处注射为宜。 (4)静脉注射法: 大鼠和小鼠:一般采用尾静脉注射,事先将小鼠和大鼠置于固定的筒内或铁丝 罩内,或扣于烧杯内,使尾巴露出,于 45—50℃温水中浸泡、或用 60-100 瓦电灯 泡烘烤、或用 75%酒精棉球擦之,使血管扩张,选择尾巴左右两侧静脉注射,注 射时若出现隆起的白色皮丘,说明未注入血管,应重新向尾根部移动注射。一次注 射量小鼠为 0.05—0.1ml/10g 体重(图 9)。注射完毕后用棉球按压止血。 图 8 小鼠腹腔注射法 图 9 小鼠尾静脉注射法 图 10 家兔耳缘静脉注射法
家兔:一般采用耳缘静脉注射。可用酒精棉球涂擦耳部边缘静脉,或用电灯泡 烘烤免耳使血管扩张。以左手指在兔耳下作垫,右手持注射器,针头经皮下进入血 管。注射时若无阻力或无发生隆起现象,说明针头在血管内,注射完毕,压住针眼, 拔去针头,继续压迫数分钟止血(图10)。 豚鼠:一般用前肢皮下头静脉注射,后肢小隐静脉注射也可以。接近下部比较 容易刺入静脉。注射量一般不超过2ml。 猫:一般采用前肢皮下头静脉注射。注射前先将猫装入固定袋或笼内,左手抓 住前肢,酒精棉球涂擦后,从前肢的末稍端将注射器针头刺入静脉。证实针在静脉 内后,即可注射。 犬:可选用前肢皮下头静脉或后肢小隐静脉注射。以手或橡皮带把静脉向心端 扎紧,使血管充血。酒精棉球涂檫后,针头向近心端刺入静脉,回抽针栓,俏有回 血即可推注药液(图11)。 图11犬后肢外侧小隐静脉左)和前肢背侧皮下头静脉(右)注射法 (5)肌肉注射法: 兔、猫、犬选择两侧臀部或股部肌肉。在固定动物后,注射器与肌肉成60°角, 一次刺入肌肉注射,但应避免针刺入肌肉血管内。注射完后轻轻按摩注射部位,以 助药物吸收。小鼠、大鼠、豚鼠因肌 肉较小,较少采用肌肉注射,若有必 须,以股部肌肉较适,用量不官过大 特别是小鼠,每侧不宜超过0.1ml。 (6)惟管内注射法: 兔:在腰骶部位剪去毛,酒精 球涂檫。一人固定免体并将兔臀部向 腹侧弯曲,使腰骶部凸出,以增大脊 突间隙。一人右手持注射器,将针头 自第一骶骨前面正中轻轻刺入,当刺 图12兔椎管内注射法
6 家兔:一般采用耳缘静脉注射。可用酒精棉球涂擦耳部边缘静脉,或用电灯泡 烘烤兔耳使血管扩张。以左手指在兔耳下作垫,右手持注射器,针头经皮下进入血 管。注射时若无阻力或无发生隆起现象,说明针头在血管内,注射完毕,压住针眼, 拔去针头,继续压迫数分钟止血(图 10)。 豚鼠:一般用前肢皮下头静脉注射,后肢小隐静脉注射也可以。接近下部比较 容易刺入静脉。注射量一般不超过 2ml。 猫:一般采用前肢皮下头静脉注射。注射前先将猫装入固定袋或笼内,左手抓 住前肢,酒精棉球涂擦后,从前肢的末稍端将注射器针头刺入静脉。证实针在静脉 内后,即可注射。 犬:可选用前肢皮下头静脉或后肢小隐静脉注射。以手或橡皮带把静脉向心端 扎紧,使血管充血。酒精棉球涂檫后,针头向近心端刺入静脉,回抽针栓,倘有回 血即可推注药液(图 11)。 (5)肌肉注射法: 兔、猫、犬选择两侧臀部或股部肌肉。在固定动物后,注射器与肌肉成 60°角, 一次刺入肌肉注射,但应避免针刺入肌肉血管内。注射完后轻轻按摩注射部位,以 助药物吸收。小鼠、大鼠、豚鼠因肌 肉较小,较少采用肌肉注射,若有必 须,以股部肌肉较适,用量不宜过大, 特别是小鼠,每侧不宜超过 0.1ml。 (6)椎管内注射法: 兔:在腰骶部位剪去毛,酒精棉 球涂檫。一人固定兔体并将兔臀部向 腹侧弯曲,使腰骶部凸出,以增大脊 突间隙。一人右手持注射器,将针头 自第一骶骨前面正中轻轻刺入,当刺 图 11 犬后肢外侧小隐静脉(左)和前肢背侧皮下头静脉(右)注射法 图 12 兔 椎管内注射法
到椎管时有似刺透硬膜感觉,此时兔尾巴随针刺而动,或后肢有跳动,则证明刺入 椎管,即可注射。 一般一只兔注药 量为0.5-1.0ml(图12). 领下囊 (7)淋巴囊内注射: 蛙及蟾蜍皮下有多个淋巴囊 (图13),对药物易吸收。一般将药 物注射于胸、腹或股淋巴囊。因其 皮肤较薄,为避免药液从针眼中漏 出,故作胸部淋巴囊注射时,针头 由口腔底部穿下颌肌层而达胸部皮 下:作股部淋巴囊注射时,应从小 腿皮肤刺入,通过膝关节而达大腿 部皮下。注入药量一般为0.25-0.5ml。 图13蛙淋巴囊内注射法 实验2药物的基本作用 [目的]通过实验了解药物的兴奋作用与抑制作用,局部作用与吸收作用等。 [器材注射器(5ml×1) [药品]5%盐酸普鲁卡因溶液、0.5%安定溶液。 「动物家兔 方法湖 1.取兔一只,称其体重。先观察正常活动情况,如四肢站立和行走姿态,并 用针刺其后肢,测试有无痛觉反射 2.由一侧坐骨神经周围(使兔作自然俯卧式,在尾部坐骨脊与股骨头间摸到 凹陷处)注人5%盐酸普鲁卡因溶液1m1/kg体重。2-3分钟后,观察和测试同侧 后肢有无运动和感觉障碍,并与对侧比较。 3.待局部作用明显后,再肌肉注射5%盐酸普鲁卡因溶液1ml/kg体重,观察 中毒症状(惊厥)出现与否。 4.待出现明显中毒症状(惊厥)时,立即由耳缘静脉注射0.5%安定溶液 0.5一1ml/kg体重,至肌肉松弛为止。 [结果]描述实验中的观察。 用者颗1 1.本实验中,药物的兴奋作用与抑制作用、局部作用与吸收作用表现在哪些 方面?是否观察到药物间的对抗作用? 2.结合本实验说明普鲁卡因和安定的治疗作用和不良反应
7 到椎管时有似刺透硬膜感觉,此时兔尾巴随针刺而动,或后肢有跳动,则证明刺入 椎管,即可注射。一般一只兔注药 量为 0.5—1.0ml (图 12)。 (7)淋巴囊内注射: 蛙及蟾蜍皮下有多个淋巴囊 (图 13),对药物易吸收。一般将药 物注射于胸、腹或股淋巴囊。因其 皮肤较薄,为避免药液从针眼中漏 出,故作胸部淋巴囊注射时,针头 由口腔底部穿下颌肌层而达胸部皮 下;作股部淋巴囊注射时,应从小 腿皮肤刺入,通过膝关节而达大腿 部皮下。注入药量一般为 0.25—0.5ml。 实验 2 药物的基本作用 [目的] 通过实验了解药物的兴奋作用与抑制作用,局部作用与吸收作用等。 [器材] 注射器(5ml×1) [药品] 5%盐酸普鲁卡因溶液、0.5%安定溶液。 [动物] 家兔 [方法] 1. 取兔一只,称其体重。先观察正常活动情况,如四肢站立和行走姿态,并 用针刺其后肢,测试有无痛觉反射。 2. 由一侧坐骨神经周围(使兔作自然俯卧式,在尾部坐骨脊与股骨头间摸到一 凹陷处)注人 5%盐酸普鲁卡因溶液 1m1/kg 体重。2-3 分钟后,观察和测试同侧 后肢有无运动和感觉障碍,并与对侧比较。 3. 待局部作用明显后,再肌肉注射 5%盐酸普鲁卡因溶液 1ml/kg 体重,观察 中毒症状(惊厥)出现与否。 4. 待出现明显中毒症状(惊厥)时,立即由耳缘静脉注射 0.5%安定溶液 0.5—1ml/kg 体重,至肌肉松弛为止。 [结果] 描述实验中的观察。 [思考题] 1. 本实验中,药物的兴奋作用与抑制作用、局部作用与吸收作用表现在哪些 方面?是否观察到药物间的对抗作用? 2. 结合本实验说明普鲁卡因和安定的治疗作用和不良反应。 图 13 兔 椎管内注射法 图 13 蛙淋巴囊内注射法
实验3不同给药途径对药物作用的影响 [目的观察不同给药途径对尼可刹米作用的影响。 「器材注射器(1ml×)、小鼠灌胃器、玻璃钟罩。 [药品]5%尼可刹米溶液。 「动物小鼠 方法] 小鼠3只,称重,编号甲、乙和丙。先观察正常活动,如呼吸、活动度和运动 协调程度等。然后将甲、乙、丙鼠以5%尼可刹米溶液0.2ml10g体重,分别灌胃、 皮下和腹腔注射,观察给药后各鼠是否出现兴奋、惊厥等症状,并记录出现症状的 时间和小鼠的最终结局。 [结果]将观察结果列表比较。 [思考题] 不同给药途径为什么会影响药物效应? 实验4肝脏功能对药物作用的影响 [目的]观察肝脏功能损害和肝药酶诱导剂和抑制剂对戊巴比妥钠麻醉作 用的影响。 [器材1ml注射器、玻璃钟罩。 药品]5%四氯化碳溶液、 .4%苯巴比妥钠溶液、0.4%戊巴比妥钠溶液 0.8%氯霉素油溶液。 [动物小鼠 方法] 取体重相近的小鼠5只,称重、编号。在实验前48小时,1到4号鼠分别 依次腹腔注射0.1ml/10g体重的5%四氯化碳溶液,0.4%苯巴比妥钠溶液 生理盐水和油溶剂:实验前1小时,第5鼠以0.1ml10g体重腹腔注射0.8%氯 霉素溶液。然后(实验时),每鼠分别腹腔注射0.4%戊巴比妥钠溶液0.1ml /10g体重。记录各鼠翻正反射消失和恢复时间,由此算出麻醉诱导时间和 麻醉维持时间。 [结果] 组 别 麻醉诱导时间(分) 麻醉维持时间(分) 生理盐水组 溶剂组 四氯化碳组 苯巴比妥钠组 氯霉素组
8 实验 3 不同给药途径对药物作用的影响 [目的] 观察不同给药途径对尼可刹米作用的影响。 [器材] 注射器(1ml×l)、小鼠灌胃器、玻璃钟罩。 [药品] 5%尼可刹米溶液。 [动物] 小鼠 [方法] 小鼠 3 只,称重,编号甲、乙和丙。先观察正常活动,如呼吸、活动度和运动 协调程度等。然后将甲、乙、丙鼠以 5%尼可刹米溶液 0.2m1/10g 体重,分别灌胃、 皮下和腹腔注射,观察给药后各鼠是否出现兴奋、惊厥等症状,并记录出现症状的 时间和小鼠的最终结局。 [结果] 将观察结果列表比较。 [思考题] 不同给药途径为什么会影响药物效应? 实验 4 肝脏功能对药物作用的影响 [目的] 观察肝脏功能损害和肝药酶诱导剂和抑制剂对戊巴比妥钠麻醉作 用的影响。 [器材] 1ml注射器、玻璃钟罩。 [药品] 5%四氯化碳溶液、0.4%苯巴比妥钠溶液、0.4%戊巴比妥钠溶液、 0.8%氯霉素油溶液。 [动物] 小鼠 [方法] 取体重相近的小鼠5只,称重、编号。在实验前48小时,1到4号鼠分别 依次腹腔注射0.1ml/10g体重的5%四氯化碳溶液,0.4%苯巴比妥钠溶液, 生理盐水和油溶剂;实验前1小时,第5鼠以0.1ml/10g体重腹腔注射0.8%氯 霉素溶液。然后(实验时),每鼠分别腹腔注射0.4%戊巴比妥钠溶液0.1ml /10g体重。记录各鼠翻正反射消失和恢复时间,由此算出麻醉诱导时间和 麻醉维持时间。 [结果] 组 别 麻醉诱导时间(分) 麻醉维持时间(分) 生理盐水组 溶 剂 组 四氯化碳组 苯巴比妥钠组 氯霉素组
[注意事项] 1.四氯化碳和氯霉素溶液宜用花生油、玉米油或橄榄油配制 2.处于麻醉状态下的小鼠失去对体温调节的能力,易受外界环境温度的 影响,当室内温度低于20℃时,小鼠体温明显下降、麻醉加深,麻醉时间延 长,要注意保温。 3.结果分析宜用全班各组平均值。 [思考题] 1.各组小鼠麻醉诱导时间、麻醉维持时间有无差异,为什么? 2.根据实验结果,分析肝药酶有什么特点? 实验5全血水杨酸钠二室模型药动学参数测定 [目的]用比色法测定水杨酸钠浓度,并用测得的血药浓度数据计算二室模型 药动学参数。 [器材大试管(10ml×11)入、小试管(6mlx9刻度吸管(10ml×2、2ml、5mlx1) 注射器(1ml×2、2ml、5ml×1)、小玻棒、试管架、玻璃蜡笔、移液吸管、普通剪 刀与手术刀(各1入、弯曲管钳、坐标纸、线与棉花少许。粗天平、分光光度计 离心机、计算器(CASIOfx-180P或CASIO-3600P)。 [药品]1%盐酸普鲁卡因溶液、10%及0.04%水杨酸钠溶液、三氯化铁和三氯 醋酸混合液(5g三氯化铁加10%三氯醋酸溶解至100ml)、100uml肝素生理盐水。 [动物家兔 方法] ·、比色法测定全血水杨酸钠浓度 1.取10m1大试管11支,以0一10编号,每管均加入三氯化铁和三氯醋酸混 合试液2ml,9号管再加0.04%水杨酸钠标准液0.6ml,10号管再加蒸馏水0.6ml。 取免1只,称体重,仰缚兔板上,于兔颈部皮下注射1%盐酸普鲁卡因溶液1-2m1, 局麻后分离一侧颈外静脉并在其下方横穿一根细线,供采血时固定静脉用。 2.以100u/ml肝素生理盐水润湿1ml注射器,从该侧颈外静脉采血0.6ml 加入0号大试管中,用干棉球轻压针孔处以防止出血。从已分离出的颈外静脉的对 侧耳缘静脉推注10%水杨酸钠溶液2mg。准确记录给药完毕时间,在给药完毕 后的第1、3、5、10、20、50、80和110分钟从颈外静脉分别采血0.6m1,依次加 入第1-8号大试管中(每次采血后要洗净注射器,以肝素生理盐水润湿备用)。 3.振摇0-8管各1分钟,分别加入蒸馏水5m1再充分振摇1分钟,过滤至小 试管中取滤液备用。9、10两管加蒸馏水5ml,摇匀待用。 4.在分光光度计上,用波长510nm,1cm光径比色杯,以蒸馏水调零,测0-10 号管光密度得d-do。各测试管水杨酸钠光密度与水杨酸钠浓度按下列公式计算: 标准管水杨酸钠光密度D,=dg-d1o 测定管水杨酸钠光密度D=dn-d
9 [注意事项] 1. 四氯化碳和氯霉素溶液宜用花生油、玉米油或橄榄油配制。 2. 处于麻醉状态下的小鼠失去对体温调节的能力,易受外界环境温度的 影响,当室内温度低于20℃时,小鼠体温明显下降、麻醉加深,麻醉时间延 长,要注意保温。 3. 结果分析宜用全班各组平均值。 [思考题] 1. 各组小鼠麻醉诱导时间、麻醉维持时间有无差异, 为什么? 2. 根据实验结果,分析肝药酶有什么特点? 实验 5 全血水杨酸钠二室模型药动学参数测定 [目的] 用比色法测定水杨酸钠浓度,并用测得的血药浓度数据计算二室模型 药动学参数。 [器材] 大试管(10ml×11)、小试管(6ml×9)、刻度吸管(10ml×2、2ml、5ml×1)、 注射器(1ml×2、2ml、5ml×1)、小玻棒、试管架、玻璃蜡笔、移液吸管、普通剪 刀与手术刀(各 1)、弯曲管钳、坐标纸、线与棉花少许。粗天平、分光光度计、 离心机、计算器(CASIOfx-180P 或 CASIO-3600P)。 [药品] 1%盐酸普鲁卡因溶液、10%及 0.04%水杨酸钠溶液、三氯化铁和三氯 醋酸混合液(5g 三氯化铁加 10%三氯醋酸溶解至 100ml)、100u/ml 肝素生理盐水。 [动物] 家兔 [方法] 一、比色法测定全血水杨酸钠浓度 1. 取 10m1 大试管 11 支,以 0-10 编号,每管均加入三氯化铁和三氯醋酸混 合试液 2m1,9 号管再加 0.04%水杨酸钠标准液 0.6m1,10 号管再加蒸馏水 0.6m1。 取兔 1 只,称体重,仰缚兔板上,于兔颈部皮下注射 1%盐酸普鲁卡因溶液 1-2m1, 局麻后分离一侧颈外静脉并在其下方横穿一根细线,供采血时固定静脉用。 2. 以 100u/m1 肝素生理盐水润湿 1m1 注射器,从该侧颈外静脉采血 0.6m1 加入 0 号大试管中,用干棉球轻压针孔处以防止出血。从已分离出的颈外静脉的对 侧耳缘静脉推注 10%水杨酸钠溶液 2ml/kg。准确记录给药完毕时间,在给药完毕 后的第 1、3、5、10、20、50、80 和 110 分钟从颈外静脉分别采血 0.6m1,依次加 入第 1-8 号大试管中(每次采血后要洗净注射器,以肝素生理盐水润湿备用)。 3. 振摇 0-8 管各 1 分钟,分别加入蒸馏水 5m1 再充分振摇 1 分钟,过滤至小 试管中取滤液备用。9、10 两管加蒸馏水 5m1,摇匀待用。 4. 在分光光度计上,用波长 510nm,1cm 光径比色杯,以蒸馏水调零,测 0-10 号管光密度得 d0-d10。各测试管水杨酸钠光密度与水杨酸钠浓度按下列公式计算: 标准管水杨酸钠光密度 D9=d9-d10 测定管水杨酸钠光密度 Dn=dn-do